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49株脑膜炎奈瑟菌体外抗菌药物敏感性检测
目的 了解2005-2006年中国脑膜奈瑟菌分离株(Neisseria meningitides,Nm)的抗菌药物敏感性变化趋势,为选择抗菌药物对流行性脑脊髓膜炎(流脑)患者进行治疗提供参考.方法 采用肉汤稀释检测低抑菌浓度(MICs)方法、药敏纸片扩散(K-β)法和E-test试纸条检测方法对本实验室收集的49株(16株A群、33株C群)2005-2006年分离的患者Nm菌株进行体外抗菌药物敏感性检测.结果 16株A群Nm菌株对复方新诺明、四环素、左氧氟沙星、萘啶酸4种抗菌药物耐药,对环丙沙星耐药或中度敏感.33株C群Nm菌株对复方新诺明耐药,31株(93.9%)C群菌株对萘啶酸耐 药,20株(60.6%)C群菌株对左氧氟沙星耐药,17株(51.5%)C群菌株对环丙沙星耐药.分别发现对青霉素不敏感的4株A群和1株C群Nm菌株.结论 2005-2006年,中国的A群和C群Nm菌株对磺胺类药物和喹诺酮类药物普遍耐药,此两类药物不适合中国流脑的临床用药及人群预防性给药.K-β药敏纸片和肉汤稀释MICs及E-test方法具有较高的一致性.
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2008-2009年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌对体外抗生素敏感性检测
目的 了解2008-2009年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌(Nm)分离株的抗生素敏感性变化趋势.方法 药敏纸片扩散(K-B)法和E-test试纸条检测方法对本研究室2008-2009年收集的68株分离自患者和健康带菌者菌株进行体外抗菌药物敏感性检测.结果 所有菌株对3种治疗药物头孢噻肟、头孢曲松和氯霉素均敏感,1株C群患者菌株对美洛培南耐药,13株埘青霉素不敏感菌株,6株对氨苄西林不敏感菌株.6种预防用药组中,除1株Y群带菌者菌株对利福平耐药外,其他菌株对阿奇霉素、米诺环素和利福平均敏感,70.59%菌株对荣啶酸.72.06%对环丙沙星,95.59%对复方新诺明耐药.W135群带菌者菌株对青霉素和氨苄两林敏感株比例较大,2株时磺胺类药物敏感.患者菌株和带菌者菌株药敏谱略有小同.结论 磺胺类和喹诺酮类药物仍不被考虑作为流脑的预防性药物,加强对青霉索和氨苄两林治疗药物在各种血清群Nm的耐药性监测.长期对Nm药敏监测非常必要,对流行性脑脊髓膜炎预防和治疗药物的选择应因时因地而宜.
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2003-2012年中国部分地区脑膜炎奈瑟菌体外抗生素敏感性分析
目的 了解我国脑膜炎奈瑟菌对抗生素敏感性的变化趋势.方法 对2003-2012年本研究室收集的脑膜炎奈瑟菌菌株,根据分离年份、血清群和来源(患者或健康携带者)选择487株,采用微量肉汤稀释法和E-test浓度梯度扩散法,对其进行体外12种抗生素敏感性检测和分析.结果 所有菌株对头孢噻肟、头孢曲松、阿奇霉素、美洛培南、氯霉素和米诺环素均敏感;对青霉素和氨苄西林不敏感的菌株分别是4.9％ (24/487)和3.5％ (17/487),75.6％(368/487)的菌株对萘啶酸耐药,87.1％ (424/487)对复方新诺明耐药,48.9％ (238/487)对环丙沙星耐药.从2005年开始出现对环丙沙星耐药的菌株23.8％ (24/101),从2006年开始出现对青霉素类药物不敏感菌株2.4％ (2/82).患者和健康携带者来源的菌株对萘啶酸、复方新诺明和环丙沙星3种药物显现不同的耐药率.结论 我国流脑菌株对磺胺类和喹诺酮类药物具有较高的耐药性,对青霉素类药物不敏感的菌株也逐渐增多.这种耐药性与菌株分离年份、血清群和菌株来源具有相关性.
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部分非鲍曼不动杆菌耐药性及相关基因分析
目的 了解目前非鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药现状及耐药基因携带情况. 方法随机抽取100株不动杆菌临床分离株,采用分子生物学方法筛选非鲍曼不动杆菌,用E-test方法检测非鲍曼不动杆菌对12种抗生素的耐药性,用PCR方法检测16种相关耐药基因的分布. 结果共筛选出17株非鲍曼不动杆菌,7株为多重耐药(41.2%),其中对头孢噻肟的耐药率为100%,对氯霉素、哌拉西林、氨苄西林和氨曲南的耐药率分别为76.5%、76.5%、64.7%和52.9%,对多粘菌素B普遍敏感;检出6种耐药基因分别为ampC、blaTEM、blaPER-1、blaOXA-23-like、blaOXA-58和Intl. 结论携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因和blaOXA-23-like基因为非鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类和碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因.非鲍曼不动杆菌的耐药形势严峻,应加强监测.
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产气肠杆菌中发现碳青霉烯酶KPC-2型
肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(Klebsiella pneumoniae Carbapenemase,KPC),属A类β-内酰胺酶.2010年3月25日我们从一家三等甲等医院老年患者的痰液中分离到1株碳青霉烯类耐药的产气肠杆菌(标本编号:20100323BAA049,经gyrA和parC基因扩增与测序,GenBank比对确认).为了解该菌株的β-内酰胺类耐药机制,我们采用E-test法检测了该菌对26种抗菌药物敏感性,并进行了A类、B类、C类、D类等4类41种β-内酰胺酶基因检测,用改良的三维试验法检测AmpC酶、ESBLs和金属β-内酰胺酶活性,用改良Hodge试验法检测碳青霉烯酶活性.
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幽门螺杆菌克拉霉素纸片扩散法药敏试验标准化研究
目的 比较纸片扩散法和E-test法检测幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性,并进行纸片扩散法检测的标准化研究.方法 从接受胃镜检查患者的胃黏膜活检样本中分离出44株幽门螺杆菌,用纸片扩散法和E-test法检测菌株对克拉霉素的敏感性,并建立直线回归方程评价两种方法的一致性.结果 采用E-test法,克拉霉素的小抑菌浓度(MIC)为0.016 ～ 256 μg/mL,菌株对克拉霉素的耐药率为27.3％ (12/44).采用纸片扩散法,抑菌圈直径是0～ 35 mm,两种方法具有良好的相关性(r2 =0.91,P＜0.01).根据回归方程,抑菌圈直径≥18 mm表示菌株对克拉霉素敏感,≤15 mm为耐药.根据上述折点,两种检测方法检测的一致率为100％.结论 纸片扩散法与E-test法具有良好的一致性,在临床上可以替代E-test法.
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产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性的探讨
目的探讨临床患者分离出来的肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物的耐药性. 方法按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的方法与规则,采用浓度梯度法(E-test)测定并比较亚胺培南等11种抗菌药物对肺炎克雷伯菌的体外抗菌活性. 结果除亚胺培南对产ESBLs和非产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率均为零外,产ESBLs的肺炎克雷伯菌的耐药率显著高于非产ESBLs的肺炎克雷伯菌. 结论临床实验室应将ESBLs作为常规检测项目;在治疗包括肺炎克雷伯菌在内的革兰阴性菌严重感染中,敏感的抗菌药物是碳青酶烯类,如亚胺培南,其次为头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌药物.
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VITEK-2 Compact检测鲍氏不动杆菌对阿米卡星药敏结果准确性的探讨
目的 针对VITEK-2 Compact在检测鲍氏不动杆菌对阿米卡星药敏试验中的局限性,利用金标准E-test 法探索不同耐药表型和检测结果的相关性,为临床提供更加准确的结果.方法 运用VITEK-2 Compact ASTGN13药敏卡测定296株鲍氏不动杆菌的药敏试验结果,按耐药表型将所测菌株分为3组即1组仅阿米卡星敏感、2组仅阿米卡星及亚胺培南敏感、3组除阿米卡星及亚胺培南外存在其他被检测药物敏感；每组随机抽取40株用E-test法作为金标准同时进行K-B法测定鲍氏不动杆菌对阿米卡星的敏感性.结果 3组检测鲍氏不动杆菌K-B法和E-test法均一致；1组VITEK-2 Compact结果与K-B法及E-test法结果不一致,2组39株不一致、1株一致,3组2株结果不一致、38株结果一致；同时观察到VITEK-2 Compact AES专家系统显示耐药表型为野生株的29株3种方法结果一致.结论 试验结果证实K-B法及E-test法的结果是一致的,所以VITEK-2Compact用户可以采用K-B法检测鲍氏不动杆菌对阿米卡星的敏感性.
关键词： VITEK-2 Compact 鲍氏不动杆菌 阿米卡星 纸片扩散法 E-test -
E试验法在淋球菌药物敏感性试验中的应用评价
目的 评价E试验(E-test)法检测淋球菌对5种药物敏感性的临床价值.方法 对2014年深圳市淋球菌耐药监测项目收集的100株该地区淋球菌临床分离株,分别采用琼脂稀释法、E-test以及纸片扩散法(K-B法)进行头孢曲松、青霉素、大观霉素、环丙沙星以及阿奇霉素药敏试验,以琼脂稀释法结果作为标准,评价E-test与琼脂稀释法结果的一致率,比较E-test与K-B法的误差率及相关性.结果 E-test与琼脂稀释法测得的100株淋球菌对五种抗生素的50％小抑菌浓度MIC50、MIC90以及MIC值范围大多完全相同或仅相差0.5～1.5个稀释度,两种方法具有较高的基本一致率(72％～98％),其中一致率高的是环丙沙星(98％),其次是阿奇霉素(92％),一致率低的是青霉素(72％).除青霉素E-test误差率(22％)高于K-B法(12％)外,其余四种抗生素E-test的误差率均低于K-B法,且与琼脂稀释法的相关性高于K-B法.结论 环丙沙星和阿奇霉素的E-test可以作为琼脂稀释法的替代方法应用于临床,头孢曲松和大观霉素的E-test可能导致结果偏低,而青霉素由于同时具有较低的一致率和较高的误差率,则不适宜采用.
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E-test法对酵母样真菌的药物敏感性检测
目的:探讨抗真菌药敏试条(E-test)法检测酵母样真菌对伊曲康唑(IT)、5-氟孢嘧啶(SFC)、两性霉素B(AP)、氟康唑(FL)4种抗真菌药的敏魑性.方法:用E-test法检测取ICU患者的白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念球菌、无名念球菌、近平滑念珠菌等5种酵母样真菌对4种药物的敏感性,判定其低抑菌浓度(MIC)值.结果:白色念珠菌对4种药物均敏感,且对AP及5-FC敏感,5种酵母样真菌对此两药的MIC值分剐为0.002～0.75 mg,L和≤0.002～≥932 mg/L.结论:E-test法对酵母样真菌的药敏检测具有与微量稀释法良好的一致性,其操作简便,测值较精确,重复性好,因此在一定范围内有较好的临床应用价值.
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河北省脑膜炎奈瑟菌体外抗菌药物敏感性检测
目的 了解河北省2012年分离脑膜炎奈瑟菌的抗菌药物敏感性情况,以便为流脑防控提供科学依据.方法 使用K-B纸片法和E-test梯度试纸条法对48株分离自患者和健康带菌者的Nm菌株进行体外抗菌药物敏感性试验.结果 对头孢噻肟、头孢曲松、美罗培南、氯霉素、阿奇霉素、利福平、米诺环素100％敏感,对磺胺甲基异恶唑100％耐药.青霉类药物高敏感率70.83％,不可分群菌株对此类药物敏感性较可分群菌株为高.病人来源菌株对青霉素类药物敏感性低于健康带菌者菌株.喹诺酮类药物高敏感率仅10.42％.结论 青霉素类药物已出现明显的敏感性下降现象,尚未发现耐药菌株.头孢类药物依然保持着良好的抗菌效力.全部48株Nm菌株对喹诺酮类和磺胺类普遍耐药,建议谨慎使用这两类药物.
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氟康唑治疗复杂型外阴阴道假丝酵母菌病的疗效及与体外药敏试验结果的关系
目的 探讨应用氟康唑治疗复杂型外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的效果及其与体外抗真菌药物敏感性的关系.方法 2005年6月至2005年9月在北京大学深圳医院妇科门诊对复杂型VVC患者应用氟康唑治疗,采用E-test法对检出的假丝酵母菌进行体外药敏试验.结果 从92例复杂型VVC患者分离假丝酵母菌94株,2例患者分离出2株假丝酵母菌,占2.2%.治疗完成后7～14 d和30～35 d患者的真菌学治愈率分别为85.9%(79/92例)和71.7%(66/92例).治疗完成后7～14 d治愈组和治疗失败组患者假丝酵母菌对氟康唑的敏感率分别为93.8%(76/81株)和61.5%(8/13株),P＜0.01.治疗完成后30～35 d治愈组和治疗失败组患者假丝酵母菌对氟康唑的敏感率分别为94.1%(64/68株)和76.9%(20/26株),P＜0.05.治疗完成后7～14 d治愈组和治疗失败组患者假丝酵母菌对氟康唑的剂量依赖敏感率分别为4.9%(4/81株)和38.5%(5/13株),P＜0.01.治疗完成后30～35 d治愈组和治疗失败组患者假丝酵母菌对氟康唑的剂量依赖敏感率分别为4.4%(3/68株)和23.1%(6/26株),P＜0.05.治疗完成后7～14 d和30～35 d治愈组和失败组患者假丝酵母菌对氟康唑的耐药率分别为1.3%(1/81株),0(0/13株)和1.5%(1/68株)及0(0/26株),P＞0.05.结论 体外试验假丝酵母菌对氟康唑敏感性降低是治疗失败的原因之一.
关键词： 外阴阴道假丝酵母菌病 氟康唑 E-test 敏感性 -
检测肠杆菌科超广谱β-内酰胺酶方法的性能评价
目的 对临床上如何有效的开展对肠杆菌科超广谱β-内酰胺酶的检测方法进行研究,以利于临床上合理的使用抗生素类药物.方法 对送检的58株大肠埃希菌和42株肺炎克雷伯菌分别采用双纸片协同实验、三维实验、纸片表型确证实验和E-test法分别对这100株细菌进行超光谱β-内酰胺酶的检测,记录每种检测方法的灵敏度和特异性.并将结果使用SPSS统计学软件进行χ2检验,α=0.05.结果 双纸片协同实验法:敏感性86.21%,特异性88.10%;纸片表型确证方法:敏感性87.93%,特异性85.71%;三维检测法:敏感性93.10%,特异性88.10%;E-test法:敏感性98.28%,特异性95.24%.χ2检验的结果为P<0.05,具有统计学意义.结论 四种方法中,E-test法的检测灵敏度和检测特异性优,对肠杆菌科超广谱β-内酰胺酶的检测效果佳.
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抗真菌药物敏感性试验方法研究进展
近年来真菌感染发生率在世界范围内呈上升趋势,那些少见的对抗真菌药物不敏感的病原性真菌,如接合菌、毛孢子菌、镰刀菌等引起的感染也逐渐增多,且病死率高,因此真菌感染的诊断和治疗成为研究热点之一.临床实践中,体外抗真菌药敏试验的重要性日益增加,在指导临床医师合理选择用药及检测病原真菌对抗真菌药物的耐药趋势方面发挥着越来越大的作用.
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52株非白色念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的耐药分析
目的调查我院非白色念珠菌(non-Candida albicans)对氟康唑和伊曲康唑的耐药特点,指导临床用药.方法用E-test法测定氟康唑和伊曲康唑对52株非白色念珠菌的低抑菌浓度(MIC).结果对52株非白色念珠菌氟康唑的耐药率为9.6%,MIC50/MIC90为3/16μg/ml;对伊曲康唑的耐药率为38.5%,MIC50/MIC90为0.5/2μg/ml.对52株非白色念珠菌2种药物抗菌活性总体一致性为34.6%(18/52),28株(53.8%)对伊曲康唑剂量依赖敏感,但仍对氟康唑敏感.结论非白色念珠菌对氟康唑和伊曲康唑表现不同程度耐药,应加强对非白色念珠菌耐药性的监控.
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上海市沙门菌和志贺菌腹泻型谱和耐药特征的分析
目的 通过对沙门菌和志贺菌致泻血清型和耐药性研究了解菌型特征及耐药谱.方法 收集和鉴定了115株沙门菌和644株志贺菌;以K-B法测试沙门菌和志贺菌对16种抗生素的耐药率,使用E-test定量法确认产超广谱β-内酰酶(ESBLs)菌株.结果 肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和福氏志贺菌4c亚型(F4c)、宋内、福氏志贺菌2b亚型(F2b)分别是造成腹泻的优势血清型;比较2年中沙门菌的耐药率有上升趋势,耐四环素-萘啶酸-复方新诺明的R1型志贺菌比例高达79.91%,产ESBLs的分别有1株肠炎沙门菌、44株福氏志贺菌、11株宋内志贺菌.结论 试管凝集效价是诊断不典型志贺菌型特异性抗原的定量依据,用E-test法判定的产ESBLs沙门和志贺菌符合复燃的新型肠道病原菌定义,志贺菌的耐药型谱对肠道门诊选用抗菌药物具有重要参考价值.
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广西脑膜炎奈瑟菌体外抗菌药物敏感性检测
目的:用广西2003年-2010年从现症病人和密切接触者标本中分离出的脑膜炎奈瑟菌(Nm)进行12种药物的体外敏感实验,了解广西脑膜炎脑瑟菌的耐药性并指导流脑的防控工作.方法:运用E - test法检测A、B、C、W135群共计33株脑膜炎奈瑟菌低抑菌浓度(MIC).结果:33株菌对6种治疗用药青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟、氯霉素、美罗培南100％敏感,6种预防药物四环素27.27％敏感,利福平100％敏感,阿奇霉素100％敏感,环丙沙星60.61％敏感,左氧沙星60.61％敏感,复方新诺明仅6.06％敏感.结论:广西部分脑膜炎奈瑟菌已对磺胺类药物产生耐药性,提示在流脑防控工作中应慎重选择抗生素.
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运用E-Test法对肠杆菌科细菌产超广谱酶的鉴别
为了解肠杆菌科细菌耐药及产超广谱β-内酰胺酶(EsBL)的情况，运用K-B琼脂扩散法与E-Test ESBL筛选纸条相结合，对177株肠杆菌科的细菌进行耐药性监测，并对41株耐头孢他定和(或)头孢噻肟的细菌采用E-Test法进行超广谱酶的测定，结果显示8种抗菌药物对177株肠杆菌科细菌抗菌活性强依次为亚胺培南(96％)，阿米卡星(85％)，头孢他定(73％)，环丙沙星(69％)。11株(6．2％)产超广谱酶的细菌中5株为大肠杆菌，4株为肺炎克雷伯杆菌，余下2株为阴沟肠杆菌。提示产超广谱酶的细菌对第三代头孢菌素耐药，对亚胺培南100％敏感，对阿米卡星、头孢西丁敏感率均在60％以上。
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院内感染铜绿假单胞菌的耐药性
为监测院内感染铜绿假单胞菌的耐药性和评价E试验法的可靠性及实用性,采用试管双倍稀释法和E试验法测定60株院内感染铜绿假单胞菌对多种常用抗生素的MIC,并测定E试验法的重复性和接种菌量对结果的影响.结果头孢他啶、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林和阿洛林的耐药率约为20%,喹诺酮类抗生素中,只有左氧氟沙星的耐药率较低(25%);头孢曲松和氨曲南耐药率高达73%.阿米卡星仍较敏感,耐药率为23.3%,但庆大霉素和妥布霉素耐药率很高,分别为46.7%和43.3%.E试验法的重复性非常好,接种菌量对MIC值影响较小,且E试验法的结果与试管法有很好的相关性.
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E-test监护病房革兰阴性杆菌耐药性的7年动态研究
目的 调查我院重症监护病房中革兰阴性杆菌耐药状况,了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的产生率,并比较近年来我院细菌耐药性的变迁,为临床合理用药提供参考.方法 用E-test法测定我院重症监护病房住院患者感染灶分离的108株革兰阴性杆菌对12种抗菌药物的低抑菌浓度(MIC)及细菌产ESBLs的情况.结果 亚胺培南对所有受试菌抗菌活性高,耐药率为16.7%;头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、头孢吡肟、哌拉西林/三唑巴坦及替卡西林/克拉维酸、头孢他啶和ertapenem的耐药率为34.2%～49%;其它4种抗菌药物耐药率均在60%～69.4%之间.筛选出大肠埃希菌、克雷伯菌属的ESBLs产生菌24株,ESBLs检出率分别为44.4%和53%;亚胺培南对所有大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBL株均较敏感.新型青霉烯类抗菌药物ertapenem(MK-0826)对收集的108株革兰阴性杆菌的抗菌活性较前下降,总耐药率为41.7%.七年资料相比,头孢哌酮/舒巴坦耐药率由16.7%增至37%,头孢他啶的耐药率亦明显增高,由1998年的26.2%增高到2005年的49%,除哌拉西林/三唑巴坦、替卡西林/克拉维酸的耐药率变化不大外,其他抗菌药物的耐药率变化较大.结论 亚胺培南对所分离的细菌均表现较高的敏感性,对ESBLs产生菌亦有较强的抗菌活性.7年来细菌对所检测药物的耐药率均有不同程度增加.
