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脓毒症常见病原菌多重实时PCR检测方法的建立

郑皓;李文革;杨海英;吴媛;车洁;陈小萍;卢金星

摘要: 目的 建立可同时检测脓毒症患者血液中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌的多重实时PCR方法.方法 根据各病原菌基因组保守序列设计引物和探针,建立多重实时PCR检测方法.对建立的多重实时PCR检测方法进行特异性、敏感性和灵敏度分析,并使用该法对112份脓毒症血培养阳性标本进行验证.结果 成功建立脓毒症常见病原菌的多重实时PCR检测方法.此方法特异性、敏感性良好,灵敏度达10-5 ng/μl,与标准检测方法(血培养加生化鉴定)相比,缩短了20 h.112份临床血培养阳性标本中,目标病原菌83例,多重实时PCR检出80例阳性;非目标病原菌29例,多重实时PCR检测均为阴性.检测结果显示,该方法特异性达100%,敏感性达96.39%.结论 该多重实时PCR检测方法具有快速、高效、灵敏、特异的优点,可用于临床重症监护室患者血液常见感染病原菌的诊断.

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