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同时失活HtrA和ClpP对变异链球菌适应性耐酸能力的影响
变异链球菌的适应耐酸能力是它适应牙菌斑中动态变化酸性环境的关键致龋机制.本实验前期构建变异链球菌htrA-clpP双基因缺陷株(简称htrA-clpP 缺陷株),来探究HtrA和ClpP两种蛋白在变异链球菌耐酸性过程中相互作用机制.将标准株和htrA -clpP缺陷株常规复苏,收集细菌沉淀物用生理盐水适当稀释成菌液备用,用TPY液体培养液分别对两种菌液进行稀释,培养至对数中期后得到细菌沉淀物分成两份,分别加入与上清液等体积的pH5.5(预酸化处理)或7.0 TPY液体培养基中培养5h后收集4种细菌沉淀物,将其加入等体积pH3.0 TPY液体培养液中,在0、1.0、2.0、3.0h取菌液进行逐步稀释,在TPY固体培养基计数,计算生存率,实验步骤重复3次.
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基因诊断技术在致龋菌检测中的应用
龋病被WHO列为三个重点防治疾病之一.龋病的主要致龋菌为变形链球菌(Streptococcus mutans)属兼性厌氧或微需氧菌,本菌被公认是龋病的主要致病菌,其致龋机制在于该菌能利用宿主口腔中的蔗糖合成葡聚糖,其中一部分为不溶于水的葡聚糖,这种多糖是牙菌斑的主要成份.变链菌可代谢这些多糖产生各种酸,从而使牙齿造成破坏[1].在我国龋病的发病率为40%左右,其主要病原菌-变链菌的检测日益受到人们的关注,传统的病原微生物学检测方法,一般依据细菌的形态,生理生化特性及免疫血清分型,不但准确性差而且费时.
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变形链球菌的环境应激反应
变形链球菌能适应不断变化的口腔环境并在其中生存,故而与龋病的发生密切相关.环境应激反应使变形链球菌的多种基因和蛋白质表达水平发生改变,涉及细菌的物质代谢、细胞修复及细胞信号传导系统等多方面.对环境应激反应时变形链球菌毒力因子表达变化的研究可更深入了解其致龋机制.本文就近年来对变链应激反应的分子生物学研究做一综述.