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β-内酰胺酶测定及耐药性监测
目的研究我院肠杆菌科细菌产β-内酰胺酶及其耐药性分析.方法收集本院2000年8月-2002年7月分离的202株肠杆菌科细菌,用microscan autoscan-4型全自动细菌鉴定分析仪作细菌鉴定和药敏试验,同时用复合纸片法鉴定超广谱B-内酰胺酶(ESBLs),用头孢西丁三维试验法检测AmpC β-内酰胺酶(AmpC-BLA).结果202株肠杆菌科细菌中,高产ESBLs的细菌74株占36.6%,产AmpC-BLA的细菌39株占19.3%;产β-内酰胺酶对18种常用抗菌药物耐药率明显高于非产酶菌株.结论这两种β-内酰胺酶的耐药性非常严重且各具特点,各临床实验室应重视β-内酰胺酶的检测,这对指导临床合理使用抗生素具有十分重要的意义.
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不动杆菌高活性β-内酰胺酶的检测及耐药分析
1.材料与方法:(1)菌株来源:所试菌株均来自白求恩国际和平医院住院患者留取的各种标本(排除同一患者同一部位重复分离的菌株),其中痰标本115份、脓性分泌物11份、尿液7份、关节液1份;患者年龄在10～100岁之间,平均72岁;男性90例、女性44例;134株不动杆菌中鲍曼不动杆菌100株,占74.6%;洛菲不动杆菌29株,占21.7%;乙酸钙不动杆菌3株,占2.2%;溶血不动杆菌2株,占1.5%;大肠埃希菌ATCC 25922作为三维试验指示菌,试验用质控菌株有肺炎克雷伯菌ATCC 700603为ESBLs阳性对照,阴沟肠杆菌029M为AmpC酶阳性对照(均由北京医院馈赠).
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肠杆菌科细菌两种β-内酰胺酶测定及耐药性监测
目的 对我院及本地区肠杆菌科细菌产β-内酰胺酶及其耐药性的情况进行研究分析. 方法 将我院分离出的202株肠杆菌科细菌,采用MicroScan autoSCAN-4型全自动细菌鉴定分析仪作细菌鉴定和药敏试验,同时用复合纸片法鉴定超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),用头孢西丁三维试验法检测AmpC β-内酰胺酶(AmpC-BLA). 结果 202株肠杆菌科细菌中,高产ESBLs的细菌74株占36.6%,高产AmpC-BLA的细菌39株占19.3%;产β-内酰胺酶菌对18种常用抗菌药物耐药率明显高于非产酶菌株. 结论 2种β-内酰胺酶菌的耐药性非常严重且各具特点,各临床实验室应重视β-内酰胺酶的检测,这对指导临床合理使用抗生素具有十分重要的意义.
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两种检测阴沟肠杆菌AmpC酶方法的比较
目的建立一种新的简便易行的AmpC酶的表型筛选方法并对其进行评价.方法采用表型筛选和三维试验,对144株阴沟肠杆菌进行AmpC酶检测,对检测结果进行比较,并检测部分菌株的等电点和ampD基因.结果 144株阴沟肠杆菌表型筛选结果显示高产AmpC酶的菌株共有35株,占24.31%(35/144).表型筛选与三维试验相比总符合率为89.58%(129/144).2种方法检测结果相反的有5株菌,其中4株菌的等电点条带均不能被氯唑西林抑制,另1株菌株等电点检测有5条带(其中2条被氯唑西林抑制).3株ampD基因阳性菌株测序结果显示均存在71,72,75位氨基酸发生改变,其中有2株还存在101位氨基酸改变.结论表型筛选法检测AmpC酶结果可靠、方法简便,易于在临床实验室中推广应用.
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评价三种检测AmpC酶的方法及临床应用
AmpC酶是一类既可由染色体介导,又可由质粒介导的头孢菌素酶,它与质粒介导的超广谱β内酰胺酶(ESBLs)是导致革兰阴性杆菌耐药的重要的两类酶.ESBLs的检测方法有多种[1],并日趋成熟,而检测AmpC酶缺乏足够的流行病学资料,尚无统一标准的方法.本研究采用酶提取物三维试验、头孢西丁三相试验及氯唑西林双纸片协同法同时检测阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌的AmpC酶,并加以比较,以找出一种适合临床常规应用的检测AmpC酶的方法.同时了解本院临床分离的菌株AmpC酶的流行情况.
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纸片扩散法检测阴沟肠杆菌超广谱β内酰胺酶的评价
目前文献多采用双纸片扩散试验检测阴沟肠杆菌ESBLs[1] ,但美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)对该方法仅推荐用于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌(ESBLs)的检测,我们对临床分离的101株阴沟肠杆菌,同时用双纸片扩散试验和头孢曲松三维试验测ESBLs,以评价双纸片扩散试验用于检测阴沟肠杆菌ESBLs的可靠性.
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三维法测定耐头孢美唑菌β-内酰胺酶的研究
目的检测耐头孢美唑的肠杆菌科细菌持续高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及对其他抗生素的耐药状况.方法采用三维法测定AmpC和ESBLs及纸片扩散法测定16种抗菌药物的抑菌环直径.结果50株耐头孢美唑的肠杆菌科菌有24.0%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,有28.0%的菌株单产AmpC酶,有6.0%的菌株单产ESBLs,有46.0%的菌株AmpC酶和ESBLs酶均阴性;AmpC和ESBLs总的阳性率分别为48.0%和26.0%;AmpC和ESBLs总的阳性率分别为44.0%和26.0%;肠杆菌属的产AmpC酶率高,不动杆菌属、铜绿假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、气单胞菌属均能产生AmpC酶,而大肠埃希菌产AmpC酶的几率较小.结论耐头孢美唑的肠杆菌科细菌产AmpC酶几率较高,应加强监测.
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112株阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶、AmpC酶及产ESBLs的检测与耐药性分析
目的 探讨济宁医学院附属医院阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶、AmpC酶、产ESBLs的情况及对17种常用抗菌药物的耐药性,以指导临床合理选择抗菌药物.方法 收集医院2009年5月-2010年5月临床分离的非重复阴沟肠杆菌112株,采用改良的Hodge试验对碳青霉烯酶进行检测,采用头孢西丁三维试验对AmpC酶进行检测,采用表型确证试验对产ESBLs进行检测,K-B纸片扩散法进行药敏试验.结果 112株阴沟肠杆菌主要来自痰液,占60.7％,其次为分泌物及尿液,分别占16.1％、13.4％;从112株阴沟肠杆菌中检出碳青霉烯酶阳性2株,阳性率1.8％,AmpC酶阳性60株,阳性率53.6％,产ESBLs菌46株,阳性率41.1％,其中有28株仅携带ESBLs,42株仅携带AmpC酶,18株同时携带产ESBLs和AmpC酶.结论 应加强对产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌的控制和检测;阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶携带率高;临床治疗应在药敏试验的基础上,针对不同的产酶株合理选择抗菌药物.
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医院感染病原菌AmpC与超广谱β-内酰胺酶检测
目的 了解医院感染病原菌中革兰阴性杆菌产AmpC与超广谱p内酰胺酶(ESBLs)的情况.方法 用改良的头孢西丁三维试验和头孢曲松三维试验检测持续高产AmpC β-内酰胺酶和ESBLs.结果 医院感染病原菌中革兰阴性杆菌持续高产AmpC β-内酰胺酶,产酶率为16.00%,其中单独产AmpC β-内酰胺酶的产酶率为8.84%,以阴沟肠杆菌、褪色沙雷菌和产气肠杆菌产酶率高(36.00%、31.25%和28.00%);同时产ESBLs的检出率为7.16%,以鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌阳性率高(15.18%、10.60%和8.74%).结论 医院感染菌株产酶率较高,应引起临床高度重视.
关键词： AmpC β-内酰胺酶 超广谱β-内酰胺酶 医院感染 三维试验 -
阴沟肠杆菌产AmpC酶与ESBLs的研究
目的 检测临床标本分离的阴沟肠杆菌,了解产AmpC酶和ESBLS的情况,分析耐药性以指导临床用药.方法 收集2007年1-12月同济医院检验科分离到的阴沟肠杆菌121株,用改良的三维试验检测AmpC酶和ESBLs.结果 121株阴沟肠杆菌中,产ESBLs的菌株有56株,占45.3%;产AmpC酶的菌株有35株,占28.9%,产AmpC酶和ESBLs的有18株,占14.9%,非产AmpC酶和ESBLs的有9株.占7.4%;体外的抗菌药物敏感试验显示,头孢噻肟、头孢吡肟、环丙沙星、亚胺培南的耐药率分别为53.8%、24.4%、32.5%、0;氨苄西林和头孢唑林的耐药率高达96.7%和94.2%.结论 2007年检测到的阴沟肠杆菌主要产ESBLs,对碳青酶烯类药物敏感率高,对氨基糖苷类和喹诺酮类及第四代头孢类药物敏感率也较高,对其他类药物敏感率较低.
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阴沟肠杆菌不同β-内酰胺酶基因型检测与耐药性研究
目的 了解医院感染阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶的情况,并对产不同β-内酰胺酶型菌株的耐药性进行研究.方法 采用三维试验确证试验检测AmpC酶与超广谱β-内酰胺酶(ESBLs).聚合酶链反应(PCR)扩增基因,K-B法检测阴沟肠杆菌对13种抗菌药物的耐药情况.结果 80株阴沟肠杆菌中29株ESBLs编码基因结果阳性,3株含有两种不同的基因型,分别为TEM型6株、SHV-2型2株、CTX-M-2型5株、CTX-M-3型8株和CTX-M-9型11株;26株ampC基因PCR扩增呈阳性;产超超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)阴沟肠杆菌对美罗培南外的12种抗菌药物的耐药率在66.7%～100.0%,无论是单一产酶株,还是SSBLs菌株,其耐药率均显著高于不产酶株.差异有统计学意义(P＜0.05);美罗堵南仍是阴沟肠杆菌耐药率低的抗菌药物.结论 阴沟肠杆菌已呈现出多药耐药和高度耐药特征,ESBLs基因型以CTX-M型为主,三维试验与PCR检测具有良好的一致性,产AmpC酶和ESBLs酶是阴沟肠杆菌耐药的主要原因.
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三种AmpC酶表型检测方法临床比较分析
目的 分析比较氯唑西林(CLO)、三维试验、改良Hodge试验三种AmpC酶表型的检测方法,总结其临床应用价值.方法 选取我院2008年12月～2010年12月筛选的198株革兰阴性杆菌,以AmpC基因聚合酶链反应(PCR)检测结果作为金标准,设为对照组,分别采取氯唑西林(CLO)、三维试验、改良Hodge试验,分别设为观察组A、B、C,观察对比其检测结果.结果 三组检出阳性率比较存在明显差异(P＜0.05),具有统计学意义.以观察组C参照对照组的符合率高,明显高于其它两组(P＜0.05),具有统计学意义.结论 CLO对于AmpC酶表型的检测的敏感度与符合率均较低,采取改良Hodge试验的敏感度与特异性均良好,符合率高,属于AmpC酶表型的检测中较为简便、快速、有效的手段,具有重要的临床实用意义.
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革兰阴性杆菌中AmpCβ-内酰胺酶的检测及其耐药性分析
目的 了解革兰阴性杆菌临床分离株AmpCβ-内酰胺酶的发生率及产酶株的耐药性.方法 采用三维试验检测AmpCβ-内酰胺酶;用K-B纸片法进行抗菌药物敏感试验.结果 236株革兰阴性杆菌中,三维试验阳性菌株29株;17株(7.2%)单产AmpC酶,8株(3.4%)单产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),2株(0.8%)同时产AmpC酶和ESBLs,2株(0.8%)为非产AmpC酶和ESBLs菌株;共检出产AmpC酶菌株19株,检出率为8.1%;药物敏感试验结果 显示,除亚胺培南和头孢吡肟外,产酶株的耐药率明显高于非产酶株.结论 本院革兰阴性杆菌AmpC酶的检出率为8.1%;产酶菌呈多重耐药特性,治疗产酶菌感染首选第四代头孢菌素及碳青霉烯类药物.
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三种检测阴沟肠杆菌AmpC酶方法的比较
目的:以三维实验结果为标准,比较表型筛选法和双抑制剂扩散协同法试验检测产AmpC酶阴沟肠杆菌的可靠性.方法:收集2011年2月-2012年12月我院临床分离的阴沟肠杆菌39例,分别用三维实验、表型筛选法、双抑制剂扩散协同法试验检测产AmpC酶阴沟肠杆菌.结果:39株阴沟肠杆菌经三维试验检测出高产AmpC酶的阴沟肠杆菌10株,检出率为25.6％.表型筛选法特异性为69.0％,灵敏度为90.0％,检出效率为76.9％.双纸片协同试验特异性为93.1％,灵敏度为80.0％,检出效率为89.7％.结论:双抑制剂扩散协同法具有较高的灵敏度和特异性,且与三维试验阳性检出率相当,是一种可靠的方法.
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三维实验对产AmpC酶革兰阴性菌的检测及分析
目的 探讨我院2004年9月至2006年8月产AmpC酶革兰阴性菌AmpC酶的分离情况及三维实验筛选AmpC酶的效果.方法 用VITEK2系统对临床分离茵株进行再鉴定细菌,用三维实验检测AmpC酶.结果 在所检测的572株革兰阴性菌中,三维试验阳性菌株共204株,总检出率为35.7%(204/572),其中单产AmpC酶菌株148株,检出率为25.9%(148/572),同时产AmpC酶和ESBLs菌株共有56株,检出率为9.8%(56/572).572株革兰阴性菌从药敏表型筛选结果分析,表现为高产AmpC酶的菌株共173株,其中148株三维试验阳性,符合率为85.5%.结论 AmpC酶在我院分离率较高.三维试验虽烦琐,但更准确,表型测定仍不失为良好的临床实验室常规AmpC酶的筛选方法.
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第3代头孢耐药的阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定
目的检测3代头孢耐药的阴沟肠杆菌,了解阴沟肠杆菌对3代头孢耐药的机制,以利于耐药性的控制与指导临床用药.方法收集2002年1月～2004年6月浙江省人民医院,来自各种标本对3代头孢耐药的阴沟肠杆菌165株,用三维试验检测ESBLs与AmpC酶.结果 165株阴沟肠杆菌中,产ESBLs 120株,占72.7%,产AmpC酶有40株,占24.2%,同时产2种酶的有1株,占0.6%,2种酶均不产的有4株,占2.5%.体外抗生素敏感试验显示,亚胺培南、头孢替坦、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率分别为1.2%、66.0%、92.1%和92.1%,氨苄西林、头孢唑啉的耐药率达到100%.结论该院对3代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs,药物敏感试验表明亚胺培南敏感率高(97.6%),头孢替坦次之(27.3%),而对其它抗菌药物敏感率较低.
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EDTA纸片法和三维试验检测阴沟肠杆菌AmpC酶的比较
目的 比较EDTA纸片法及头孢西丁三维试验检测阴沟肠杆菌AmpC酶的符合程度.方法 收集近几年阴沟肠杆菌株97株临床菌株,应用EDTA纸片法和三维试验分别检测97株阴沟肠杆菌的Ampc酶,并进行比较.结果 97株受检菌中,75株EDTA纸片法和三维试验均阴性,20株两种方法均阳性,2株菌EDTA纸片法阴性,而三维试验阳性.两种检测方法阳性符合率为90.9％,阴性符合率为100％,总符合率为97.9％.结论 EDTA纸片法检测阴沟肠杆菌与三维试验的符合率高,且操作简便,较适合于临床实验室应用.
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三种检测AmpC β-内酰胺酶方法的比较及其临床应用
目的:评价表型筛选法和双纸片协同试验检测产AmpC β-内酰胺酶肠杆菌的可靠性与临床应用.方法:采用表型筛选法、双纸片协同试验和三维试验同时对98株肠杆菌进行AmpC酶检测,将2种检测方法的结果分别与三维试验的结果加以比较,并调查了我院呼吸内科肠杆菌中AmpC酶的流行情况. 结果:三维试验结果显示98株肠杆菌中高产AmpC酶的菌株共有19株(阴沟肠杆菌16株、弗劳地枸橼酸杆菌2株、产气肠杆菌1株),检出率为19.39%.2种检测方法的敏感性分别为84.2%,94.7%,特异性分别为98.6%,97.3%,与三维试验的总符合率分别为90.8%,91.8%. 结论: 表型筛选法和双纸片协同试验可以替代三维试验在各级医院常规应用,双纸片协同试验具有操作简便、结果可靠等优点.
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铜绿假单胞菌产AmpC酶和ESBLs的检测和耐药性分析
目的 研究AmpC酶和ESBLs在临床分离铜绿假单胞菌中的分布及其对耐药性的影响.方法 纸片扩散法测定19种抗生素的耐药性,三维试验检测高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs).结果 92株铜绿假单胞菌中,单纯高产AmpC酶者,单纯产ESBLs者,高产AmpC酶并产ESBLs者分别为17.4%、8.7%、10.7%.产酶菌株仅对美洛培南亚胺培南敏感,对大多数抗生素耐药.非产酶菌株对头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢唑林高度耐药,对大多数抗生素敏感.结论 产ESBLs和高产AmpC酶的铜绿假单胞菌在临床分离菌株中阳性率较高,产酶菌株对大多数抗生素的耐药性明显高于非产酶菌株.
关键词： 铜绿假单胞菌 三维试验 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs) AmpC酶 -
EDTA纸片法检测肠杆菌科细菌高产AmpC酶
目的 寻找一种快速,简便,灵敏,准确的方法检测肠杆菌细菌高产AmpC酶的方法.方法 用从临床菌株中筛选出头孢西丁耐药的肠杆菌科细菌,应用EDTA纸片法和头孢西丁三维试验和多重PCR方法分别对头孢西丁耐药肠杆菌科细菌是否高产AmpC酶进行检测,并进行方法学比较.结果 40株头孢西丁耐药的细菌中,头孢西丁三维试验、EDTA纸片法阳性菌株分别为36、37株,EDTA法与三维试验的符合率为97.3%,阴性符合率100%,统计结果显示EDTA纸片法与三维试验法检测AmpC酶无差异.结论 EDTA纸片法用于这两种临床菌株中持续高产AmpC酶的检测,方法简便,结果可靠,无需特殊仪器支持,可在临床实验室推广使用.
