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空肠弯曲菌耐药谱特征分析
目的 分析十几年间我国空肠弯曲菌临床分离株对10种抗生素耐药谱特征,了解我国空肠弯曲菌耐药的变迁趋势.方法 采用世界卫生组织(WHO)全球食源性病原菌感染网络(GFN)推荐的弯曲菌琼脂稀释法,测定1995年至今分离的116株空肠弯曲菌对6类10种抗生素的小抑菌浓度(MIC).结果 经对实验结果整体分析,甲硝唑的总体耐药率高为97.4％ (113/116),四环素为82.8％(96/116),环丙沙星为80.2％(93/116),萘啶酸为79.3％(92/116),左氧氟沙星和氨苄西林耐药率相同,为40.5％(47/116),氯霉素为18.1％(21/116),庆大霉素为8.6％(10/116),链霉素为4.3％(5/116),低为红霉素0(0/116).随着时间的推进,萘啶酸、环丙沙星、左氧氟沙星和氨苄西林的MIC有明显增高趋势；四环素、红霉素、庆大霉素、氯霉素和甲硝唑的MIC值变化不明显；链霉素的MIC值变化有下降的趋势.6.1％的菌株出现了8种抗生素多重耐药的结果,且菌株均出现在2010年后.经统计学分析,萘啶酸、环丙沙星、链霉素、庆大霉素、氯霉素和氨苄西林6种抗生素在2001年前、2001-2005年、2006-2010年和2010年后4个时间段中耐药率差异有统计学意义.结论 空肠弯曲菌对红霉素、庆大霉素以及链霉素3种抗生素依旧保持了较高的敏感性,对萘啶酸、环丙沙星、左氧氟沙星、四环素、甲硝唑以及氨苄西林6种抗生素产生了较大程度的耐药.
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引起尿路感染的阴道加特纳菌的分离鉴定和药敏分析
目的 探析阴道加特纳菌导致的尿路感染的药敏及分离鉴定状况.方法 人血哥伦比亚琼脂上应用经灭菌后的一次性接种环接种10μL清洁中段尿,置于5%CO2、35°C环境下进行48h孵育,将可疑菌落纯化挑出,于ATB链球菌鉴定条进行细菌鉴定,确定为阴道加特纳菌后保存;菌株复苏后用琼脂稀释法测10种抗生素对54株阴道加特纳菌的90%低抑菌浓度(MIC90)和50%低抑菌浓度(MIC50).结果 人血哥伦比亚琼脂上54株阴道加特纳菌均良好生长、β-溶血、菌落典型显著;根据厌氧菌评估标准进行药敏试验,克林霉素、亚胺培南、头孢曲松、头孢噻肟、头孢西丁、氨苄西林-舒巴坦敏感率均为100%;其他依次为四环素(72.2%)、氨苄西林(68.5%)、左氧氟沙星(51.8%)、甲硝唑(35.2%).结论 阴道加特纳菌导致的尿路感染可用人血哥伦比亚琼脂培养分离、可应用克林霉素、亚胺培南、头孢曲松、头孢噻肟、头孢西丁、氨苄西林-舒巴坦等治疗尿路感染,阴道加特纳菌的相应药敏试验标准应尽快制定,以防经验用药,引起耐药性.
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乌梅对308株临床菌株的抑菌效果
目的 观察乌梅对临床菌株的抑菌效果.方法 采用琼脂稀释法,对乌梅进行308株临床菌株的抑菌活性检测.结果 乌梅对112株金黄色葡萄球菌、112株表皮葡萄球菌和28株肠球菌的MIC50分别为 0.72、1.44、0.72 mg/mL;其MIC90分别为 1.44、1.44、0.72 mg/mL.对肺炎克雷伯菌和大肠杆菌的 MIC90分别为 2.88、1.44 mg/mL.结论 乌梅对革兰阳性球菌和某些革兰阴性杆菌均有较好的抑菌活性.
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野菊花等中草药对71株解脲脲原体体外抑菌研究
解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)不仅引起男女泌尿生殖道感染,也是男性不育及不良妊娠重要原因.由于Uu没有细胞壁结构,不被青霉素类药物所抑制.本文采用琼脂稀释法测定野菊花、白花蛇舌草、复方金钱草等中草药对71株Uu抑菌作用,为中草药应用Uu临床治疗提供实验依据.
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甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学调查
目的了解甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及分子流行病学特点. 方法采用纸片扩散法及琼脂稀释法检测2002年从北京协和医院住院患者分离的165株MRSA的耐药性;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对其中重症监护病房(ICU)和呼吸重症监护病房(RCU)分离的65株MRSA作同源性分析. 结果 165株MRSA对万古霉素和替考拉宁的敏感率为100%,对庆大霉素的耐药率为100%;对左氧氟沙星、四环素、红霉素耐药率分别为98.2%、96.3%、93.9%.对甲氧苄啶/磺胺甲唑和氯霉素敏感率分别为95.8%及98.8%;ICU和RCU病房分离MRSA的PFGE图谱有5种类型(A～E型),以A型为主(56株),A型又包括A1亚型(55株)和A2亚型(1株). 结论医院获得性MRSA是多重耐药菌,在ICU和RCU病房发生了基因型为A1亚型的MRSA菌株暴发流行.
关键词： 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌 脉冲场凝胶电泳 琼脂稀释法 -
用PCR分析高水平耐四环素淋病奈瑟菌质粒类型
1985年美国首次分离出高水平质粒介导的耐四环素淋病奈瑟菌(hight-level plasmid mediated tetracycline-resistant N.gonorrhoea,TRNG)以来,在世界各地引起广泛流行,欧洲、非洲、亚洲、拉丁美洲等地区都有报道,有些地方TRNG在质粒介导型耐药菌株中分离率居首位.根据限制性内切酶谱将TRNG分为"荷兰型"和"美国型"两种[1],"美国型"与1600 bp的扩增产物相关,"荷兰型"与700 bp大小的扩增产物相关.1991年成都地区首次分离出TRNG[2],现已成为本地区流行的主要耐药菌株.我国过去对TRNG分型主要采用琼脂稀释法测定对四环素的小抑菌浓度或质粒抽提等方法,未对其携带的质粒类型进行基因分型.我们对1999年-2002年我所性病门诊收集的476株淋病奈瑟菌采用琼脂稀释法和聚合酶链反应对其携带的质粒类型进行检测和分析,现报告如下.
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4种方法检测替加环素对鲍曼不动杆菌和肠杆菌科细菌体外药敏结果分析
目的：比较四种不同药敏方法检测替加环素对鲍曼不动杆菌和肠杆菌科细菌药敏结果的不同。方法将临床分离的鲍曼不动杆菌（158株）和肠杆菌科细菌（339株）用纸片扩散法检测替加环素敏感性，对非敏感的124株细菌再分别采用微量肉汤稀释法、MTS法、琼脂稀释法检测替加环素小抑菌浓度（ MIC），分析四种不同药敏检测方法间的差异性。结果替加环素对纸片扩散法非敏感的两种细菌均有较好的抗菌活性，MIC50大部分在敏感范围内（0．5～2 mg／L），MIC90均为4 mg／L。微量肉汤稀释法表明，替加环素对鲍曼不动杆菌和肠杆菌科细菌均有较好的抗菌活性，MIC50为1 mg／L， MIC90为4 mg／L。参照美国食品药品监督局（ FDA）和欧洲药敏试验委员会（ EUCAST）判读标准，敏感率分别为87．1％和70．2％。琼脂稀释法显示多数鲍曼不动杆菌和肠杆菌科细菌测得的替加环素MIC结果比微量肉汤稀释法高2个稀释度[基本一致性（ EA）为56．5％]，按照FDA判读标准，非常重大误差（ VME）和重大误差（ME）均为0，分类一致性（CA）为46．8％；按照EUCAST判读标准，VME为0．8％，CA为24．2％。MTS法相比于琼脂稀释法，测定替加环素对鲍曼不动杆菌和肠杆菌科细菌的药敏结果更好，MIC50为1．5 mg／L，MIC90为4 mg／L，与微量肉汤稀释法较接近，按照FDA／EUCAST判读标准，敏感率分别为83．1％／21．0％，CA分别为81．5％／29．8％，EA为71．8％，但多数细菌结果比微量肉汤稀释法高1个稀释度。FDA判读标准的相关性比EUCAST判读标准好。纸片扩散法结果表明，按照FDA判断标准， ME 为19．4％，小误差（mE）为71．8％。本研究未出现VME菌株，但CA仅为8．9％。结论纸片法、MTS法、琼脂稀释法与微量肉汤稀释法均存在差异，其中以MTS法与微量肉汤稀释法相关性好，且FDA判读标准相比于EUCAST判读标准相关性更好。建议临床检测替加环素体外药敏试验，可参照美国FDA判读标准，通过纸片法常规检查，对于纸片法中介或耐药的菌株再进行MTS法进行确认，必要时可进行微量肉汤稀释法做进一步确证试验。
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头孢哌酮/舒巴坦对ICU常见革兰阴性杆菌抗菌活性的研究
目的 了解头孢哌酮/舒巴坦对临床常见革兰阴性杆菌的抗菌活件,比较不同浓度的头孢哌酮/舒巴坦纸片药敏试验结果的差异.方法 分离自浙江大学医学院附属第二医院、浙江省人民医院、杭州市第三人民医院和杭州市中医院的临床常见381株革兰阴性杆菌用头孢哌酮/舒巴坦含量75/75(150)和头孢哌酮/舒巴坦含量75/30(105)的药敏纸片进行K-B法药敏试验,同时用标准的琼脂稀释法检测头孢哌酮/舒巴坦的低抑菌浓度(MIC),并采用WHONET 5.4软什和SPSS统计软件对实验结果进行分析.结果 头孢哌酮/舒巴坦105浓度和150浓度纸片法检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,两种浓度纸片的符合率分别为:26.3%,79.2%,83.7%和33%,用SPSS 10.0统计k-related samples检验,P＜0.05;105浓度纸片法和琼脂稀释法针对以上4种菌的比对符合率分别为77.8%,89.6%,70.9%和77%;150浓度纸片法和琼脂稀释法的比对符合率分别为:27.3%,79.2%,61.6%和30%,两种浓度纸片法和稀释法的误差率比较,150纸片的假敏感和假中介要高于105纸片.结论 105浓度纸片法的结果更接近于作为金标准的稀释法,而目前临床药敏实验使用的150浓度的纸片法提高了细菌的敏感性.
关键词： 头孢哌酮/舒巴坦 105纸片/150纸片 K-B法 琼脂稀释法 革兰阴性杆菌 -
ATB链球菌药敏试验条检测肺炎链球菌药敏试验的评价
肺炎链球菌是引起社区获得性肺炎(CAP)和小儿上呼吸道感染的主要病原菌,而耐青霉素的肺炎链球菌(PRP)及多重耐药株的持续增加给治疗带来了严峻考验,临床实验室对该菌的药敏试验主要有K-B纸片法、Etest法、琼脂稀释法、肉汤稀释法和ATB链球菌药敏试验条等 [1-3].
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鲍曼不动杆菌6种氨基糖苷类药物修饰酶基因的研究
为研究鲍曼不动杆菌氨基糖苷类药物修饰酶基因及其与耐药表型关系,我们用琼脂稀释法检测了庆大霉素、阿米卡星等6种抗菌药物对20株多重耐药性鲍曼不动杆菌的低抑菌浓度(MIC),并用聚合酶链反应(PCR)检测了6种氨基糖苷类药物修饰酶基因.
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脑脊髓液中肺炎链球菌耐药性的检测
我们从脑脊液中分离到45株肺炎链球菌，采用苯唑西林纸片扩散法和琼脂稀释法测定了肺炎链球菌对青霉素等10种抗生素药物的耐药情况。报道如下。
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不同基因亚型幽门螺杆菌对大蒜素的敏感性
目的:研究不同基因亚型幽门螺杆菌对大蒜素的敏感性.方法:从新鲜胃黏膜中分离、培养出Hpylori共5l株.经聚合酶链反应(PCR)鉴定Hpylori菌株的cagA,vacA(sl,mlb,m2)基因亚型.用琼脂稀释法测定51例Hpylori分离株对大蒜素的低抑菌浓度(MIC),并计算MIC5o值.结果:大蒜素对5l株Hpylori菌株表现出良好的抑菌效果,总抑菌率达92.2%(47/51),其MIC5o值为7.97 mg/L,MIC值范围在1.25-40 mg/L.vacAmlb+基因亚型Hpylori菌株较vacAmlb-基因亚型Hpylori菌株对大蒜素敏感(相对中位数潜力0.55,95%可信区间0.30-0.89);vacAm2+基因亚型Hpylori菌株较vacAm2-基因亚型Hpylori菌株对大蒜素敏感(相对中位数潜力0.67,95%可信区间0.44-0.98).cagA+vacAsl+mlb+、cagA+vacAsl+m2+基因亚型组合Hpylori菌株较cagA+vacAsl-mlb-Hpylori菌株对大蒜素敏感(相对中位数潜力0.38/0.37,95%可信区间0.10-0.78/0.11-0.81).结论:大蒜素对Hpylori菌株有良好的抑菌效果,其MIC5o值为7.97 mg/L,MIC值范围在1.25-40 mg/L.并且其抗菌作用随着大蒜素浓度的增高而加强.不同基因亚型及组合的Hpylori菌株对大蒜素的敏感性不同.
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浅谈药敏试验方法及影响试验结果因素
本文探讨细菌药敏试验方法及影响试验结果因素。做好药敏试验质量控制。避免用药不当，产生耐药菌株或原有耐药菌株耐药性的增高。细菌药敏试验方法包括：试管稀释法（全量法）、微量稀释法、琼脂稀释法、纸片琼脂扩散法、β－内酰胺酶（青霉素酶）试验、筛选耐甲氧苯青霉素葡萄球菌的方法。并探讨影响试验结果因素。做好药敏试验质量控制。避免用药不当，产生耐药菌株或原有耐药菌株耐药性的增高。
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中药水提物对痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用
目的 探讨中药水提物对痤疮丙酸杆菌标准株及痤疮丙酸杆菌临床株的体外抑制作用.方法 采集痤疮患者皮损内容物,35℃厌氧培养48 h,采用系列生化实验及VITEK全自动微生物鉴定仪鉴定为痤疮丙酸杆菌;以琼脂稀释法分别检测19种中药水提物对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌作用.结果 黄柏、黄芩、大黄的小抑菌浓度(MIC)为25 mg/ml;金银花、苦参的MIC为50 mg/ml;连翘的MIC为100 mg/ml;地肤子、白头翁、百花蛇舌草、鱼腥草、马齿苋、旱莲草、紫草、板蓝根、大青叶、蒲公英、车前子、白芷、蛇床子等13味中药在高浓度200mg/ml进行测试时仍未产生抑菌作用.结论 黄柏、黄芩、大黄、金银花、连翘、苦参等6种中药水提物对痤疮丙酸杆菌具有良好的体外抑制作用.
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头孢哌酮/舒巴坦对临床常见革兰阴性杆菌抗菌活性的研究
目的 了解头孢哌酮/舒巴坦对临床常见革兰阴性杆菌的抗菌活性,比较不同浓度的头孢哌酮/舒巴坦纸片药敏试验结果的差异.方法 用头孢哌酮/舒巴坦含量75/75(150)和75/30(105)两种药敏纸片对临床分离的216株革兰阴性杆菌,进行K-B法检测同时用琼脂稀释法检测头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)的低抑菌浓度(MIC),并采用SPSS统计软件对实验结果进行分析.结果 头孢哌酮/舒巴坦105浓度和150浓度纸片法检测鲍氏不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽窄食单胞菌和铜绿假单胞菌,两种浓度纸片的符合率分别为30.8％,75.5％,89.4％,90.0％和79.4％;其中符合率差的是鲍氏不动杆菌,150浓度纸片的敏感率和中介率均增加,耐药率下降,与105浓度纸片比较差异均有统计学意义(P＜0.05);对2组抑菌环直径进行配对t检验,差异主要来自于鲍氏不动杆菌(P＜0.05).结论 目前临床药敏实验使用的150浓度的纸片法提高了细菌的敏感性,特别是鲍氏不动杆菌的敏感性.
关键词： 头孢哌酮/舒巴坦 105纸片/150纸片 K-B法 琼脂稀释法 抗菌活性 -
临床分离肠球菌的耐药性监测与分析
目的监测临床分离的140株肠球菌对16种常用抗菌药物的敏感性,为临床治疗肠球菌感染提供依据. 方法采用琼脂稀释法测定各抗菌药物对肠球菌的MIC,计算MIC50、MIC90和敏感率,采用快速硝噻吩纸片显色法对140株肠球菌进行β-内酰胺酶测定.结果万古霉素、替考拉宁对粪肠球菌和屎肠球菌的敏感性高,均为100%,粪肠球菌对氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南和氨苄西林敏感率分别为91.9%、90.8%和90.8%;屎肠球菌对氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南和氨苄西林分别为92.7%、82.9%和90.2%;粪肠球菌、屎肠球菌以及其他肠球菌对头孢吡肟的敏感率低分别为14.9%、9.8%和0;青霉素和氨苄西林对粪肠球菌、屎肠球菌的药敏结果可推测对亚胺培南的敏感性. 结论万古霉素和替考拉宁仍是治疗肠球菌感染有效的药物,临床应用亚胺培南前必须进行药物敏感试验.
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上海市6所医院供水系统36株军团菌体外药敏结果分析
目的 评估4种抗菌药物对医院环境中分离军团菌的体外抗菌活性,为临床治疗军团菌感染选择抗菌药物提供参考.方法 收集2009年5-9月上海市6所医院供水系统中军团菌分离株36株,其中嗜肺军团菌血清1型(Lp-1)19株,嗜肺军团菌血清2-15型(Lp2-15)6株,其他军团菌属细菌(L.spp)11株,使用酵母琼脂培养基(BYE),采用琼脂稀释法药敏试验,孵育48h分别测定左氧氟沙星(LEV)、莫西沙星(MXF)、阿奇霉素(AZM)和红霉素(ERY)4种抗菌药物的低抑菌浓度(MIC).结果 4种药物的MIC范围分别为:LEV 0.015～0.06 mg/L,MXF 0.06～0.5 mg/L,ERY 0.125～1 mg/L,AZM 0.03～1 mg/L,MIC5o、MIC90分别为LEV0.015、0.06 mg/L,MXF 0.06、0.06 mg/L,AZM 0.25、0.5 mg/L,ERY 0.5、1 mg/L;4种药物的抑菌商数(IQ)分别为LEV=185.13±49.98,MXF=53.61±28.03,AZM=30.40±28.94,ERY=9.83±6.52.结论 氟喹诺酮类药物的体外抗军团菌的活性优于大环内酯类,同类抗菌药物比较,左氧氟沙星的体外抗军团菌活性优于莫西沙星,阿奇霉素的体外活性优于红霉素.
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复方中药对产ESBLs大肠埃希菌的作用研究
目的 探讨经不同煎煮时间处理的复方中药-银翘散、桂枝汤对临床常见产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的作用及电镜下细菌细胞形态结构变化.方法 采用M-H琼脂稀释法分别对来自临床的30株产ESBLs大肠埃希菌和30株非产ESBLs大肠埃希菌进行敏感性对照试验,测定其低抑菌浓度(MIC).结果 银翘散和桂枝汤对两组不同的细菌均具有较好的抑制作用,煎煮10 min的银翘散对产与非产ESBLs的MIC值分别为(81.07±35.39)、(80.00±33.35) mg/ml,煎煮20 min的银翘散对产与非产ESBLs的MIC值分别为(74.67±34.09)、(82.13±34.32)mg/ml;煎煮10 min的桂枝汤对产与非产ESBLs的MIC值分别为(75.20±24.19)、(71.20±25.59)mg/ml,煎煮20 min的桂枝汤对产与非产ESBLs的MIC值分别为(72.00±24.41)、(69.60±25.49)mg/ml;统计学显示两组之间差异无统计学意义;煎煮10、20 min处理的药液对产与非产ESBLs大肠埃希菌的平均MIC值经统计学处理,差异也无统计学意义.结论 在抗菌药物选择压力增大的情况下,治疗由产ESBLs大肠埃希菌引起的感染,复方中药可起到较好的治疗作用.
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抗菌药物对革兰阳性球菌体外抗菌活性研究
目的 对比研究头孢硫脒、苯唑西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢西丁、阿奇霉素、左氧氟沙星、万古霉素等8种抗菌药物对临床分离革兰阳性球菌的抗菌活性.方法 采用VITEK微生物分析仪进行细菌鉴定,细菌药物敏感试验采用M-H培养基,用琼脂平板稀释法测定低抑菌浓度(MIC).结果 头孢硫脒对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌的MIC50、MIC90均低于头孢唑林、头孢呋辛,33株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和30株耐甲氧西林表皮葡萄球菌MIC50、MIC90范围均明显低于头孢唑林、头孢呋辛,仅低于万古霉素,头孢硫脒对粪肠球菌的抗菌活性仅弱于万古霉素,强于苯唑西林、头孢唑林、头孢呋辛、阿奇霉素、左氧氟沙星.结论 头孢硫脒对葡萄球菌属和粪肠球菌具有较强的体外抗菌活性.
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E试验法在淋球菌药物敏感性试验中的应用评价
目的 评价E试验(E-test)法检测淋球菌对5种药物敏感性的临床价值.方法 对2014年深圳市淋球菌耐药监测项目收集的100株该地区淋球菌临床分离株,分别采用琼脂稀释法、E-test以及纸片扩散法(K-B法)进行头孢曲松、青霉素、大观霉素、环丙沙星以及阿奇霉素药敏试验,以琼脂稀释法结果作为标准,评价E-test与琼脂稀释法结果的一致率,比较E-test与K-B法的误差率及相关性.结果 E-test与琼脂稀释法测得的100株淋球菌对五种抗生素的50％小抑菌浓度MIC50、MIC90以及MIC值范围大多完全相同或仅相差0.5～1.5个稀释度,两种方法具有较高的基本一致率(72％～98％),其中一致率高的是环丙沙星(98％),其次是阿奇霉素(92％),一致率低的是青霉素(72％).除青霉素E-test误差率(22％)高于K-B法(12％)外,其余四种抗生素E-test的误差率均低于K-B法,且与琼脂稀释法的相关性高于K-B法.结论 环丙沙星和阿奇霉素的E-test可以作为琼脂稀释法的替代方法应用于临床,头孢曲松和大观霉素的E-test可能导致结果偏低,而青霉素由于同时具有较低的一致率和较高的误差率,则不适宜采用.
