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  • 海南省某医院103株鲍曼不动杆菌复合群β-内酰胺类耐药性与碳青霉烯酶携带情况分析

    作者:陈海;陈霞;袁敏;朱雄;黎礼达;李欢;张利锋;龚林;李娟

    目的 鲍曼不动杆菌复合群细菌是临床可造成感染的重要条件性致病菌,本研究旨在调查和分析我国海南省临床来源鲍曼不动杆菌复合群细菌对常用β-内酰胺类药物的耐药性及菌株碳青霉烯酶携带情况,探讨其耐药流行性特点.方法 采用微量肉汤稀释法对103株采集自2012-2013年海南省三亚市人民医院的非重复鲍曼不动杆菌复合群细菌进行7种抗菌药物的药敏检测;应用聚合酶链反应(PCR)对收集的鲍曼不动杆菌复合群细菌进行9种碳青霉烯酶编码基因的筛查.结果 103株鲍曼不动杆菌复合群细菌对哌拉西林、头孢他啶、头孢噻肟的耐药率较高(接近50%),对头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为40%,对亚胺培南和美罗培南的耐药率均在20%左右;PCR检测显示有38株携带blaOXA-58基因,62株blaOXA-66基因,其中25株同时携带有这两种基因;其余7种碳青霉烯酶编码基因筛查结果为阴性.结论 本研究中鲍曼不动杆菌复合群细菌对β-内酰胺类药物耐药性较高,菌株携带的blaOXA-58和blaOXA-66基因编码的碳青霉烯酶对菌株的耐药表型有一定贡献意义,但仍有其他耐药机制参与到碳青霉烯酶耐药表型的贡献中.

  • OXA-48的相关特性

    作者:龚林;袁敏;卢金星;李娟

    苯唑西林酶OXA-48是一种D类碳青霉烯酶,近年来在肠杆菌科中报道日益增多.该酶对青霉素类水解能力很强,对碳青霉烯类药物活性较弱,酶活性不能被β-内酰胺酶抑制剂抑制.blaOXA-48基因上下游分别有一插入序列IS1999,共同组成转座子Tn1999.大多数菌株中,blaOXA-48基因位于一个可转移并且不携带其他耐药基因的62kb的质粒上,因此可以在细菌间广泛传播.PCR技术是检测菌株是否携带blaOXA-48基因的金标准.

  • 1例阴沟肠杆菌碳青霉烯类抗生素 耐药的机制研究

    作者:夏菲;张青;李克诚;钱定良

    目的 对浙江省瑞安市人民医院临床分离的1株碳青霉烯类抗生素耐药的阴沟肠杆菌的耐药机制进行研究.方法 通过E-test检测阴沟肠杆菌及接合菌株的低抑菌浓度,Hodge试验检测碳青霉烯酶,采用接合实验、聚合酶链反应(PCR)、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳及耐药基因克隆测序分析细菌的耐药机制.结果 接合试验显示阴沟肠杆菌中的碳青霉烯类耐药基因位于质粒上,基因扩增、测序、比对等方法测得此耐药基因为BlaKPC-2型.结论 阴沟肠杆菌碳青霉烯类药物耐药由质粒介导的KPC-2酶引起.

  • 儿科耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌携带β-内酰胺酶基因的调查

    作者:刘彩霞;严春;李方去;张盼

    目的 调查温州医科大学附属第二医院儿科耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant enterobacteriaceae,CRE)携带β-内酰胺酶基因的情况,同时分析细菌的药物敏感性,指导临床合理使用抗菌药物.方法 采用全自动微生物鉴定系统对菌株进行鉴定和药敏;用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶检测;用聚合酶链反应方法扩增β-内酰胺酶基因,包括blaKPC、blaTEM、blaSHV、blaIMP-1、blaIMP-2、blaVIM-1、blaVIM-2、blaCTXM-1、blaCTXM-2、blaCTXM-9和blaNDM-1.结果 2011年1月至2012年12月该院儿科共分离到13株CRE.对常用的β-内酰胺类抗菌药物及其酶抑制剂均耐药,对复方新诺明耐药率达100%,对阿米卡星的耐药率低,为7.69%,其次为妥布霉素为15.38%.所有菌株均检测到blaTEM,blaKPC的检出率达84.62%,blaSHV、blaCTXM-1、blaCTXM-9和blaVIM-1的检出率分别为46.15%、46.15%、15.38%和7.69%.结论 温州医科大学附属第二医院儿科CRE菌株主要携带的β-内酰胺酶基因为blaTEM、blaKPC和blaSHV,产KPC型碳青霉烯酶是儿科CRE对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因;该类细菌均表现为多重耐药,阿米卡星可作为该类细菌引起感染的首选药物.

  • 临床来源碳青霉烯耐药大肠埃希菌药物敏感性及分子流行病学特征分析

    作者:贾园春;袁敏;陈东科;周海健;陈霞;赵晓菲;李娟;陈会波

    目的 探讨临床分离的碳青霉烯耐药大肠埃希菌药物敏感性特征及分子流行病学特征,为院内感染控制及临床治疗提供基础数据.方法 收集某医院临床分离的21株对碳青霉烯类药物耐药的大肠埃希菌,采用琼脂稀释法测定菌株对11种临床常用药物的低抑菌浓度(MIC);Carba NP试验检测菌株产碳青霉烯酶情况;采用PCR扩增及序列比对检测耐药基因(包括blaNDM、blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOxA)携带状况;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)对菌株进行分子分型.结果 21株碳青霉烯耐药大肠埃希菌中,对哌拉西林、头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶等β-内酰胺类药物和左氧氟沙星耐药率为100.00%;对甲氧苄啶-磺胺甲恶唑的耐药率也高达76.19%;对米诺环素、阿米卡星和磷霉素的耐药率相对较低,分别为23.81%、23.81%和19.05%.Carba NP试验阳性菌株17株,均携带blaNDM-1基因,其余4种基因检测均为阴性.MLST显示21株菌株共有9种ST型别,其中携带blaNDM-1基因的大肠埃希菌主要为ST167型和ST540型.PFGE显示来自泌尿外科的3株菌株电泳图谱完全相同,另外来自不同病房的2株菌株电泳图谱也完全相同,提示医院内存在同一克隆菌株传播的可能.结论 该医院碳青霉烯耐药大肠埃希菌基因型分布呈现多态性;对碳青霉烯类药物耐药的机制主要是携带blaNDM-1基因;携带该基因的大肠埃希菌对临床常用抗菌药物往往呈现多重耐药,给临床治疗带来了困难.加强对碳青霉烯耐药菌株基因型和耐药基因的检测,将对减缓或阻断耐药菌的传播具有重要意义.

  • 改良Hodge试验检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的临床应用

    作者:张裕祥;王立;尹宁;黄庆红

    目的:探讨改良Hodge试验检测KPC型碳青霉烯酶佳底物及其临床应用。方法:收集102株多重耐药的肠杆菌科细菌,选择使用亚胺培南、美罗培南、厄他培南为改良Hodge试验的不同底物,筛选产碳青霉烯酶表型株。结果:以厄他培南为佳检测底物在102株肠杆菌科细菌中检出12株改良Hodge试验阳性株。8株产丝氨酸类(SCHBLS)碳青霉烯酶,4株产金属类(MCHBLS)碳青霉烯酶。12株改良Hodge试验阳性菌体外药敏试验结果表明,对临床常用抗菌药物均耐药。结论:改良Hodge试验的佳底物为厄他培南。对耐碳青霉烯酶类抗生素的肠杆菌科细菌进行表型检测能更好地降低多重耐药菌的流行性,指导临床合理、有效地联合应用抗菌药物,提高临床疗效。

  • 产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌耐药特性及耐药基因分析

    作者:王芳;魏任雄;张肖肖;夏晴晴;周铁丽

    目的 调查某医院阴沟肠杆菌中产碳青霉烯酶菌株耐药性及基因型分布.方法 分离鉴定2015年10月-2017年6月期间临床送检标本中阴沟肠杆菌,运用纸片扩散法(K-B法)检测抗菌药物敏感性;应用改良-Hodge试验检测阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶表型,采用PCR方法检测阳性株携带相关酶基因情况.结果 分离出的298株阴沟肠杆菌中33.2%来源于呼吸科,21.8%来源于重症医学科.共鉴定出26例产碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌菌株.碳青霉烯酶阳性菌株对头孢拉定、头孢美唑等头孢类抗生素和亚胺培南、美罗培南等耐药率为100%;对哌拉西林/他唑巴坦复合制剂和阿米卡星耐药率较高,分别为88.5%和76.9%,对复方新诺明耐药率相对较低,为30.8%;26株产酶菌株携带的碳青霉烯酶基因以blaKPC为主,blaIMP和blaNDM-1也有检出.结论 该院分离的产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌主要为产KPC、VIM和NDM-1酶菌株,且耐药性较强,提示临床医生应重视抗菌药物合理应用,强化耐药菌监控.

  • 携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌医院内感染暴发的病原学分析

    作者:黄支密;糜家睿;盛以泉;邹玉秀;储秋菊;葛丽卫;杨海燕

    目的 了解引起医院内感染暴发临床分离的泛耐药肺炎克雷伯菌(Kpn)KPC型碳青霉烯酶基因blaKPC存在状况.方法 2008年11月至2009年7月从住院患者中分离19株泛耐药Kpn,采用改良Hodge试验检测菌株产碳青霉烯酶情况,采用PCR及序列分析的方法分析blaKPC基因.结果 19株泛耐药Kpn改良Hodge试验结果均阳性、blaKPC基因阳性率为100.0%,序列分析确认均为blaKPC-2亚型,其中HZ001号菌株(原始编号HZ9871)blaKPC-2基因序列已登录GenBank,注册号为GU086225.结论 临床分离的泛耐药Kpn均携带blaKPC-2基因,而产KPC-2型碳青霉烯酶是分离菌株对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因.

  • 亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶研究

    作者:周华;杜小幸;杨青;周建英;俞云松;李兰娟

    目的 研究中国部分地区临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶基因型及16s rRNA甲基化酶基因.方法 收集6省市25家医院2004年12月至2005年12月临床分离的342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌;采用琼脂稀释法和E-test法测定菌株对14种抗菌药物的低抑菌浓度(MIC);脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析亚胺培南耐药菌株同源性;PCR及克隆测序分析碳青霉烯酶基因和16S rRNA甲基化酶基因型.结果 342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦两个含舒巴坦制剂耐药率分别为68.0%、54.2%,对多粘菌素E耐药率低为10.8%,对米诺环素耐药率75.9%,对妥布霉素耐药率87.4%,对其他抗菌药物的耐药率均在90%以上;342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌PFGE分型中303株菌株属于6个广泛流行的克隆株;342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌中322株携带OXA-23基因,全部携带OXA-66基因,314株菌株OXA-23基因上游榆测到插入序列ISAbal,13株OXA-66基因上游检测到ISAbal;287株对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、异帕米星、奈替米星全部耐药的菌株巾有221株携带armA型16S rRNA甲基化酶基冈.结论 OXA-23组D类β-内酰胺酶基因是主要的碳青霉烯酶基因型,插入序列ISAbal在介导鲍曼不动杆菌对哑胺培南耐药中起重要作用;16S rRNA甲基化酶基因armA基因在中国哑胺培南耐药鲍曼不动杆菌中分布广泛;克隆播散是亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌主要的传播方式.

  • 产KPC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌生物学特点研究

    作者:李程;郭学青

    目的:研究产K PC型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的生物学特点。方法收集2013年某某医院10株耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌,使用 PC R和测序的方法对菌株进行产 K PC型碳青霉烯酶基因鉴定及筛选,该法用于筛选目的菌株的特异性,用药敏实验-微量肉汤稀释法对 PC R法筛选出的目的菌株进行 M IC测定。结果通过 PC R及测序,共分离出产 K PC 型碳青霉菌6株,其中肺炎克雷伯菌5株,大肠埃希菌1株。将采用PC R测序鉴定的7株产K PC 型碳青霉菌用微量肉汤稀释法测定12种抗菌药物的M IC值,其中左氧氟沙星、氧氟沙星对实验菌株的敏感程度为中介至耐药、阿米卡星对实验菌株敏感率为66.7%,而其余菌株耐药100%。10株耐碳青霉烯酶临床收集肠杆菌科细菌,经过改良 Hodge试验测定,共有8株M HT 试验为阳性。其中有2株菌PCR测序为阴性,M HT 试验为阳性。针对本实验,改良 Hodge试验测定产 KPC 型碳青霉菌株的灵敏度为100%,阳性预测值为75%,阴性预测值100%。结论用M HT 筛查产碳青霉烯酶菌株可能出现假阳性结果,需用检测基因的方法作进一步确认。虽然该方法还不足以替代 PCR检测技术,但可以用于临床待确证标本的初筛。

  • 肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的表型调查

    作者:童晓霞;曹海燕

    目的 从表型水平了解我院肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶的流行状况,为医院感染防控和规范碳青霉烯类抗生索的使用提供实验室依据.方法 收集我院2009年9月至2011年3月临床分离的多重耐药肺炎克雷伯菌44株,用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型确证,并对其药敏结果 、流行病学特点进行分析.结果 44株多重耐药肺炎克雷伯菌对22种常用抗菌药物除哑胺培南外,耐药率均在40%以上,亚胺培南的耐药率为11.4%,其中有4株改良Hodge试验阳性,提示产碳青酶烯酶.2株来自烧伤科的创面分泌物,2株来自lCU的呼吸道标本.结论 我院出现了产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌,在重点科室存在局部流行的潜在威胁.需进一步从分子生物学水平确定耐药基因的类型和同源性,目前应加强院感防控.

  • 改良Hodge试验对鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶检测效果的比较

    作者:雷红;董梅;赵利;孙敏霞;孟祥红;杨彩娥;朱蕾;杨昌梅

    目的 比较改良Hodge试验采用三种不同纸片法对耐亚胺培南鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶的检测能力.方法 改良Hodge试验采用三种不同纸片检测碳青霉烯酶;采用MicroScan WalkAway 96检测鲍曼不动杆菌的耐药性.结果 改良Hodge试验(三种不同纸片法)同时检测33株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌,其中应用改良Hodge试验(亚胺培南纸片法),阳性为22株,阳性率为66.7%;改良Hodge试验(厄他培南法),阳性为17株,阳性率为51.5%;改良Hodge试验(美罗培南法),阳性为8株,阳性率为24.2%.结论 改良Hodge试验(三种不同纸片法)筛选耐亚胺培南鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶中,改良Hodge试验(亚胺培南纸片法)敏感性高,而改良Hodge试验(美罗培南纸片法)敏感性低.

  • 耐药性细菌碳青霉烯酶检测方法研究进展

    作者:徐建民;陈水平;陈建魁

    耐碳青霉烯类抗生素细菌严重威胁着患者的身体健康和耐药菌感染的治疗和控制.为了有效地预防和治疗由产碳青霉烯酶菌株造成的感染,采取及时有效的检测方法显得尤为重要.国内外学者报道了多种试验方法用来检测产碳青霉烯酶菌株,主要包括表型检测方法和生物化学检测方法;近年来研制的MALDI-TOF MS技术应用于临床微生物鉴定逐渐显示出其优越性,用于产碳青霉烯酶菌株耐药的检测也有较好的临床应用前景.随着基因测序成本的不断下降,多重实时PCR、第二代测序等方法也逐渐应用于临床实验室.本文就碳青霉烯酶的检测方法研究进展加以综述,以期为医学微生物检验工作者选择检测方法提供参考.

  • 医院泛耐药鲍曼不动杆菌对碳青霉烯抗生素的耐药机制

    作者:于亮;王梅

    目的 探讨医院泛耐药鲍曼不动杆菌对碳青霉烯抗生素的耐药机制.方法 应用PCR方法对2010年12月至2012年3月期间本院从临床痰标本中分离的36株泛耐药鲍曼不动杆菌进行碳青霉烯酶IMP、OXA23基因和整合子基因检测;提取细菌膜蛋白行SDS-PAGE电泳分析其组成.结果 36株泛耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶OXA23基因扩增均为阳性;14株碳青霉烯酶IMP基因扩增阳性,22株阴性.12株整合子PCR产物约1200 bp,10株约3000 bp,14株整合子PCR产物约3500 bp.与碳青霉烯抗生素敏感鲍曼不动杆菌膜蛋白比较,22株泛耐药鲍曼不动杆菌存在相对分子质量为25 000、36 000的膜蛋白缺失.结论 医院泛耐药鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯抗生素机制与产IMP、OXA23碳青霉烯酶及膜蛋白缺失有关.

  • blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR扩增用于鲍曼不动杆菌检测的可行性评价

    作者:胡源;何利华;张建中

    目的 分析blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR扩增用于鲍曼不动杆菌检测和鉴定的可行性. 方法 PCR扩增105株不动杆菌的blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因,并对检测的特异性进行评估. 结果 PCR检测82株鲍曼不动杆菌blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因均阳性,但其中1株PCR产物比预期大(1 664 bp);测序发现blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因中包含一段1 308 bp的插入序列.不动杆菌属其他菌株blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR检测均阴性.若以353 bp扩增带作为blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR阳性标准,检测的敏感度和特异度分别为98.9%和100%;若以出现PCR扩增条带为阳性标准,则检测的敏感度和特异度均为100%. 结论 blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR扩增用于检测鲍曼不动杆菌特异性较高,但如果仅从扩增片段长度判断,存在出现假阴性的可能.

  • KPC-2基因和外膜蛋白介导的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物耐药机制分析

    作者:赵晓杰;康海全;姜飞;施德仕;马萍

    目的 研究临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制. 方法 收集徐州医学院附属医院2013年2-12月临床分离的非重复碳青霉烯类抗菌药物耐药肺炎克雷伯菌株47株并进行鉴定.药敏试验采用琼脂稀释法,采用改良Hodge方法检测碳青霉烯酶,采用EDTA-Na2双纸片协同法检测金属β-内酰胺酶,采用PCR方法检测KPC-2基因,通过肠杆菌基因间重复性一致性序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行KPC基因分型.采用质粒接合试验确定耐药基因的转移性,采用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析耐药菌株外膜孔道蛋白的改变情况.结果 47株肺炎克雷伯菌对除多粘菌素和替加环素外的其他抗生素均显示较高的耐药性.改良Hodge试验阳性43株,金属酶检测试验结果均为阴性.ERIC-PCR将44株KPC-2基因阳性肺炎克雷伯菌分为4型.3株分离菌株接合试验获得成功,3株肺炎克雷伯菌外膜孔道蛋白Ompk36的缺失. 结论 本院分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对临床常用抗生素显示较高水平的耐药性,其耐药机制主要是产碳青霉稀酶KPC-2.部分分离菌株存在耐药质粒的水平传播.另外,外膜孔道蛋白的缺失也是导致细菌对碳青霉烯类抗菌药物敏感度降低的重要原因.

  • 我国鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类药物机制的Meta分析

    作者:明德松;许钰颖;邓勇

    目的 了解我国鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的相关耐药机制. 方法 采用Meta分析方法,分析我国15个省(市)2 354株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药物机制,主要是产生碳青霉烯酶、外膜蛋白缺失和Ade ABC外排系统3种. 结果 在淮河以北地区鲍曼不动杆菌耐药基因OXA-51、Int1、OXA-23、OXA-58、IMP及VIM检出率分别为99.4%、97.2%、77.0%、1.6%、1.1 %和0.8%,淮河以南地区分别为91.7%、62.8%、78.8%、2.4%、3.5%和1.0%;SIM和OXA-24基因在我国尚无检出报道.外膜蛋白缺失率达91.7%,Ade ABC外排系统检出率为55.4%. 结论 我国鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类药物机制以外膜蛋白缺失和存在OXA-51、OXA-23基因及Ade ABC外排系统为主,金属酶基因IMP及VIM检出率均很低,SIM和OXA-24基因尚未检出.

  • 耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型及耐药性研究

    作者:谭兴华

    目的 分析临床分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)的耐药性及碳青霉烯酶基因型,以指导临床合理应用抗生素. 方法 用琼脂稀释法检测常用抗生素对鲍曼不动杆菌的低抑菌浓度(MIC);采用聚合酶链反应(PCR)检测鲍曼不动杆菌的OXA-23、OXA 24、OXA-58、IMP和VIM碳青霉烯酶基因. 结果 鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药率为23.23%(46/198),IRAB与敏感组鲍曼不动杆菌比较对12种抗菌药物耐药率,差异有统计学意义(P均<0.05).在46株IRAB中,39株扩增出OXA-23基因,检出率84.78%,未检出其他基因型. 结论 该院IRAB耐药现象严重,产OXA-23型碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的主要原因.

  • 医院ICU分离株肺炎克雷伯菌基因进化分析和耐药性研究

    作者:徐陶;胡丽蓉;薛钰婷

    目的 研究医院ICU分离株肺炎克雷伯菌耐药和基因关键位点突变情况,为肺炎克雷伯菌感染治疗提供依据. 方法 对分离株肺炎克雷伯菌采用琼脂扩散法做15种常见抗生素的药敏试验,方法及标准参照2013版美国临床实验室标准化委员会药敏试验标准(CLSI);按照CLSI对超广谱β酰胺酶进行检测和验证,采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;PCR扩增Ⅰ类整合酶基因;对QRDR(喹诺酮耐药决定区)耐药株基因gyrA和parC进行检测并与疫苗株比对. 结果 药敏试验显示,ICU分离株肺炎克雷伯菌对亚胺培南,美罗培南,阿米卡星的耐药率分别为1.4%、2.7%和4.0%.对复方新诺明和庆大霉素耐药率分别为68.0%和62.7%,对其他抗生素耐药率在10%~60%之间.采用琼脂扩散法检出23株产ESBLs,占30.7%;采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶6株阳性,占8.0%;PCR检测Ⅰ类整合子21株阳性,占28.0%.耐药株QRDR基因检测和序列分析显示,gyrA基因编码产物第83位由丝氨酸(Ser)变异为苯丙氨酸(Phe)S83F,第87位天冬氨酸(Asp)变异为谷氨酸(Asn)D87N,parC基因编码产物第80位由丝氨酸(Ser)变异为异亮氨酸(Ile)S80I. 结论 本组分离菌中带有Ⅰ类整合子和产碳青霉烯酶检出率较低,分离株肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南和阿米卡星耐药率低于10%,上述药物可作为一线药物用于肺炎克雷伯菌的感染治疗.对QRDR基因检测发现gyrA和parC基因突变引起细菌对环丙沙星和左氧氟沙星耐药,因此氟喹诺酮类药物应慎用.

  • 杭州地区产 KPC 酶大肠埃希菌耐药性及流行性分析

    作者:王育瑛;齐艳;杨雪静;王燕飞;蒋琰;楼正青;俞云松

    目的:了解产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)大肠埃希菌的流行情况,加强医院感染控制及防止多重耐药菌大范围播散。方法收集2012年7月至2014年1月杭州市中医院、浙江大学医学院附属第一医院、浙江省中医院和浙江省人民医院共25株碳青霉烯类抗生素耐药大肠埃希菌。利用 K-B 纸片法测试所有菌株对22种常用抗菌药物的敏感性;PCR 扩增确认 blaKPC 基因,改良Hodge 试验确认菌株是否产碳青霉烯酶;脉冲场凝胶电泳(PFGE)及多位点序列分型(MLST)技术进行菌株同源性分析。结果25株大肠埃希菌均产 KPC 酶,编码 blaKPC-2基因。这些产 KPC 酶菌株对抗菌药物的耐药率较高,尤其对几乎所有β-内酰胺类药物耐药。PFGE 分型将25株菌株分为3个主要同源克隆群,克隆群 A(4株)、克隆群 B(5株)和克隆群 C(2株),其余14株为散发克隆。MLST 分型则分为8个 ST 型,其中以 ST131型为主,共有14株(占56%),另外还包括 ST167型3株,ST2003型3株,其余 ST 型各有1株,这些 ST 型之间同源性相距较远。PFGE 分型和 MLST 分型结果基本一致。结论目前我国杭州地区产 KPC 酶大肠埃希菌以 ST131型为主,呈多重耐药性,并且在多家医院检出。耐药菌株的流行具有一定的病区集中性,如重症监护室、急诊科,其余多为散发菌株。

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