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某医院ICU不动杆菌的分布、耐药性和分子生物学特征研究
目的 研究某医院重症监护病房(ICU)不动杆菌的分布、及其耐药和分子生物学特征,为科学防控提供依据.方法 通过病原学标本分离、鉴定和药敏试验方法,对某医院ICU住院病人体表及环境标本进行了检测与分析.结果 该医院ICU病房患者体表标本、医务人员手和环境标本中,检出多重耐药不动杆菌构成比依次为71.7％、74.4％和62.2％.64名患者浅表部位多重耐药不动杆菌定植率为54.7％.临床分离的不动杆菌对头孢菌素、左氧氟沙星和阿米卡星的耐药率可能超过70％,仅对米诺环素较敏感.住院患者与环境分离不动杆菌的抗菌谱高度相似.患者定植的非重复菌株中优势ST克隆株为ST138,属于克隆群92.结论 不动杆菌在ICU病房内分布广泛,呈现出多重耐药性,且易于克隆传播.
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呼吸重症监护病房不动杆菌监测与医院感染暴发的预防
目的 分析呼吸重症监护病房不动杆菌检出数及检出率,量化管理,实时干预,预防医院感染暴发的发生.方法 前瞻性监测及回顾性分析2010-2013年呼吸重症监护病房不动杆菌检出数及检出率,计算75百分位数,作为医院感染管理科介入调查、实施干预的指标,预防控制医院感染暴发.结果 呼吸重症监护病房2010-2013年不动杆菌检出数75百分位数是6人,不动杆菌检出率75百分位数为21％,以此为干预指标,指导临床在2014年的实际运用后,未发生医院感染暴发.结论 在医院感染专职人员缺乏、医院感染监控软件不完善或微生物室尚无条件做病原体同种同源性分析的情况下,对呼吸科、外科、急诊等重症医学科均可用监测不动杆菌或其他病原体检出数和检出率,计算75百分位数,作为预警介入干预的指标,间接进行医院感染控制状态的监测,实时进行干预.
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医院内不动杆菌流行现状及耐药性分析
不动杆菌(Acinetobacter species)广泛存在于医院环境及人体皮肤,是专性需氧菌,不需要特殊营养,易在潮湿的环境中生长,为条件致病菌.近年来,不动杆菌已成为医院内感染的主要病原菌之一.在大量广谱抗生素的使用压力下,临床分离的不动杆菌大多表现为多重耐药,治疗十分困难.作者对北京医院各病区5年中不动杆菌的分布状况进行了调查,并对临床分离的536株不动杆菌进行产酶和耐药性检测,结果报告如下.
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458例烧伤患者不动杆菌感染及耐药性分析
目的:探讨烧伤患者不动杆菌的感染率、耐药情况以及临床疗效进行分析,并找出相应的治疗方案.方法:对2008年1月至2012年1月,这四年间458例被火烧伤的患者按时间先后进行分组,A组患者为2008年1月至2010年1月就诊的患者,B组患者为2010年1月至2012年1月就诊的患者,对两组烧伤患者感染不动杆菌的阳性率以及临床上的耐药性进行比较分析,并对其相关的临床症状以及预防措施进行总结和分析.结果:B组的患者不动杆菌的阳性率以及对抗生素的耐药性均较A组患者显著(P＜0.05),两组患者的临床症状及治疗没有统计学差异,两组患者经治疗后病情均出现好转.结论:不动杆菌阳性率以及耐药性出现显著的上升趋势可能与临床上广泛使用抗生素有着密切的关系,创面外用药也可能引起不动杆菌产生耐药性,同时环境的改变也可能引起不动杆菌耐药性增强.
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不动杆菌CRISPR系统基因结构的分析及其与耐药性关系的研究
目的 研究不动杆菌CRISPR Cas系统的基因结构并探讨其与耐药性的关系. 方法 收集CRISPR db数据库所有不动杆菌菌株序列信息,利用CRISPRfinder软件分析CRISPR基因座;通过MEGA软件对cas基因序列进行对比及系统进化分析;收集自 GenBank中的菌株基因注释,查找相关耐药基因信息,分析其与CRISPR基因座之间的关系.结果 80株不动杆菌包含11个种,21.3％的菌株含有确定CRISPR基因座,26.5％的菌株只含可疑基因座.基因座位于染色体或质粒上.大部分不动杆菌的CRISPR系统属于I-F型,并且根据cas1、cas3、csy2、csy3、cas6/csy4基因序列及csy1基因的存在均可分为I-Fa和I-Fb两个亚型.不动杆菌CRISPR基因座中有14种不同的重复序列,长度为24～31 bp,平均重复次数为53,且不同亚型间的重复序列不同,而同一亚型内保守性较高.无CRISPR系统的菌株中A类和D类β-内酰胺酶、乙酰转移酶、核苷酸转移酶及16S rRNA甲基化酶等耐药基因的携带率均显著高于有CRISPR系统菌株. 结论 不动杆菌CRISPR系统属于I-Fa和I-Fb型,cas3、csy2、csy3、csy4、casl基因序列均可单独作为不动杆菌属CRISPR系统分亚型的依据;CRISPR基因座的存在可降低某些耐药基因的水平转移,而基因组中相对较低的CRISPR系统携带率可能是导致不动杆菌耐药率日趋增高及更易出现多重耐药的原因之一.
关键词： CRISPR-Cas系统 不动杆菌 耐药基因 基因结构 -
部分非鲍曼不动杆菌耐药性及相关基因分析
目的 了解目前非鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药现状及耐药基因携带情况. 方法随机抽取100株不动杆菌临床分离株,采用分子生物学方法筛选非鲍曼不动杆菌,用E-test方法检测非鲍曼不动杆菌对12种抗生素的耐药性,用PCR方法检测16种相关耐药基因的分布. 结果共筛选出17株非鲍曼不动杆菌,7株为多重耐药(41.2%),其中对头孢噻肟的耐药率为100%,对氯霉素、哌拉西林、氨苄西林和氨曲南的耐药率分别为76.5%、76.5%、64.7%和52.9%,对多粘菌素B普遍敏感;检出6种耐药基因分别为ampC、blaTEM、blaPER-1、blaOXA-23-like、blaOXA-58和Intl. 结论携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因和blaOXA-23-like基因为非鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类和碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因.非鲍曼不动杆菌的耐药形势严峻,应加强监测.
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阴沟肠杆菌B8提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用
阴沟肠杆菌B8分离自水稻叶片.临床分离菌株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)87株,MSSA(不耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)38株,MRSCON(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌)16株,MSSCON(不耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌)5株,大肠杆菌10株,铜绿假单胞菌25株,阴沟肠杆菌14株,不动杆菌26株,肺炎克雷伯菌8株,共229株.阴沟杆菌O29和O29M作标准菌株.
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基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪在醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群鉴定中的应用研究
目的 评价基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群的鉴定价值,了解浙江大学医学院附属第二医院醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群的菌种分布情况.方法 回顾性选取2012年1至7月我院临床分离的502株醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群非重复菌株,用MALDI-TOF MS进行再鉴定,同时用16S-23S rRNA基因间隔区序列分析来确定所有菌株的菌种,比较二者鉴定结果的差异.结果 502株醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群用MALDI-TOF MS再鉴定,包括鲍曼不动杆菌431株(85.9％),皮特不动杆菌68株(13.5％),醋酸钙不动杆菌3株(0.6％);对502株醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群16S-23S rRNA基因间隔区序列分析结果显示:403株为鲍曼不动杆菌(80.3％),68株为皮特不动杆菌(13.5％),28株为医院不动杆菌(5.6％),3株为醋酸钙不动杆菌(0.6％).与16S-23S rRNA基因间隔区序列分析相比较,MALDI-TOF MS错误地将所有28株医院不动杆菌鉴定为鲍曼不动杆菌,其余菌株的鉴定结果完全一致.结论 MALDI-TOF MS可将醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群菌株准确鉴定到种,具有操作简便、快速、成本低,重复性好的优点.MALDI-TOF MS有望在未来成为日常临床微生物鉴定的理想工具.
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多重耐药不动杆菌临床菌株中整合子的基因分析
多重耐药质粒的演变与抗菌药物耐药决定子特定位点的整合子有关.根据整合酶的不同有4类整合子,临床分离株中常见1类整合子.本研究是检测多重耐药不动杆菌分离株中1类、2类整合子的情况,以调查不动杆菌的分子流行病学.
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引进CLSI微生物检验标准促进实验室标准化进程
当前,抗菌药物耐药愈演愈烈,已成为全球面临的难题.多重耐药、泛耐药、甚至极度耐药株的出现和传播,给临床治疗和控制带来极大的困难.苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)、万古霉素耐药的屎肠球菌(VRE)、产ESBL的肠杆菌科细菌、碳青霉烯类耐药的不动杆菌(CRAB)和铜绿假单胞菌(CRPA)均已成为国际普遍关注的热点问题[1].
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机械通气患者下呼吸道病原菌分布及其耐药特点
收集我院1996年1月～1999年10月入住呼吸监护室（RICU）行机械通气治疗的患者共58例次，其中采用无菌吸痰管，经人工气道吸取分泌物培养阳性者（病原菌浓度≥105 cfu /ml）46例次（阳性率79％）。男性34例次，女性12例次，平均年龄69.6岁。主要基础疾病为慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并呼吸衰竭，为31例次（67%），其他疾病15例次。机械通气持续时间3 d～8个月不等，<20 d者36例次(78%)，≥20 d 10例次(22%)。伴有发热者24例次（52%），气管内出现脓性分泌物33例次(72%)， WBC>10×109/L或<4×109/L伴或不伴核左移者20例次(44%)。胸部X线检查提示感染者37例次（80%）。46例次患者共分离出菌株77株，其中单一革兰阴性杆菌17例次（37%），两种或以上革兰阴性杆菌菌株9例次（20%），革兰阴性杆菌伴真菌10例次(22%)，单纯真菌7例次(15%)，革兰阴性杆菌伴革兰阳性杆菌2例次，革兰阳性杆菌1例。铜绿假单胞菌为主要的病原菌，共22株（29%），其次不动杆菌17株(22%)，病原菌分布详见表1。77株病原菌各年度优势菌分布显示，铜绿假单胞菌在各年度均居首位，1996和1997年度、1998年、1999年分离率分别为18％、36％、29％；不动杆菌1998年分离率由1996和1997年度的14％上升至32％，居第二位；1999年嗜麦芽窄食单胞菌分离率明显上升，达21％，取代不动杆菌成为第二位的病原菌。77株病原菌中革兰阴性杆菌56株，对 12种抗菌药总耐药率、各年度耐药率（1996和1997年度、1998年、1999年）为：亚胺培南-西司他丁32%(44%、17%、35%),头孢他啶37％(27%、24%、55%)，阿米卡星46%（45%、6%、79%）、环丙沙星58%（90％、41%、56%）、庆大霉素58％（0、25%、100%）、头孢哌酮56%(36%、46%、79%)、氧哌嗪青霉素65％(38%、50%、88%)、头孢噻肟69％(88%、40%、82%)、头孢曲松79％(88%、38%、94%)、阿莫西林/克拉维酸钾88％（100％、57%、100%）、头孢呋辛94％（100％、79%、100%）、氨苄西林97％(100%、93%、100%)。可见细菌耐药率较高，且呈逐年上升趋势。对三种主要革兰阴性杆菌耐药性分析显示，对铜绿假单胞菌耐药率较低的抗菌药为阿米卡星（20％）、头孢他啶（26%）、亚胺培南-西司他丁（31%）、环丙沙星（38%）；不动杆菌耐药谱广，耐药率高，除亚胺培南-西司他丁耐药率为10%外，其他抗菌药均高于50％，嗜麦芽窄食单胞菌对亚胺培南-西司他丁、庆大霉素、阿米卡星耐药率均为100％，环丙沙星为40%，复方磺胺甲唑对该菌敏感，敏感率100%。46例次患者11例死亡，病死率24％。11例中8例气管分泌物真菌培养阳性（73%）。死亡原因多为多器官功能衰竭和感染性休克。
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老年肺部感染常见致病菌耐药现状及防治对策
老年肺部感染的常见致病菌,其中革兰阳性球菌有:肺炎链球菌、葡萄球菌;革兰阴性杆菌有:大肠埃希菌、克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、不动杆菌等.近年对各种抗生素的耐药率均有显著增加,导致了肺部感染的严重危害和抗感染治疗的成功率下降.面对这种严峻形势,我们必须积极寻找防治对策[1,2].
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外科感染防治——合理应用抗感染药物
一、外科感染常见病原菌 据解放军三零四医院新资料，外科感染常见的菌种依次是绿脓杆菌（19.9%）、大肠杆菌（19.4%）、金黄色葡萄球菌（19.1%）、沙雷菌属（9.5%）、凝固酶阴性葡萄球菌（6.6%）、肠球菌（6.5%）、肠杆菌属（6.0%）、克雷伯菌属（5.6%）、变形杆菌（5.0%）和不动杆菌（2.4%）；据湖北地区15所医院1999年报道(中华普通外科杂志，2001，16：231-233)，顺序为金黄色葡萄球菌(18.4%)、绿脓杆菌(16.6%)、大肠杆菌(11.4%)、肠杆菌属（8.4%）、凝固酶阴性葡萄球菌（8.3%）、克雷伯菌属（7.3%）、不动杆菌（4.6%）和肠球菌（3.7%）。头、颈、四肢创伤及手术后感染以葡萄球菌为主；烧伤创面感染是葡萄球菌和绿脓杆菌；胸、腹、盆腔感染几乎都是革兰阴性（G－）肠道杆菌和非发酵菌（绿脓杆菌、不动杆菌），也有厌氧菌（脆弱类杆菌）和肠球菌；外科患者肺部感染，75%是G－杆菌，25%是革兰阳性（G＋）球菌；尿路感染主要是大肠杆菌和葡萄球菌；静脉导管感染（菌血症）是葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌，有时也有真菌。 二、细菌耐药现状 在我国大医院内，细菌对抗生素耐药问题已很突出。据近年多项调查，对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的耐药率为：对青霉素和氨苄西林84%～94%，对哌拉西林45%～74%，对氨苄西林/舒巴坦和头孢唑啉0.3%～2%，对亚胺培南0～0.7%，对庆大霉素10%～23%（北京）和1%～6%（湖北），对万古霉素0。甲氧西林耐药葡萄球菌（MSRA和MRCNS）半数以上对绝大多数抗生素耐药，对亚胺培南耐药者也有10%～56%，只有对万古霉素仍全部敏感。肠球菌24%～29%对青霉素类耐药，对头孢菌素类75%以上耐药，对庆大霉素63%～92%耐药，对万古霉素耐药者也有2%～9.5%，而且这些耐万古菌株（主要是屎肠球菌）基本上对所有抗菌药耐药。在G－杆菌中，大肠杆菌和克雷伯菌属对氨苄西林的耐药率为80%～95%，对哌拉西林为28%～53%，对头孢他啶为2%～12%，对其他第三代头孢为11.5%～27%，对亚胺培南为0～2%，对庆大霉素为29%～42%，对阿米卡星为2.9%～17%，对环丙沙星分别为44%～60%和8.2%～22%。肠杆菌属、枸橼酸杆菌、沙雷菌和不动杆菌的耐药率还要高得多，据湖北地区1999年调查，它们对氨苄西林和第2代头孢的耐药率高达80%～100%，只有对亚胺培南仍保持在10%以下。绿脓杆菌对哌拉西林的耐药率为20%～36%，对头孢哌酮为16%～19.5%，对头孢他啶为2%～15%，对亚胺培南为4%～14%，对庆大霉素为35%～56%，对阿米卡星为10%～26.7%，对环丙沙星为5%～31%。连续监测发现，细菌耐药性仍在增长，只是各地增长速度不同，湖北地区11 家医院1999年和1996年相比，大肠杆菌、肠杆菌属、不动杆菌和绿脓杆菌对常用多数抗菌药的耐药率又有了两位数字的增长。 细菌耐药性的增长和滥用抗生素关系极大。据统计一般国家的约30%住院患者使用抗生素，美国为20%，而我国高达67%～80%，滥用严重。合理使用抗生素的重要性，怎样强调也不过分。不滥用抗菌药的关键是严格掌握适应证，不该用时坚决不用，杜绝保险药、保驾药、安慰药和挣钱药。
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腹腔感染细菌流行病学调查
目的 监测2006年10月至2007年10月我国不同地区14家教学医院分离的腹腔感染病原菌的菌种分布及其体外药物敏感性.方法 按设计方案收集来自腹腔感染的病原菌.菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定10类共29种抗菌药物的低抑菌浓度(MIC),数据输入WHONET5.4软件进行耐药性分析. 结果 此次监测收集的腹腔感染病例数为742例,分离出的病原菌为743株,其中革兰阴性菌占76.7%(570/743),革兰阳性菌占23.3%(173/743).病原菌中分离率位于前5位的分别为大肠埃希菌(38.8%)、肺炎克雷伯菌(10.2%)、铜绿假单胞菌(9.2%)、屎肠球菌(8.2%)和金黄色葡萄球菌(4.4%).对于所有肠杆菌科菌,敏感率高于90%的抗菌药物包括美罗培南、亚胺培南、替加环素、阿米卡星和他唑西林-三唑巴坦.对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和克雷伯菌,敏感性大于90%的药物包括亚胺培南(100%)、美罗培南(100%)、替加环素(100%)和他唑西林-三唑巴坦(91.5%~91.7%).铜绿假单胞菌中多重耐药菌株的检出率为14.7%,鲍曼不动杆菌为61.3%.金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林(MRSA)的发生率为69.7%,所有菌株对替加环素、万古霉素和替考拉宁均敏感.替加环素对所有粪肠球菌和屎肠球菌均保持了100%的敏感率.粪肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素(100%)、替考拉宁(100%)和氨苄西林(81.5%).屎肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素和替考拉宁(96.7%).结论 引起腹腔感染的病原菌以革兰阴性菌特别是肠杆菌科菌为主.替加环素、碳青酶烯类、他唑西林-三唑巴坦和阿米卡星对腹腔感染肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,非发酵的革兰阴性杆菌的耐药性令人担忧.替加环素、万古霉素和替考拉宁对院内革兰阳性球菌保持了较高的抗菌活性.
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老年气管插管和切开患者痰不动杆菌属药敏分析
目的分析老年气管插管和切开患者痰不动杆菌属药敏结果,更好地指导临床合理应用抗生素.方法对30例老年气 管插管患者痰培养的32株不动杆菌及55例气管切开患者痰培养的86株不动杆菌药敏进行分析 .结果不动杆菌属对环丙沙星、亚胺培南敏感率为100% ;对阿米卡星敏感率为91.48%;庆大霉素敏感率为91.38%;甲氧苄啶敏感率79.76% 、头孢他啶71.05%、哌拉西林72.52%;不动杆菌属对氨苄西林、头孢唑林钠、头孢噻肟钠、 头孢曲松钠、头孢呋辛钠、头孢哌酮钠、氨曲南耐药率均在80%～100%.结论不动杆菌属对环丙沙星、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素敏感;对头孢他啶、 哌拉西林、甲氧苄啶敏感率>70%;不动杆菌属对大多数青霉素类及头孢菌素类抗生素耐药较高.
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不动杆菌感染的临床分布特征
目的对不动杆菌感染的临床分布特征进行研究.方法对7年间从我院临床标本中分离出来的不动杆菌相关资料进行统计分析. 结果不动杆菌属在全部病原菌中的构成比有明显的升高趋势,2001年的构成比已居第4位;其构成比增加幅度和比例在所有病原菌中是高的;同时该菌在临床科室的分布也越来越广;该菌感染的构成比在炎热季节和老年患者以及危重患者集中科室中的构成比较高;不动杆菌在痰标本中的构成比高于其他种类标本.结论随着在临床感染病原菌中构成比的不断增高,不动杆菌已成为常见病原菌.根据其分布特征针对其高发人群、高发时段采取相应的治疗措施有可能取得较好的防治效果.
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呼吸系统不动杆菌感染的多重耐药性与耐药基因的检测
目的检测引起呼吸系统感染的不动杆菌多重耐药性及耐药基因. 方法采用标准的纸片扩散法(Kirby Bauer法)检测不动杆菌对16种抗生素耐药状况,用单纸片扩散法检测ESBLs表型,并用PCR方法对多重耐药菌株进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)TEM、SHV、OXA、IMP、CTX-M耐药基因的检测. 结果108株不动杆菌中77.78%对>2种的抗生素具有耐药性,其中有8株菌对15种抗菌药物均耐药;108株不动杆菌检出ESBLs表型阳性2株,且均为多重耐药菌株;2株ESBLs表型阳性的耐药基因为TEM型,扩增产物长535bp,SHV、OXA、IMP、CTX-M耐药基因均未检出. 结论不动杆菌对抗生素已产生明显多重耐性药,对有些常规使用的抗生素正向耐药方面转变,山东济南地区不动杆菌的ESBLs耐药基因可见TEM型.
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开放性骨折患者伤口不动杆菌感染的临床探讨
目的探讨骨折患者伤口不愈合不动杆菌感染的原因、规律,以利防范. 方法对我院1999年1月～2002年3月间,骨折后不愈合伤口分泌物标本,细菌学培养不动杆菌阳性的33例住院患者的多种临床因素进行回顾性分析. 结果多种不同因素与骨折后伤口不愈合不动杆菌感染有关,诸如伤口开放、手术实施、联合长期应用广谱抗生素有关,而与年龄、慢性疾病的有否、糖皮质激素的应用与否无关. 结论骨折患者不愈合伤口预防不动杆菌感染的关键在于合理应用抗生素,严格无菌操作,尽量缩短伤口开放时间及手术时间.
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鲍曼不动杆菌致眼内炎二例
近年来,鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumanii)感染不断增多,已引起临床微生物学者的关注.鲍曼不动杆菌是医院内获得性感染的重要病原菌,我国自2008年开始对住院患者鲍曼不动杆菌感染的目标监测结果显示,鲍曼不动杆菌感染主要部位为下呼吸道和泌尿道,感染者主要分布于重症加强护理病房(intensire care unit,ICU)[1-2].近年眼科的鲍曼不动杆菌感染率有所上升.下面就我院2013年8月在我科诊断为鲍曼不动杆菌感染所致的眼内炎2例报告如下.
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