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中西医结合疗法治疗慢性支气管炎的临床效果
目的:探讨中西医结合疗法治疗慢性支气管炎的临床效果.方法:选取2014年1月至2014年12月期间我院收治的慢性支气管炎患者100例,随机数字法将其分为观察组与对照组,每组各50例.对照组患者以常规西医法进行治疗,包括沐舒坦、头孢唑肟及左氧氟沙星联合治疗;观察组患者在此基础上加以鲜竹沥口服液与金荞麦胶囊进行治疗,比较两组患者的治疗效果.结果:观察组治疗总有效率为96％,明显高于对照组82％,组间差异具有统计学意义(P＞0.05).结论:中西医结合疗法治疗慢性支气管炎效果显著,优于单纯西医治疗,可进行推广使用.
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茶叶、槐米、金荞麦、红花醇提物的抗氧化活性的比较研究
目的:比较茶叶、槐米、金荞麦、红花的70%乙醇提取物的抗氧化活性.方法:低温条件下制备大鼠肝微粒体,建立Fe2+-ADP-NADPH体外氧化体系,通过计算半数抑制浓度评价上述4种中药的抗氧化活性.结果:茶叶、槐米、金荞麦、红花的IC50分别为0.030,0.041,0.324,0.598 mg·mL-1.结论:4种提取物均有抗脂质过氧化活性,且活性由大到小依次为茶叶、槐米、金养麦、红花.
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金荞麦叶片光合响应特征及光合参数日变化
目的:研究金荞麦叶片光合响应特征及光合参数日变化与环境因子之间的相互关系.方法:利用便携式光合测定仪测定金荞麦叶片光合参数日变化和光响应曲线.结果:金荞麦叶片净光合速率日变化、气孔导度日变化均呈双峰曲线,有明显的光合午休现象;净光合速率数值分别为19.13,16.54 μmol·m-2·s-1,谷底出现在14:00左右,净光合速率值为15.04 μmol·m-2·s-1,约为大峰值的78.62％,此时出现了较为明显的光合午休现象.净光合速率(Pn)与主要影响因子光合有效辐射(PAR),蒸腾速率(Tr),气孔导度(Gs)呈正相关,与大气CO2浓度(Ca),胞间CO2浓度(Ci)呈负相关.结论:金荞麦为气孔限制型植物,Pn存在明显的光合午休现象,光合有效辐射、蒸腾速率、气孔导度、大气温度是影响金养麦叶片Pn的主要影响因子.
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表面活性剂协同微波提取金荞麦总黄酮的工艺优选
目的:优化金荞麦中总黄酮的提取工艺.方法:以微波功率、十二烷基硫酸钠质量分数、料液比和微波辐射时间为自变量,总黄酮提取量为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归,采用星点设计-响应面法优选提取工艺并进行预测分析.结果:佳工艺条件为微波频率175 W,十二烷基硫酸钠质量分数1.28％,料液比1∶21 g·mL-1,微波辐射时间3.6 min;金荞麦中总黄酮提取量达1.06 mg·g-1,与热回流法、微波法、超声法相比,总黄酮提取量分别提高了35％,14％,21％.结论:该工艺简便可行,具有省时节能、提取率高等优点,适用于金荞麦总黄酮的提取.
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金荞麦辅治小儿支气管肺炎40例
2003年3月-2004年3月,笔者运用金荞麦辅治小儿支气管肺炎40例,并与单纯西药治疗40例对照,取得良好疗效,现报道如下.
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金荞麦中表儿茶素提取工艺的研究
以表儿茶素为考察指标,以正交实验设计法为依据,重点考察提取溶剂乙醇的浓度、提取次数和提取时间3个因素,每个因素3个水平,按L9(34)正交表设计实验,采用高效液相法测定其含量.实验证明,佳提取工艺条件为45％的乙醇回流提取3次,每次1h.本优选工艺稳定可行,提取率高,重现性好.
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高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量
目的:建立可测定金荞麦饮片中表儿茶素含量的高效液相色谱-电化学检测法.方法:采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm ,5μm)柱,流动相甲醇-0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液(1:3,pH2.5),流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,参比电极ISAAC(in-situ silver/silver chloride),工作电极玻碳电极,检测电位+600 mV.结果:表儿茶素的线性范围为0.004 875～1.56μg,r=0.999 9;平均回收率为100.7%,RSD 1.9%(n=5).9批不同市售来源的金荞麦饮片中表儿茶素的含量存在差异.结论:该方法重复性好,可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量.
关键词： 高效液相色谱-电化学检测法 金荞麦 表儿茶素 -
金荞麦中的酚酸类成分
目的:研究中药金荞麦中的化学成分.方法:采用多种色谱方法分离化学成分,依据理化性质、波谱数据分析进行结构鉴定.结果:从金荞麦中分离鉴定了4个酚酸类成分,分别为反式对羟基桂皮酸甲酯(trans-p-hydroxy cinnamic methyl ester,Ⅰ),3,4-二羟基苯甲酰胺(3,4-dihydroxy benzamide,Ⅱ),原儿茶酸(protocatechuic acid,Ⅲ),原儿茶酸甲酯(protocatechuic acid methyl ester,Ⅳ).结论:其中化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ为首次从荞麦属植物中分离得到.
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药用金荞麦遗传多样性的RAPD分析
目的:对野生金荞麦进行遗传多样性研究.方法:通过RAPD技术对7个野生金荞麦居群共87个个体进行遗传多样性分析.结果:用12个随机引物共扩增出85条清晰条带,其中75条具多态性,平均多态性位点比率为88.24%,Nei's基因多样性指数H=0.310 3,Shannon多样性指数I=0.563 2,遗传分化指数G_(st)=0.192 4.结论:金荞麦种内具有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于居群内部,遗传多样性与地理关系表现出明显的相关性.RAPD可以作为研究遗传多样性及遗传分化的有效标记.
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金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1的克隆及分子特征分析
目的:对金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1进行克隆和序列特征分析.方法:采用RACE结合cDNA文库筛选的方法,从金荞麦cDNA文库中克隆MYBP1基因(FdMYBP1);生物信息学分析,Southern杂交.结果:克隆到1个MYBP1转录因子基因(FdMYBP1),通过Southern杂交分析,推测FdMYBP1基因是1～2个拷贝基因;FdMYBP1基因编码1个长256个氨基酸的蛋白质,在N端存在1个保守结构域,属于MYB转录因子家族.结论:首次从金荞麦中克隆到转录因子基因FdMYBP1,它具有MYB同源基因的典型特征,可能在金荞麦类黄酮代谢途径中起作用.
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急支糖浆中原儿茶酸等4种成分的含量测定
急支糖浆由鱼腥草、金荞麦、四季青、紫菀、前胡、枳壳、麻黄和甘草等8味中药组成,用于治疗急性支气管炎和慢性支气管炎急性发作.
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干旱及增强UV-B胁迫对金荞麦生物量积累与分配的影响
目的:研究干旱胁迫和增强UV-B辐射对金荞麦生物量积累与分配的影响,以期作为金养麦规范化种植提供科学理论依据.方法:采用盆栽试验的方法,测定金养麦在不同程度干旱胁迫和UV-B辐射处理下各器官生物量,并计算生物量分配的情况.结果:在充足水分状况下:增强UV-B辐射显著降低了金荞麦各器官生物量积累,降低了金荞麦根生物量配置,提高了金养麦茎生物量配置.在中度干旱胁迫下,增强的UV-B辐射提高了金荞麦根生物量积累和配置、茎生物量积累.在重度干旱胁迫下,增强的UV-B辐射提高了金养麦根生物量积累,能使金荞麦茎生物量积累得到一定提高,金荞麦各器官生物量配置对增强UV-B辐射均不甚敏感.结论:增强的UV-B辐射对金荞麦生物量积累和分配的影响因水分状况的差异和器官的差异而不同.总体看来,基本证实了增强UV-B辐射能减轻干旱胁迫对金荞麦生物量积累的影响.
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提取金荞麦愈伤组织总RNA的一种有效方法
目的:建立金荞麦愈伤组织总RNA提取方法.方法:采用CTAB法结合LiCl沉淀的改良方法提取RNA,紫外分光光度检测、0.8%非变性琼脂糖凝胶电泳检测,RNA的反转录等评价RNA质量.结果:提取的总RNA 28S和18S条带清晰,且A260/A280在1.9～2.0,以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广(500bp～5 kb).结论:该方法提取出的总RNA质量能满足RT-PCR等分子生物学操作的要求,且简单、有效、经济,可用于金荞麦愈伤组织总RNA的提取.
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金荞麦苯丙氨酸解氨酶基因FdPAL的克隆及原核表达
目的:克隆金荞麦苯丙氨酸解氨酶(FdPAL)基因DNA和全长cDNA序列,对该基因进行序列分析,原核表达及其活性相关研究.方法:采用同源克隆和RT-PCR技术扩增苯丙氨酸解氨酶基因的DNA序列和全长cDNA序列并对其进行生物信息学分析；构建PAL原核表达载体pET30b(+)-FdPAL,在大肠杆菌Escherich coli BL21( DE3)中进行诱导表达,使用分光光度计法定量测定其酶活,使用薄层色谱法鉴定其催化活性.结果:金养麦PAL基因DNA序列全长2 583 bp,由2个外显子,1个内含子构成(命名为FdPAL,GenBank登录号为HM628904)；cDNA序列包含1个2 169 bp的开放阅读框(ORF),编码722个氨基酸,理论相对标准分子质量78.31 kDa,等电点5.94.SDS-PAGE分析表明,诱导后的新生蛋白质相对标准分子质量为75.37 kDa;诱导4h后,表达产物的苯丙氨酸解氨酶比活力高,达到4 386 nmol·g-1·min-；薄层色谱结果表明,诱导表达产物具有催化苯丙氨酸转化为肉桂酸的活性.结论:首次从金荞麦中克隆到PAL基因,该基因具有植物PAL同源基因的典型特征；重组的金荞麦PAL基因表达载体[pET30b(+)-FdPAL]能有效地在大肠杆菌Ecoli BL21 (DE3)中表达,并形成具有一定催化功能的酶.
关键词： 金荞麦 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 基因克隆 表达 -
金荞麦提取物主要活性成份在溃疡性结肠炎模型小鼠体内的组织分布
目的 研究金荞麦(fagopyrumcymosum,FAG)主要提取物中活性成分在硫酸葡聚糖(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠模型体内组织分布特征.方法 建立同时测定小鼠组织样品中FAG提取物中的4种活性成分,即儿茶素、表儿茶素、原花青素B1及原花青素B2的LC-MS/MS分析方法,考察该方法的专属性、线性、低定量限、准确度和精密度、基质效应、回收率和稳定性.采用饮用3％ DSS水7d的方法建立UC小鼠模型,应用2.28 g/kg的FAG提取物给于正常及UC小鼠,于不同时间点取正常及UC小鼠的血浆、结肠、空肠、肝脏,用于后续的分析检测.结果 方法学考察结果表明,该方法符合生物样品分析的要求,可用于测定生物样品中儿茶素、表儿茶素、原花青素B1和原花青素B2的浓度.FAG活性成份儿茶素、原花青素B1和原花青素B2在UC小鼠中的血浆暴露程度均有所增加,但不具显著性差异(P＞0.05).组织分布结果表明其主要活性成分在UC小鼠的空肠、结肠组织及肝脏组织中的浓度比正常组要高.如表儿茶素在UC小鼠给药4h后的结肠组织中(5.77 μg/g±0.59 μg/g)浓度显著大于正常小鼠(4.44 μg/g±0.32 μg/g)的结肠组织分布(P=0.0014).结论 在UC病理状态下,FAG活性成分在肠道的高浓度分布,可以有效地保证其效应的发挥.
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金荞麦无色花色素还原酶基因FdLAR的克隆和表达分析
无色花色素还原酶(leucoanthocyantin reducase,LAR)基因是植物类黄酮代谢途径中催化缩合单宁合成的一个关键结构基因,本研究通过简并PCR结合RACE的方法,获得了1个金荞麦(Fagopyrum dibotrys (D.Don)Hara)无色花色素还原酶基因FdLAR(GenBank accession:JN793953),序列全长1 581 bp,其中开放阅读框长1 176 bp,编码391个氨基酸的蛋白质,在N端存在1个保守结构域,属于RED蛋白家族.将该基因重组到表达载体pET-32a(+)中进行原核表达,经IPTG诱导、SDS-PAGE检测,结果表明金荞麦无色花色素还原酶基因能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,电泳检测到l条大约66 kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量相符.利用实时荧光定量PCR技术检测FdLAR基因在金荞麦根茎中不同生长发育时期的表达情况,同时测定相应根茎中类黄酮的含量,结果表明FdLAR基因的表达量与类黄酮积累之间的关系在营养生长和生殖生长阶段呈现出不同的变化趋势,推测该基因可能在金荞麦类黄酮次生代谢产物积累中起作用.
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金荞麦的采收与鉴别
金荞麦名见《植物名实图考》，误冠以“赤地利”之名。而本品并非是《唐本草》的“赤利地”。因《唐本草》、《途径本草》、《本草纲目》等都载赤利地是蔓生，而且《证类本草》“华州赤利地”的附图叶显然与金荞麦不同。吴其濬曰：“江西、湖南通呼为天荞麦，亦曰金荞麦。茎赤叶青，花叶俱如荞麦，其根赭硬……”观其附图与现实药用的金荞麦一致。《本草从新》和《本草纲目拾遗》载有“开金锁”。《本草从新》载：“产江浙，叶如萆薢，高三四尺，根如首乌而无棱，肉白色而无纹，略似菝葜而无刺，”亦即指此而言。
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药用植物金荞麦60Co-γ辐射诱变的(-)表儿茶素研究
目的:检验60Co-γ辐射对金养麦(-)-表儿茶素的影响.方法:采用60Co-γ射线对绿茎金荞麦的幼嫩根茎进行辐射处理,从中扶得红茎突变体.利用HPLC方法,对不同辐射处理的M,进行分析.结果; 辐射处理对金荞麦的有效成分(-)-表儿茶素含量具有明显影响.本试验内,所有辐射剂量处理的(-)-表儿茶素含量均高于对照,其中20Gy的绿茎植株为0.0841%,15Gy的红茎植株0.1027%;绿茎植株除15Gy与对照无差片外,其它处理与对照之间均达到极碌著差异(p<0.01).红茎植株除5Gy外,其它处理与对照均达到极显著差异(p<0.01).结论;利用60Co-γ射线辐射处理对金养麦进行(-)-表儿茶素改良是可行的,为其它药用植物的有效成分改良提供借鉴.
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《本草纲目拾遗》中金锁银开的考释补
《本草纲目拾遗》卷七藤部,记有民间草药金锁银开,笔者有专文对其考释,论述该条收载的金锁银开有三种,它们分别是今铁线蕨科植物扇叶铁线蕨,即过坛龙;蓼科植物天荞麦,即金荞麦;蓼科植物贯叶蓼,即杠板归.赵氏在卷首正误篇的第五条上,也提到过金锁银开,它却并非上述三种植物,而是另有所指,今对其试释如下:
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金荞麦块根化学成分的研究
目的 研究金荞麦Fagopyrum dibotrys块根中的化学成分.方法 采用色谱分离技术进行分离和纯化,并根据谱学数据鉴定化合物的结构.结果 从金荞麦块根的甲醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为木犀草素(1)、苜蓿素(2)、木犀草素7,4'-二甲醚(3)、槲皮素(4)、芫花素(5)、金圣草黄素(6)、原儿茶酸(7)、原儿茶酸甲酯(8)、对羟基苯甲醛(9)、赤杨酮(10)、赤杨醇(11)、olean-12-ene-3β,7β,15α,28-tetraol (12)、iuglangeninA(13)、21β-dihydroxy-olean-12-ene (14).结论 化合物5和6为首次从金荞麦中分离得到,化合物12～14为首次从荞麦属植物中分离得到.
