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矽肺合并肺部感染病人痰中109株肺炎克雷伯菌的药敏分析
资料与方法2008年3月～2009年12月矽肺合并肺部感染病人痰中肺炎克雷伯菌109株,所有菌株经ViTEK-AMS全自动分析仪鉴定.方法和材料:采用K-B法纸片扩散法进行试验,采用纸片确证试验进行ESBLs的检测,按美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS-2007)标准判读结果.标准菌株为肺炎克雷伯菌ATCC700603.
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金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药基因研究
目的 研究金黄色葡萄球菌的临床分布情况及耐药基因检出情况,为菌株感染的防治提供指导. 方法 收集835例2015年医院不同科室的住院患者送检标本,将患者送检标本进行金黄色葡萄球菌培养及分离纯化,采用细菌鉴定仪进行菌株鉴定,采用纸片扩散法分析金黄色葡萄球菌的药敏情况,并采用PCR检测耐药基因. 结果 从835例住院患者的临床标本中共分离金黄色葡萄球菌174株,其来源分别为脓液47株,分离率25.54％(47/184);痰液33株分离率21.43％(33/154);血液28株,分离率20.90％(28/134);分泌物21株,分离率18.58％(21/113);尿液19株,分离率19.19％(19/99);引流液12株,分离率16.67％(12/72);以及其他标本来源14株,分离率17.72％(14/79),各标本间金黄色葡萄球菌分离率差异无统计学意义(x2 =4.231,P=0.645).174株金黄色葡萄球菌对阿米卡星、苯唑西林、四环素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、替考拉宁、克林霉素、利福平和庆大霉素的耐药率分别为14.94％、39.08％、37.93％、59.20％、0.00％、31.03％、0.00％、47.70％、17.82％和45.98％.174株金黄色葡萄球菌mecA、qacA、ermA、ermB、er-mC、aac(6')/aph(2')等耐药基因的阳性检出率分别为21.26％、10.92％、16.09％、35.06％、29.89％和43.10％. 结论 金黄色葡萄球菌广泛分布于医院感染患者脓液标本中,且在抗感染治疗中可以优先考虑使用万古霉素和替考拉宁,但是仍应合理选用;为控制菌株耐药性发生及发展,应及时检测耐药基因携带情况.
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慢性鼻窦炎患者金黄色葡萄球菌耐药性分析
目的 了解慢性鼻窦炎患者分离的金黄色葡萄球菌耐药情况. 方法 收集慢性鼻窦炎患者标本,进行金黄色葡萄球菌培养及分离纯化,表征患者病灶部位及菌株,K-B法分析其耐药性,PCR检测耐药基因. 结果 金黄色葡萄球菌是引发慢性鼻窦炎患者发生感染的原因及主要病原菌.药敏试验显示金黄色葡萄球菌对阿米卡星、苯唑西林、四环素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、替考拉宁、克林霉素、利福平、庆大霉素的耐药率、中介率及敏感率分别为14.94％、39.08％、37.93％、59.20％、0.00％、31.03％、0.00％、47.70％、17.82％、45.98％,10.92％、0.00％、5.17％、1.72％、0.00％、2.87％、0.00％、9.20％o、0.00％、6.90％和74.14％、60.92％、56.90％、39.08％、100.00％、66.09％、100.00％、43.10％、82.18％、47.13％.PCR扩增ermA、ermC、qacA、ermB、aac(6')/aph(2")、mecA基因大小分别为421、572、629、359、220和162 bp,且其基因检出率分别为21.26％、10.92％、16.09％、35.06％、29.89％、43.10％. 结论 金黄色葡萄球菌是引发慢性鼻窦炎患者感染的主要病原菌,药敏试验显示其对万古霉素和替考拉宁敏感.
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尿路感染分离金黄色葡萄球菌的耐药性研究
目的 研究金黄色葡萄球菌的耐药情况及耐药基因检出情况,为菌株感染的防治提供指导.方法 收集尿路感染者送检标本,进行金黄色葡萄球菌培养及分离纯化,鉴定菌株,并采用PCR检测耐药基因.结果 共分离金黄色葡萄球菌174株,K-B法测定金黄色葡萄球菌对阿米卡星、苯唑西林、四环素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、替考拉宁、克林霉素、利福平、庆大霉素的耐药率分别为14.94％、39.08％、37.93％、59.20％、0、31.03％、0、47.70％、17.82％和45.98％,中介率分别为10.92％、0、5.17％、1.72％、0、2.87％、0、9.20％、0和6.90％,敏感率分别为74.14％、60.92％、56.90％、39.08％、100.00％、66.09％、100.00％、43.10％、82.18％和47.13％.PCR扩增金黄色葡萄球菌ermA基因为421 bp、ermC基因为572 bp、qacA基因为629 bp、ermB基因为359 bp、aac(6')/aph(20基因为220 bp、mecA基因为162bp,检出率分别为21.26％、10.92％、16.09％、35.06％、29.89％和43.10％.结论 分离自尿路感染者尿液的金黄色葡萄球菌对常用抗生素有一定耐药性,在抗感染治疗中可优先考虑使用万古霉素和替考拉宁,但仍应合理选用.为控制菌株耐药性发生及发展,应及时分析菌株耐药基因分布情况.
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消化内科患者感染粪肠球菌毒力基因检测及其耐药性分析
目的 检测消化内科患者感染的粪肠球菌毒力基因,分析其耐药情况,为粪肠球菌感染患者的临床治疗及药物合理使用提供指导.方法 收集河南地区消化内科患者血液、痰液、及尿液标本,分离非重复的粪肠球菌,并使用全自动细菌鉴定仪进行鉴定;制备细菌DNA模板并设计引物、PCR扩增粪肠球菌毒力基因;采用K-B法测定粪肠球菌对常用抗生素的耐药性.结果 PCR扩增河南地区消化内科患者感染的粪肠球菌分离株8种毒力基因cylA、cylB、efaA、cylL1、esp、gelE、cylM和ace,大小分别为327、843、742、624、180、933、1 200、335 bp,与理论值相符.粪肠球菌临床分离株8种毒力基因的分布情况各不相同,cylA、cylB、cylM、cylL1、efaA、esp、gelE和ace基因阳性率分别为56.33％、45.77％、48.59％、53.52％、69.72％、57.04％、65.49％、15.49％;药敏试验显示,粪肠球菌临床分离株对替考拉宁未产生耐药性,对红霉素、四环素、庆大霉素、环丙沙星、氨苄西林、呋喃妥因、万古霉素的耐药率分别为81.69％、78.17％、74.65％、53.52％、41.55％、18.31％和7.04％.结论 河南地区消化内科患者感染粪球菌8种毒力基因携带率为15.49％～69.72％,细菌对替考拉宁敏感,对红霉素等其他常用抗生素均有不同程度耐药,可供临床治疗时参考.
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头孢哌酮/舒巴坦对ICU常见革兰阴性杆菌抗菌活性的研究
目的 了解头孢哌酮/舒巴坦对临床常见革兰阴性杆菌的抗菌活件,比较不同浓度的头孢哌酮/舒巴坦纸片药敏试验结果的差异.方法 分离自浙江大学医学院附属第二医院、浙江省人民医院、杭州市第三人民医院和杭州市中医院的临床常见381株革兰阴性杆菌用头孢哌酮/舒巴坦含量75/75(150)和头孢哌酮/舒巴坦含量75/30(105)的药敏纸片进行K-B法药敏试验,同时用标准的琼脂稀释法检测头孢哌酮/舒巴坦的低抑菌浓度(MIC),并采用WHONET 5.4软什和SPSS统计软件对实验结果进行分析.结果 头孢哌酮/舒巴坦105浓度和150浓度纸片法检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,两种浓度纸片的符合率分别为:26.3%,79.2%,83.7%和33%,用SPSS 10.0统计k-related samples检验,P＜0.05;105浓度纸片法和琼脂稀释法针对以上4种菌的比对符合率分别为77.8%,89.6%,70.9%和77%;150浓度纸片法和琼脂稀释法的比对符合率分别为:27.3%,79.2%,61.6%和30%,两种浓度纸片法和稀释法的误差率比较,150纸片的假敏感和假中介要高于105纸片.结论 105浓度纸片法的结果更接近于作为金标准的稀释法,而目前临床药敏实验使用的150浓度的纸片法提高了细菌的敏感性.
关键词： 头孢哌酮/舒巴坦 105纸片/150纸片 K-B法 琼脂稀释法 革兰阴性杆菌 -
快速K-B法细菌药物敏感试验抑菌环直径改变规律及对判断结果的影响
目的 探讨快速K-B法细菌药物敏感试验(antibiotic susceptibility test,AST)抑菌环直径改变的规律以及对判断结果的影响.方法 收集我院2013年1月-2014年9月分离自门诊和住院患者的菌株865株,其中金黄色葡萄球菌109株,其他葡萄球菌218株,大肠埃希菌139株,其他肠杆菌302株,铜绿假单胞菌26株,其他非发酵菌71株.采用快速K-B法进行AST,菌株的菌龄分别为≤48 h,72 h,96 h及≥120 h,于进行AST后2h,2.5 h,3h,3.5 h和4h测量抑菌环改变情况,并进行统计学分析.结果 6类细菌的抑菌环直径改变率差异无统计学意义(P＞ 0.05);相同菌龄的不同菌种抑菌环直径改变率差异均无统计学意义(P均＞ 0.05).相同菌种不同菌龄的菌株抑菌环直径改变率差异均有统计学意义(P均＜ 0.05),不同菌种相同观测时间的抑菌环直径改变率差异均无统计学意义(P均＞0.05).同一菌种不同观测时间的抑菌环直径改变率差异均有统计学意义(P均＜ 0.05).不同菌种的抑菌环直径改变率在相同观测时间的分布差异均无统计学意义(P均＞ 0.05);而同一菌种的抑菌环直径改变率在各观测时间的分布差异均有统计学意义(P均＜ 0.05).结论 细菌抑菌环直径的改变率与菌种无关,与菌龄相关,抑菌环直径改变对AST判断结果基本无影响.
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多重耐药鲍曼不动杆菌耐药情况及其携带耐消毒剂基因的研究
目的 了解多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药情况及携带耐消毒剂基因情况. 方法 收集2014年1月-2015年2月山西省两所三级甲等医院50株多重耐药鲍曼不动杆菌, 采用K-B法检测抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测耐消毒剂基因qacEΔ1. 结果 50株多重耐药鲍曼不动杆菌主要见于神经外科、ICU、呼吸内科,分别为15株(30.0%)、10株(20.0%)、9株(18.0%). 其中痰标本34株(68.0%)、创面分泌物标本2株(4.0%)、血标本2株(4%)、尿液标本5株(10.0%)、引流物标本2株(4.0%)、神经外科患者病床栏杆表面标本5株(10.0%). 50株多重耐药鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦的耐药率为96.0%(48/50)、 左氧氟沙星为70.0%(35/50)、 头孢他啶为100.0%(50/50)、头孢哌酮/舒巴坦为100.0%(50/50)、亚胺培南为98.0%(49/50). 50株多重耐药鲍曼不动杆菌中,有21株携带耐消毒剂基因qacEΔ1,阳性率为42.0%. 结论 多重耐药鲍曼不动杆菌耐药情况十分严重,并且携带有耐消毒剂基因qacEΔ1. 因此,应严格规范使用抗菌药物,并采取相应的措施预防多重耐药鲍曼不动杆菌在医院环境中流行爆发.
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鲍曼不动杆菌对阿米卡星药敏试验误差分析
目的：探讨应用VITEK-2 Compact全自动生化分析仪检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星的药敏结果误差分析。方法收集我院2014年1月-2014年2月分离自临床各科室的115株鲍曼不动杆菌，分别采用VITEK-2法、琼脂二倍稀释法和Kirby-Bauer纸片扩散法（K-B法）对其进行阿米卡星的药敏试验，分析其耐药情况。并以琼脂二倍稀释法为参比方法，分析VITEK-2法及K-B法检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星的药敏试验结果误差。结果115株鲍曼不动杆菌中，临床科室分布以ICU（39．1％）和呼吸内科（32．2％）为主，标本类型以痰标本（84．3％）为主，患者年龄以50岁以上老年人（83．5％）为主。琼脂二倍稀释法检测鲍曼不动杆菌对阿米卡星的耐药率为62．6％（72/115），中介率为0．0％（0/115），敏感率为37．4％（43/115）。以琼脂二倍稀释法为参比方法，K-B法检测药敏结果与其完全一致，标准符合率为100．0％；VITEK-2法检测药敏结果标准符合率为62．6％，存在严重错误和微小错误，其中严重错误率高达36．5％，微小错误率为0．9％。结论 VITEK-2法应用于鲍曼不动杆菌对阿米卡星的药敏检测时，存在不同程度的误差，建议辅以琼脂二倍稀释法或K-B法进行结果确证。
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头孢哌酮/舒巴坦对临床常见革兰阴性杆菌抗菌活性的研究
目的 了解头孢哌酮/舒巴坦对临床常见革兰阴性杆菌的抗菌活性,比较不同浓度的头孢哌酮/舒巴坦纸片药敏试验结果的差异.方法 用头孢哌酮/舒巴坦含量75/75(150)和75/30(105)两种药敏纸片对临床分离的216株革兰阴性杆菌,进行K-B法检测同时用琼脂稀释法检测头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)的低抑菌浓度(MIC),并采用SPSS统计软件对实验结果进行分析.结果 头孢哌酮/舒巴坦105浓度和150浓度纸片法检测鲍氏不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽窄食单胞菌和铜绿假单胞菌,两种浓度纸片的符合率分别为30.8％,75.5％,89.4％,90.0％和79.4％;其中符合率差的是鲍氏不动杆菌,150浓度纸片的敏感率和中介率均增加,耐药率下降,与105浓度纸片比较差异均有统计学意义(P＜0.05);对2组抑菌环直径进行配对t检验,差异主要来自于鲍氏不动杆菌(P＜0.05).结论 目前临床药敏实验使用的150浓度的纸片法提高了细菌的敏感性,特别是鲍氏不动杆菌的敏感性.
关键词： 头孢哌酮/舒巴坦 105纸片/150纸片 K-B法 琼脂稀释法 抗菌活性 -
淋病流行株耐药性及耐药基因的定位分析
目的了解淋病流行株的耐药性,并对其耐药基因进行定位分析.方法 2000～2001年从广东省湛江地区分离到98株淋病流行株,采用K-B法测定淋球菌对10种抗生素的敏感性,应用碱裂解法提取相应菌株的质粒,选择NG4、NG31、NG43、NG70菌株作质粒的接合及消除试验,对耐药基因进行定位.结果 98株淋病流行株对环丙沙星、四环素、氯霉素耐药率分别为82.65%、69.39%、50.00%;质粒总检出率为91.84%,42.5kb、39.5kb、7.4kb、4.2kb质粒分别占11.22%、41.82%、59.16%、67.32%.NG31、NG43能通过接合将对四环素和氯霉素的耐药性传递给受体菌,而通过质粒消除又可恢复对抗生素的敏感性;环丙沙星的耐药性通过接合及消除未见改变.结论湛江地区淋病流行株耐药形势严峻,耐药基因定位显示,淋球菌对四环素和氯霉素的耐药由质粒介导,对环丙沙星的耐药则由染色体介导.
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大蒜提取物抑菌活性的研究
目的 研究大蒜提取物的抑茵活性.方法 用K-B法进行体外抑茵活性的研究.结果 大蒜提取物对金黄色葡萄球茵和大肠埃希葛有抑茵环形成;但对绿脓杆茵未形成抑茵环.结论 大蒜提取物有一定的抑茵活性.
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重症监护病人感染不动杆菌对13种抗菌药物耐药性分析
目的了解重症监护病人感染不动杆菌耐药性,为急危重症病人感染该菌,合理使用抗菌药物提供依据.方法采用国际推荐的K-B法测定本院重症监护病人分离的79株鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的抑菌环直径.结果本菌对亚胺培南、丁胺卡那霉素、妥布霉素、环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、头孢噻甲羧肟、庆大霉素、复方新诺明、哌拉西林、头孢哌酮、头孢噻肟、氨曲南、氯霉素耐药性依次增强.大多数抗菌药物耐药性较以往文献报道普通病房标本明显上升.结论重症监护病人鲍曼不动杆菌较有效的抗菌药物依次为:亚胺培南、丁胺卡那霉素、妥布霉素、环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、头孢噻甲羧肟;重症监护病人感染鲍曼不动杆菌具更强耐药性;为延缓细菌耐药性产生审慎使用抗菌药物,减少重症监护病人院内感染该菌的机会.
关键词： 重症监护病房(ICU) 鲍曼不动杆菌 K-B法 -
白色念珠菌拮抗菌株的筛选
目的筛选对白色念珠菌具有明显拮抗作用的菌株.方法通过纸片琼脂扩散法(K-B法)观察各菌株对白色念珠菌的拮抗作用;再利用试管法观察有拮抗作用菌株对白色念珠菌的抑菌效果.结果 K-B法表明大肠埃希菌、甲型链球菌和卡他球菌对白色念珠菌无抑菌作用,表皮葡萄球菌、微球菌有抑菌作用,但抑菌环小;枯草杆菌有明显抑菌作用.试管法表明表皮葡萄球菌和枯草杆菌对白色念珠菌均有生物拮抗作用,其抑菌率分别为97%和89.7%.结论枯草杆菌是白色念珠菌的理想拮抗菌株.
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耐甲氧西林葡萄球菌的药敏试验结果分析
目的参照NCCLS文件,了解耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的药敏试验情况.方法对114株葡萄球菌用琼脂筛选法筛选出MRS,然后用K-B法对筛选出的MRS作体外抗生素敏感试验.结果 MRS体外抗生素敏感试验显示为多重耐药;万古霉素耐药率为0%;利福平、呋喃妥因对治疗MRS亦有较好疗效;β-内酰胺类耐药率100%;氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类均呈不同程度耐药.结论在常规工作中必须遵循NCCLS的规定,对范围很广的β-内酰胺类抗生素,葡萄球菌属的细菌只要测试青霉素和苯唑西林药敏即可.
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3600株凝固酶阴性葡萄球菌的耐药分析
目的 探讨前后两个时期的菌种分布及耐药性对比.方法 普通培养法及纸片扩散K-B法.结果 表皮葡萄球菌的分离率仍居首位,溶血葡萄球菌和模仿葡萄球菌所占比例有所提高,CNS除对万占霉素敏感率为100%外,对其他抗生素的耐药性有较大提升.结论CNS的耐约性如果呈多重耐药,临床可将糖肽类抗生素作为首选.
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2-羧甲氧基苯甲醛苯甲酰腙及其配合物抑菌活性的构效关系
目的:研究2-羧甲氧基苯甲醛苯甲酰腙及其配合物的抑菌活性.方法:合成配体2-羧甲氧基苯甲醛苯甲酰腙及其配合物,采用K-B法检测其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌的生长抑制作用.结果:配体2-羧甲氧基苯甲醛苯甲酰腙仅抑制金黄色葡萄球菌的生长,其配合物能抑制金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌的生长,形成抑菌环,尤其Cu配合物形成抑菌环直径大.结论:2-羧甲氧基苯甲醛苯甲酰腙与金属、稀土形成的配合物均有一定的抑菌作用,Cu配合物抑菌活性强.
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K-B法与MIC法在鼠伤寒沙门菌药物敏感性检测中的应用比较
目的 评价纸片法(K-B法)应用于鼠伤寒沙门菌对氨苄西林、四环素、氯霉素、复方新诺明、头孢噻肟、环丙沙星及萘啶酸药物敏感性判定的可行性.方法 对分离于临床腹泻患者及健康体检者鼠伤寒沙门菌株共83株,分别使用K-B法及肉汤稀释法(MIC法)进行7种药物敏感性试验,比较两种检测方法结果的一致性.结果 K-B法检测鼠伤寒菌对氨苄西林、四环素、氯霉素、复方新诺明、头孢噻肟、环丙沙星及萘啶酸敏感性的检出率分别为21.69％、14.46％、69.88％、72.29％、86.75％、86.75％及67.47％;MIC法对上述7种药物敏感性的检出率分别为20.48％、14.46％、69.88％、74.70％、86.75％、62.65％及71.08％.K-B法和MIC法检测结果的一致性表明除环丙沙星一致性较差外(P＜0.01,Kappa=0.278),其余6种药都具有很好的一致性(P＜0.01,Kappa＞0.900).结论 K-B法和MIC法检测鼠伤寒菌敏感性结果除环丙沙星外,其余药物均具有很好的一致性.
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替加环素对常见非发酵革兰阴性杆菌的体外抗菌活性
目的:通过研究替加环素对常见非发酵革兰阴性杆菌的体外抗菌活性,为替加环素是否可用于治疗常见非发酵革兰阴性杆菌引起的临床感染提供依据.方法:对临床分离并鉴定的300例常见非发酵革兰阴性杆菌进行替加环素的纸片扩散法(K-B法)药敏试验.结果:100株铜绿假单胞菌、100株乙酸钙-鲍曼不动杆菌、50株洋葱伯克霍尔德菌、50株嗜麦芽寡养单胞菌对替加环素的K-B法抑菌圈直径范围分别为6mM-8mm、7mM-29mM、7mm-26mm、8mm-25MM;平均抑菌圈直径分别为6mm、16mM、16mm、20mm;敏感率分别为0%、57%、66%、86%.结论:替加环素对乙酸钙-鲍曼不动杆菌、嗜麦芽寡养单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌体外有一定的抗菌活性,临床可根据微生物实验室检测结果与本地区用药特点进行治疗;对铜绿假单胞菌无抗菌活性,故不可用于治疗铜绿假单胞菌引起的感染.
关键词： 替加环素 常见非发酵革兰阴性杆菌 K-B法 -
替加环素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性
目的:通过研究替加环素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性,为临床治疗、控制感染提供依据.方法:对临床分离并鉴定的100株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行替加环素的纸片扩散法(K-B法)药敏试验.结果:100株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌圈均>19 mm,对替加环素均为敏感.结论:替加环素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果,临床可根据微生物实验室检测结果与本地区用药特点相结合,控制剂量,将替加环素合理应用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床感染.
关键词： 替加环素 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 K-B法
