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镉污染胁迫对大麦幼苗基因组DNA多态性影响
目的通过比较镉(Cd)胁迫对大麦幼苗幼苗根尖RAPD图谱与幼苗根系生长、可溶性蛋白含量变化的关系,筛选和确定敏感生物标记物.
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连翘干叶片和鲜叶片DNA提取方法和质量比较研究
目的 探讨三种DNA提取方法对连翘干叶片和鲜叶片DNA质量的影响,比较干叶片和鲜叶片DNA提取质量.方法 采用常规CTAB法、高盐低pH法和新改良CTAB法提取连翘干叶片和鲜叶片DNA,进行A260/A280测定、琼脂糖凝胶电泳检测和RAPD扩增分析.结果 新改良CTAB法提取的连翘干叶片和鲜叶片DNA的A260/A280比值在1.8～2.0之间,电泳条带清晰无拖尾,选用随机引物(S7)对上述DNA样品进行RAPD扩增,可获得具有一定多态性扩增谱带.对连翘干叶片和鲜叶片DNA样品综合比较,结果显示由干叶片获得的DNA质量高于鲜叶片.结论 新改良CTAB法是一种分离高质量完整DNA的简便、快速方法,该方法得到的干叶片DNA质量较鲜叶片更适合下一步分子生物学研究.
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我国金银花栽培品种的遗传多样性
目的:对国内金银花主产区的栽培品种进行遗传多样性分析,为了解不同产区金银花栽培品种的亲缘关系以及金银花新品种选育提供参考.方法:利用RAPD技术分析国内不同产区采集的11份栽培金银花和1份山银花样品,用NTSYS 2.10e软件对统计结果进行聚类分析.结果:17条RAPD引物共扩增出150条清晰可辨的DNA条带,其中113条在不同样品间具有多态性,通过聚类分析可将12份金银花样品分为4个大类.结论:河南封丘、河北巨鹿的金银花品种遗传差异较小,品种较为单一；山东平邑的金银花种质资源相对丰富.研究还发现,不同金银花种源间的遗传关系与地理分布存在相关性.
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桔梗栽培及野生种质遗传多样性的RAPD分析
为了解桔梗栽培种质、野生种质的遗传背景,为桔梗育种及道地药材研究提供依据,采用RAPD方法分析了桔梗20份栽培种质、3份野生种种质及5份遗传材料共92个样品的遗传多样性.从264个随机引物中筛选出多态性较好的6个引物进行全部样品PCR扩增,得到多态性条带58条.所有种质的多态性位点比率(P)为66.67%,Nei's基因多样性指数Ht为0.2099,栽培种质的Ht和P值AT＞AB＞NC＞SZ,野生和遗传材料中各份种质的Ht和P值很低,但总体值仍高;UPGMA聚类和SPSS聚类可以将各种不同来源的种质很好地区分开来.结论:桔梗栽培种质在遗传背景来上为混杂群体,纯系材料遗传背景均一,不同栽培产区桔梗种质已出现明显遗传分化.
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我国特有濒危药用植物降香黄檀遗传多样性研究
应用RAPD标记对降香黄檀的遗传多样性进行研究,从144个10-mer随机引物中筛选出6个具有多态性检测能力的引物.对6个居群的77份降香黄檀样品进行了分析,共检测出33个位点,多态位点18条,占54.55%.物种水平Nei基因多样性指数(h)为0.2137,Shannon信息指数(I)为0.3137,以上三个指标在居群水平的平均值依次为:40.9%、0.1353、0.2048.结果表明降香黄檀遗传多样性较丰富,认为其资源濒危主要源于乱砍滥伐,并提出保护策略.
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RAPD技术在干品中药材鉴别研究中的应用
本文对可用于中药材鉴别研究的分子遗传标记技术进行了简要介绍,系统介绍了RAPD技术用于干品中药材鉴别的研究结果,同时对基因芯片用于中药材鉴别研究的应用前景作了展望.
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川白芷种质的RAPD遗传标记研究
目的:对川白芷生长过程中不同形态的4个类群及杭白芷进行基因组DNA多态性分析,试图从分子水平为其栽培及种质鉴定提供依据.方法:以40个10碱基随机引物进行RAPD分析.结果:共扩增出314个条带,其中多态性条带96条,占31%.结论:川白芷叶柄颜色的不同与是否抽薹无明显的相关性,而产地的差异对遗传变异的影响大于因其叶柄颜色不同所造成的影响.
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连翘干燥叶片高质量DNA的提取方法研究
目的:探讨不同DNA提取方法对连翘干燥叶片的DNA质量及RAPD-PCR标记结果的影响,找出提取连翘总DNA的佳方法.方法:分别用常规CTAB法、高盐低pH法和改良CTAB法提取连翘总DNA,分别进行琼脂糖凝胶电泳、紫外吸收A260/A280和RAPD-PCR分析,通过比较找出提取连翘总DNA的佳方法.结果:以CTAB法为基础的改良CTAB法可获得较高质量的DNA进行PeR扩增.结论:改良CTAB法是一种分离高质量完整DNA的简便、快速方法.
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不同产地连翘新鲜果实DN A提取方法和质量评价研究
目的：建立连翘新鲜果实中高质量DNA的提取方法，为从分子水平研究和评价连翘药材质量奠定基础。方法采用改良的CTAB法提取连翘的总DNA，应用琼脂糖凝胶电泳法、分光光度法与PCR法对连翘DNA产率和质量进行检测评价。结果14批连翘药材核酸蛋白仪测定值A260/A280均在1．7～1．9之间，改良CTAB法提取的连翘总DNA浓度较大，干扰较小，较高质量的DNA可进行PCR扩增，1％琼脂糖凝胶电泳之后用紫外成像仪观察结果正常。结论改良CTAB法适合连翘新鲜果实中DNA的提取，方法简单可靠。
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西部地区濒危药用植物秦艽遗传多样性的RAPD分析
目的:对甘肃、陕西、宁夏、四川及青海5个主产地秦艽的遗传多样性进行分析.方法:用随机扩增多态性DNA标记(RAPD)技术对11个秦艽种群90个个体基因组DNA的遗传多样性进行检测.结果:RAPD 8条引物检测到65条扩增条带,其中有59条是多态的,多态位点百分比达到97.78％.通过聚类分析可将秦艽的11个种群聚为两类,四川和陕西两省4个种群聚为一类；甘肃、宁夏和青海省7个种群聚为一类.结论:甘肃省环县种群、子午岭种群和华亭种群应作为秦艽的重要种群加以优先重点保护.
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松果菊属3种药用植物的DNA分子鉴别研究
目的:对松果菊属3种药用植物进行DNA指纹图谱鉴别,筛选出稳定的鉴别引物.方法:RAPD.结果:共筛选随机引物160个,3种松果菊中,狭叶松果菊与淡紫松果菊的RAPD图谱极其相似,难以区分.终仅筛选得到一个可用于鉴别的随机引物H07.结论:引物H07可用于3种松果菊的原植物与药材鉴别,狭叶松果菊与淡紫松果菊具有明显较近的亲缘关系.
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药用菊花遗传多样性的RAPD分析
目的:分析不同药用菊花栽培类型的遗传差异.方法:采用2%CTAB法进行药用菊花的DNA提取,并用RAPD技术对22个类型药用菊花种质资源的DNA进行检测,采用NTSYS软件对扩增结果进行统计和聚类.结果:筛选得到的26个引物共得到了233条扩增DNA片断,其中89.7%的扩增条带表现出多态性,每个引物平均可扩增得到8.04条多态性片断.聚类分析结果表明利用RAPD技术可将全部供试材料区分开.结论:药用菊花种质资源在分子水平上确实存在较大差异;药用菊花栽培类型间的差异与环境因素有关,但更大程度上由其遗传因素决定.
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海龙及其常见伪品的RAPD鉴别
目的:提供一种鉴别中药材海龙及其伪品的方法.方法:采用随机引物扩增DNA技术,对拟海龙、刁海龙、尖海龙、粗吻海龙、海蠋鱼、宝珈海龙进行基于Nei ＆Li's相似系数的UPGMA聚类分析,并构建其鉴别模式.结果:从18条随机引物中筛选到LJ04,LJ09,LJ16,LJ19 4条引物能扩增出稳定可靠的条带.基于以上4条随机引物构建的聚类图能较好的从属水平区分各海龙样品,且与样品外观分析结果一致.基于LJ09,LJ19 2条引物的扩增结果构建的6种海龙的鉴别模式可以将海龙正品逐一鉴别出来.结论:随机引物扩增DNA技术能较好地鉴别海龙及其伪品.
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银杏不同变异类型的RAPD指纹研究
目的:分析银杏变异类型的遗传分化及其遗传多样性水平.方法:用随机扩增多态性DNA(RAPD)标记方法对28个银杏变异类型进行遗传多样性检测和遗传分析.结果:供试银杏样品之间遗传多样性水平较低,遗传关系较近.结论:开发银杏种质资源时,首要任务是扩大银杏的自然变异率,并在此基础上,通过无性繁殖的方式,选育药用银杏新品种.
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药用金荞麦遗传多样性的RAPD分析
目的:对野生金荞麦进行遗传多样性研究.方法:通过RAPD技术对7个野生金荞麦居群共87个个体进行遗传多样性分析.结果:用12个随机引物共扩增出85条清晰条带,其中75条具多态性,平均多态性位点比率为88.24%,Nei's基因多样性指数H=0.310 3,Shannon多样性指数I=0.563 2,遗传分化指数G_(st)=0.192 4.结论:金荞麦种内具有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于居群内部,遗传多样性与地理关系表现出明显的相关性.RAPD可以作为研究遗传多样性及遗传分化的有效标记.
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野生地黄种内遗传多样性的RAPD,ISSR分析
目的:分析野生地黄群落之间的遗传差异类型,比较RAPD和ISSR分子标记在分析地黄野生种质遗传多样性中的应用.方法:应用RAPD和ISSR分子标记技术,对55份地黄材料进行了遗传差异分析.结果:平均每条RAPD引物扩增出16.00条带,平均每条ISSR引物扩增出19.08条带,多态性位点百分率分别为89.58%和94.32%;聚类分析表明,55份地黄分成7大类群.结论:野生地黄具有丰富的遗传多样性;不同地理居群的相似性为0.63～0.98;ISSR标记比RAPD标记能检测到地黄种内更高的遗传差异性.
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石斛属RAPD分析及鉴定铁皮石斛的特异性引物设计
目的：对石斛属植物亲缘关系进行分析，并设计一对能方便准确地鉴别铁皮石斛的特异性引物。方法：用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对石斛属内26个种和金石斛属的1个种进行了基因组DNA多态性分析，并构建聚类树状图。根据筛选到的DNA片段序列，将Sangon18引物从3'端延长至20 bp,得到所要的特异性引物。结果和结论：设计成的特异性引物能方便快捷地鉴别出铁皮石斛。此技术为药材的分子鉴定提供了一个新思路。
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地黄不同品种遗传关系的RAPD分析
目的:揭示地黄不同品种的亲缘关系和遗传特点.方法:采用RAPD技术和群体遗传学的分析方法,对地黄16个栽培品种、2个野生居群共54个个体进行了亲缘关系、遗传多样性和遗传结构分析.结果:邻接法构建的多数一致树将54个地黄样品划分为3个明显的类群;Popgene和AMOVA分析均显示地黄品种间的遗传分化大于品种内;类群II所包含的各品种未表现出明显的遗传分化.结论:长期的无性繁殖为地黄积累了一定的遗传分化,野生地黄与栽培品之间遗传距离较大,但在主要栽培品种中遗传分化不明显,显示遗传背景较为单一.野生地黄作为地黄的育种资源应给予充分重视和研究.
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用RAPD技术对人参栽培群体的遗传分析
目的:通过对栽培人参不同品系之间的遗传多样性进行研究,为人参品种选育提供参考.方法:采用SPSS 10.0软件计算Dice遗传相似性系数,Between-groups linkage方法聚类,构建亲缘关系系统图.结果:共筛选出18个10 碱基随机引物用于PCR扩增,17个供试样品共获得145条扩增片段,其中有53条是多态的,占36.5%.聚类分析结果表明:大马牙类型内各品系间的亲缘关系近于与二马牙类型各品系样品间的亲缘关系,从分子水平证明了根据表征性状对栽培类群进行划分是可行的.结论:RAPD对人参新品种培育进行辅助选择是一种良好的分子标记.
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不同种源黄芩的RAPD分析
目的:探讨黄芩不同种源的遗传多样性和亲缘关系,为黄芩育种提供依据.方法:采用14个10碱基随机引物,利用SPSS 10.0软件中的Within-groupslinkage方法,对34个黄芩不同种源进行RAPD分析.结果:从115个引物中筛选出14个条带清晰、多态性明显并且重复性好的引物用于实验和统计分析,14个引物共扩出165个DNA片段,多态性DNA片段132个,占总扩增数的80.0%.34个黄芩种源可明显聚为A,B,C,D等4大类.结论:不同种源黄芩间具有丰富的遗传多样性;山东蒙阴3、山东蒙阴2、山东平邑种源间的遗传距离(0.315)较近,可考虑在黄芩系统选育中作为单一品种育种;黄芩种源间的遗传背景较为复杂,在遗传学上的分析结果与其外观形态大体上相似,但是与地理分布却没有一定的相关性,提示在黄芩良种选育过程中必须加强优良种子的选育和管理.
