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含氯消毒剂对耐药结核分枝杆菌的杀灭效果及耐消毒剂基因检测
目的 观察含氯消毒剂对耐药结核分枝杆菌的杀灭效果,检测其耐消毒剂基因.方法 采用悬液定量杀菌试验和基因扩增法,对该含氯消毒剂杀灭结核分枝杆菌的效果进行了观察和基因检测.结果 用含有效氯1 000mg/L的含氯消毒剂作用10 min,对悬液内结核分枝杆菌标准株H37Rv杀灭对数值＞4.00;杀灭标准株H37Ra需有效氯2 000 mg/L的消毒液.用有效氯1 000 mg/L的该消毒液作用2.5 min,对结核分枝杆菌多重耐药株a和c杀灭对数值均＞4.00;杀灭多重耐药株d需要作用5 min,杀灭多重耐药株b需要作用10 min.从结核分枝杆菌标准菌株H37Rv和多重耐药菌株a与b中检出qacE△1-sulI基因,其他株未检出.所有试验菌株均未检出qacA/B基因.结论 含氯消毒剂对结核杆菌标准株和多重耐药株均有良好杀菌作用.6株菌中qacE△1-sulI基因结果3株阳性、3株阴性,而qacA/B基因均未检测到.
关键词： 含氯消毒剂 结核分枝杆菌标准菌株 多重耐药结核分枝杆菌 杀灭效果 耐消毒剂基因 -
血流感染人葡萄球菌及其耐消毒剂基因检测
目的 了解医院住院患者血流感染人葡萄球菌临床特点及其耐消毒剂基因携带情况.方法 采用回顾性分析方法和基因检测技术,对河北医科大学第二医院住院患者血标本中分离人葡萄球菌及其抗消毒剂基因进行调查与检测.结果 连续3年,该医院从患者送检的血标本中共检出病原菌2 897株,其中检出人葡萄球菌596株,占检出病原菌总数的20.57％,标本主要来自各科室重症监护室和呼吸科.所检出的耐甲氧西林人葡萄球菌对抗菌药物耐药率显著高于甲氧西林敏感菌株.从93株血流感染人葡萄球菌中检出32株携带耐消毒剂基因qacA/B,检出率为34.4％.结论 该医院住院患者送检血标本中人葡萄球菌检出率高,严重耐药和抗消毒剂基因检出率均较高.
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186株革兰阴性菌耐消毒剂基因携带情况及抗药性观察
目的 研究临床分离的革兰阴性杆菌耐消毒剂基因及抗药性.方法 用基因扩增技术和药敏试验方法,对临床分离的革兰阴性菌携带qacEA1 - sul1基因与耐药性进行了检测.结果 分离自浙江省部分医院环境和病人感染标本的186株革兰阴性杆菌中,有81株携带qacEA1 - sul1基因,携带率为45.5％;其中鲍曼不动杆菌的携带率为70.0％.这些菌株对氨苄西林等19种临床常用抗菌药物耐药率均达60％以上,对美罗培南和阿米卡星耐药率分别为48.39％和30.65％.结论 临床分离的革兰阴性菌耐消毒剂基因携带率较高,对临床常用抗菌药物普遍耐药.
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大肠杆菌耐消毒剂基因检测与消毒剂抗性研究
目的 研究临床分离的多重耐药大肠杆菌耐消毒剂基因携带状况及其对消毒剂抗性水平.方法 采用聚合酶链反应(PCR)法和体外抗菌试验方法进行实验室检测.结果 在检测的8株临床分离的大肠杆菌中,检出3株携带qacE△1基因,检出率37.5％.含氯消毒剂对3株qacE△1基因阳性大肠杆菌的MIC值均高于标准菌株.碘伏消毒剂和戊二醛消毒剂只对1株qacE△1基因阳性大肠杆菌的MIC值高于标准菌株,其他均与标准株相同.结论 临床分离的多重耐药大肠杆菌qacE△1基因阳性率较高,携带qacE△1基因阳性的大肠杆菌对含氯消毒剂有产生抗性的倾向.
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携带qacE△1基因的铜绿假单胞菌对消毒剂抗力的观察
目的 研究广东地区医院临床分离铜绿假单胞菌携带qacE△1基因的情况及qacE△1携带菌株对消毒剂抗力.方法 采用定量杀菌试验和基因扩增法,对广东省部分医院临床分离铜绿假单胞菌进行实验室研究.结果 从30株临床分离的铜绿假单胞菌中检出26株携带qacE△1基因,阳性率为86.67％.经有效碘浓度为200 mg/L的碘伏消毒液作用7 min,qacE△1基因阳性菌株存活率为7.7％;qacE△1基因阴性菌株存活率为0.0％.经浓度为300 mg/L苯扎氯铵作用7 min,qacE△1阳性菌株存活率为11.5％;qacE△1基因阴性菌株存活率为6.7％.经500 mg/L有效氯消毒液作用10 min,qacE△1阳性菌株存活率为19.2％;qacE△1基因阴性菌株存活率为10.0％.结论 广东地区医院临床分离的铜绿假单胞菌耐消毒剂基因携带率较高,qacE△1基因阳性的铜绿假单胞菌对所试验的3种消毒剂的抗力稍高于qacE△1基因阴性的菌株.
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金黄色葡萄球菌耐药基因与耐消毒剂基因的检测与分析
目的 分析金黄色葡萄球菌临床分离株的耐药谱及耐药基因与耐消毒剂基因的检出情况.方法 采用纸片扩散法测定42株金黄色葡萄球菌对16种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应技术对β-内酰胺酶类耐药基因(blaZ)、甲氧西林耐药基因(mecA)、氟喹诺酮类耐药基因(norA)及耐消毒剂基因(smr、qacA/B、qacG、qacH)进行检测和分析.结果 共检出28株(66.7％)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和14株(33.3％)甲氧西林敏感葡萄球菌(MSSA),所有菌株对青霉素类、氟喹诺酮类和大环内酯类抗菌药物的耐药率较高,仅对呋喃妥因、奎奴普汀和万古霉素敏感100％.菌株耐药基因及耐消毒剂基因的总检出率分别为mecA 73.8％、blaZ 69.0％、norA59.5％、smr 2.4％、qacA/B 4.8％,qacG和qacH均未检出.MRSA的耐药基因携带率均高于MSSA,差异有统计学意义(P＜0.05),耐消毒剂基因携带率无统计学差异.结论 金黄色葡萄球菌耐药现状严重,耐药基因携带率较高,且部分菌株同时携带耐药基因和耐消毒剂基因,应引起临床重视.
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临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药表型及耐消毒剂基因检测
目的：研究医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( MRSA)的耐药表型和消毒剂抗性基因携带情况,为加强MRSA感染防控提供理论依据。方法采用细菌分离培养方法和PCR技术,对徐州地区医院住院患者送检病原学标本分离的MRSA耐药表型和抗消毒剂基因携带情况进行检测。结果从临床标本分离的280株金黄色葡萄球菌中共鉴定出MRSA 157株,占检出金黄色葡萄球菌的56.1%。临床分离MRSA仅对万古霉素、奎奴普丁/达福普汀和利奈唑胺敏感,对其他所试验的抗菌药物普遍耐药。 MRSA菌株中有28.0%携带抗消毒剂基因qacA/B,MSSA菌株中携带qacA/B基因仅占7.3%。结论该地区医院患者感染的金黄色葡萄球菌中MRSA检出率较高,其MRSA菌株携带抗消毒剂基因比例明显高于敏感株,且普遍耐药,应加强MRSA监测和控制。
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药表型 耐消毒剂基因 -
耐消毒剂基因检测real time PCR方法的建立和评价
目的 建立一种耐消毒剂基因检测方法,并对其实际应用效果进行评价.方法 采用基因扩增方法,以qacC基因序列合成一条MGB探针,并对其特异性和灵敏度进行评价.结果 用本研究建立的real time PCR方法对64株临床分离的金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因进行检测证明,qacC基因携带率为15.6％.所合成的qacC探针对qacC基因扩增良好,对qacA/B等其他基因无扩增,检测下限为10拷贝.结论 本研究所建立的real time PCR方法对qacC基因检测具有灵敏、特异性、通量高、耗时短,具有实用价值.
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鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因qacE△1-sulI的研究
目的 研究临床分离鲍曼不动杆菌耐消毒剂qacE△1-sulI携带情况,探讨其传播机理.方法 采用聚合酶链反应(PCR)分析方法,对某医院临床分离鲍曼不动杆菌携带qacE△1-sulI基因状况进行分析.结果 从临床分离的92株鲍曼不动杆菌中,检出84株质粒上携带qacE△1-sulI基因,阳性率为91.3％.质粒接合实验结果显示,84株耐消毒剂基因阳性菌株中,有56株菌质粒为可接合质粒,其质粒均存在qacE△1-sulI基因.结论 临床分离的鲍曼不动杆菌耐消毒剂基因携带率高,其质粒上携带可接合传递的qacE△1-sulI基因,提示耐消毒剂基因可通过质粒传播.
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消化科住院患者医院感染鲍曼不动杆菌外排泵系统机制研究及耐消毒剂基因检测分析
目的 分析消化科患者感染鲍曼不动杆菌的外排泵系统机制及耐消毒剂基因分布情况,为患者的临床治疗及细菌耐药性发展的控制提供指导.方法 分离自消化内科患者临床标本的鲍曼不动杆菌132株,采用K-B法进行耐药性分析.纯培养后挑取单菌落,加入到含有蛋白酶K溶液的离心管中,经水浴后离心,以设计的引物PCR扩增目的基因片段,观察耐药基因携带情况.结果 132株鲍曼不动杆菌中分离自痰液占71.97％、伤口分泌物占12.88％、脓液占6.82％、尿液占3.03％、其他标本占5.30％.K-B法测定132株鲍曼不动杆菌对阿米卡星、链霉素、庆大霉素、米诺环素、头孢吡肟、头孢噻肟、亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为11.36％、55.30％、42.42％、34.85％、53.79％、61.36％、5.30％和10.61％.PCR检测鲍曼不动杆菌分离株的adeB基因大小为541 bp,adeJ基因为453 bp,abeM基因为781bp,adeR基因为447 bp,adeS基因为544 bp,检出率分别为38.64％、79.55％、40.91％、32.58％和51.52％;PCR检测鲍曼不动杆菌的耐消毒剂基因qacE/△1基因大小为300 bp,检出率为53.03％.结论 消化内科患者感染的鲍曼不动杆菌对常用治疗药物均产生了一定程度的耐药性,这可能与菌株的外排泵系统基因及耐消毒剂基因携带率较高有一定关系.因此,及时进行细菌病原学及耐药性监测对于患者疾病治疗及控制细菌耐药性发展具有重要意义.
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西藏自治区鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌耐药及耐消毒剂基因的研究
目的 调查西藏自治区鼠疫自然疫源地是否存在耐药及耐消毒剂的鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)菌株,为鼠疫的临床治疗提供准确信息.方法 根据美国国立生物技术信息中心公布的耐氨基糖苷类链霉素StrA和StrB基因,耐β-内酰胺类抗菌药物TEM、SHV和CTX-M基因,耐磺胺类药物Sul1、Sul2和Sul3基因序列,耐消毒剂耐药QacEdeltal-sul1基因,分别在每个基因上设计1对引物,逐一对分离自西藏自治区鼠疫自然疫源地的鼠疫菌DNA进行PCR检测.结果 阴性对照和阳性对照成立,355株鼠疫菌的PCR检测结果均为阴性,未发现耐链霉素、耐磺胺类药物及耐β-内酰胺类抗菌药物和耐消毒剂菌株.结论 西藏自治区鼠疫自然疫源地鼠疫菌尚未出现耐药及耐消毒剂菌株.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对消毒剂和常用抗菌药物的耐药性及相关基因的研究
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aurrus,MRSA)已成为医院感染的重要病原菌,流行、暴发常有报道,同时社区获得性感染亦逐年增多.金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药是由于获得了携带mec基因的葡萄球菌盒式染色体(staphylococcal cassette chromosome mec,SCCmec),并通过SCCmec不断积累抗生素耐药基因.近年来国内外学者已从金黄色葡萄球菌中检出耐消毒剂基因的菌株[1].因此,控制MRSA特别是对常用消毒剂如季铵盐类等消毒剂耐药菌株的传播具有实际意义.为了解MRSA对季铵盐类消毒剂苯扎溴铵(新洁尔灭)、醋酸氯己定(醋酸洗必泰)和常用抗菌药物的耐药性及其相关耐药基因分布状况,我们对自临床分离的50株MRSA进行了初步研究,报告如下.
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65株大肠埃希菌耐消毒剂基因检测结果分析
在我国季铵类消毒剂(如新洁尔灭、洁尔灭、度米芬)和双胍类消毒剂(洗必泰等)广泛用于伤口消毒及外科前皮肤、黏膜准备和外科医生手消毒.近年来,又广泛用于养殖业和日常生活.这种消毒剂的过度使用是促进细菌产生耐消毒剂的一个诱因.
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40株MRSA菌消毒剂及抗菌药物耐药基因研究
近年国外学者从金黄色葡萄球菌中检出耐消毒剂的菌株.为了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐消毒剂和抗菌药物耐药基因状况,我们收集了2003年12月～2004年5月苏州大学医学院附属第三医院分离到的20株MRSA菌和解放军98医院分离到的20株MRSA菌,共40株.对其进行了耐消毒剂基因(qacA)和β内酰胺类耐药相关基因(mecA、TEM)、氨基糖苷类耐药相关基因[aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、ant(6)-Ⅰ]、四环素耐药相关基因(tetM)、红霉素耐药相关基因(erm)、万古霉素耐药相关基因(vanA、vanB)等12种主要耐药基因检测.
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鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌qacEΔ1基因检测及消毒剂抗性研究
目的：研究临床分离鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌携带qacEΔ1耐消毒剂基因及对3种常用消毒剂抗性情况。方法选择我院2012年1月至2014年12月临床分离的鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌各30株，采用PCR法检测所有菌株携带qacEΔ1耐消毒剂基因情况，采用定量杀菌试验检测qacEΔ1基因阳性菌株对3种临床常用消毒剂抗性的变化，对检测结果进行统计学分析。结果在30株鲍曼不动杆菌中，有22株携带qacEΔ1基因，阳性率为73.3％（22／30）。在30株铜绿假单胞菌中，有18株携带qacEΔ1基因，阳性率为60.0％（18／30）。标准菌株大肠埃希菌ATCC 25922和铜绿假单胞菌ATCC 27853的qacEΔ1基因检测均为阴性。有效碘、有效氯及快速手消毒剂对鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌及质控菌株的灭菌率均随时间和剂量的提高而提高，呈现明显的量-效关系和时-效关系。在灭菌1 min时，除300 mg／L有效碘对鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌qacEΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于基因阴性菌株，且差异均有统计学意义（P均＜0.05）外，其他浓度下有效碘对鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌qacEΔ1基因阳性菌株与阴性菌株灭菌率差异均无统计学意义（P均＞0.05）。其他作用时间下不同浓度有效碘对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌qacEΔ1基因阳性菌株的灭菌率均低于qacEΔ1基因阴性菌株，且差异均有统计学意义（P均＜0.05）。不同浓度的有效氯在作用5 min、7min时对鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌qacEΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于基因阴性菌株，且差异均有统计学意义（P均＜0.05）；作用1 min时，500 mg／L有效氯对鲍曼不动杆菌qacEΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于阴性菌株，且差异有统计学意义（P＜0.05），但对铜绿假单胞菌qacEΔ1基因阳性与阴性菌株灭菌率差异无统计学意义（P＞0.05）。快速手消毒剂在作用1 min、5 min和7 min时对鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌qacEΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于基因阴性菌株，且差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论我院分离的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌携带qacEΔ1耐消毒剂基因比例较高，qacEΔ1基因阳性菌株对临床常用的3种消毒剂的抗力高于阴性菌株和标准菌株。
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多重耐药鲍曼不动杆菌耐药情况及其携带耐消毒剂基因的研究
目的 了解多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药情况及携带耐消毒剂基因情况. 方法 收集2014年1月-2015年2月山西省两所三级甲等医院50株多重耐药鲍曼不动杆菌, 采用K-B法检测抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测耐消毒剂基因qacEΔ1. 结果 50株多重耐药鲍曼不动杆菌主要见于神经外科、ICU、呼吸内科,分别为15株(30.0%)、10株(20.0%)、9株(18.0%). 其中痰标本34株(68.0%)、创面分泌物标本2株(4.0%)、血标本2株(4%)、尿液标本5株(10.0%)、引流物标本2株(4.0%)、神经外科患者病床栏杆表面标本5株(10.0%). 50株多重耐药鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦的耐药率为96.0%(48/50)、 左氧氟沙星为70.0%(35/50)、 头孢他啶为100.0%(50/50)、头孢哌酮/舒巴坦为100.0%(50/50)、亚胺培南为98.0%(49/50). 50株多重耐药鲍曼不动杆菌中,有21株携带耐消毒剂基因qacEΔ1,阳性率为42.0%. 结论 多重耐药鲍曼不动杆菌耐药情况十分严重,并且携带有耐消毒剂基因qacEΔ1. 因此,应严格规范使用抗菌药物,并采取相应的措施预防多重耐药鲍曼不动杆菌在医院环境中流行爆发.
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344株葡萄球菌耐消毒剂基因gacA/B检测及耐药性分析
葡萄球菌是临床重要的致病菌群,目前已成为医院感染和社区感染的主要病原菌.同抗生素对细菌的作用一样,消毒剂的大量使用,细菌对消毒剂产生抗性亦不可避免.mecA基因检测阳性预示该类细菌对B内酰胺类药物临床无效[1],femB是金黄色葡萄球菌中高度保守序列,但在凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中不表达.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因的研究
目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行细菌耐药性分析及耐药基因和耐消毒剂基因的试验研究.方法对临床分离47株MRSA进行菌株鉴定、药敏试验和β-内酰胺类耐药相关基因(mecA),氨基糖苷类耐药相关基因[aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ、ant(4',4")],耐消毒剂基因[qac(A/B)]等主要耐药基因和耐消毒剂基因的检测.结果47株MRSA对抗菌药物氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁、红霉素、苯唑西林、青霉素均耐药,其他抗菌药物耐药率分别为克林霉素(87.0%)、庆大霉素(91.3%)、利福平(28.3%)、四环素(76.1%)、复方新诺明(65.2%)、左氧氟沙星(71.7%)、呋喃妥因(0.0)、万古霉素(0.0);47株MRSA共检出mecA基因46株,aac(6')/aph(2")基因39株,aph(3')-Ⅲ基因30株,ant(4',4")基因6株,qac(A/B)基因19株.结论MRSA为多重耐药菌,对氨基糖苷类耐药和耐消毒剂分别与携带氨基糖苷类耐药基因和耐消毒剂基因有关,临床医生应重视MRSA的诊断与治疗,加强MRSA的医院感染控制.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药基因 消毒剂 耐消毒剂基因 -
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因研究
目的 了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性及β-内酰胺类耐药相关基因和耐消毒剂基因存在情况.方法 对临床分离的56株MRSA用K-B纸片扩散法测定对青霉素等16种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应(PCR)法检测β-内酰胺类耐药相关基因(mecA)及耐消毒剂基因qac(A/B).结果 56株MRSA对万古霉素、替考拉宁均敏感,对复方新诺明、呋喃妥因、利福平、四环素、左氧氟沙星、克林霉素、阿奇霉素的耐药率分别为17.9%、23.2%、82.1%、87.5%、89.3%、92.9%、96.4%,对红霉素、庆大霉素、阿米卡星、青霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢西丁、氨苄西林均耐药;共检出mecA基因54株(96.4%),qac(A/B)基因31株(55.4%).结论 临床分离的MRSA为多药耐药菌,qac(A/B)基因携带率很高.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性 耐消毒剂基因 -
大肠埃希菌连续分离株耐药性与季胺类化合物耐药基因研究
目的 了解临床分离的大肠埃希菌耐药性和耐消毒剂基因存在状况.方法 测定临床连续分离60株大肠埃希菌对19种抗菌药物的敏感性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况.采用聚合酶链反应检测qacE△1基因.结果 60株大肠埃希菌对亚胺培南/西司他丁、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦3种抗菌药物完全敏感,对其余16种抗菌药物耐药率在5.0%～90.0%,ESBLs检出率为45.0%;qacE△1基因阳性34株(阳性率56.7%).结论 大肠埃希菌具多药耐药特征,qacE△1基因携带率高.
