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杭州市淋病奈瑟菌血清学分型研究
淋病奈瑟菌的血清型与其耐药性、血清抗性、营养分型、对免疫球蛋白A1蛋白酶的表达以及引起的淋病奈瑟菌感染类型均有密切关系.但淋病奈瑟菌的抗原结构非常复杂,与细菌表层结构有关的外膜蛋白、脂多糖和菌毛都可以作为血清学分类的基础.
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一些细菌的亚碲酸钾抗性
在临床微生物实验室,在培养基中添加亚碲酸钾,选择性地分离病原菌已有80多年的历史,如白喉杆菌、霍乱弧菌、葡萄球菌、大肠杆菌O157等.碲是自然环境中含量较低的元素,并非细菌生长的必需元素.在抗生素发现之前,曾经使用亚碲酸钾治疗麻风、肺结核、皮炎、膀胱炎及眼部感染等,但关于细菌对亚碲酸钾耐药性的机理研究较少.
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1-01 c-Ha-rasV12G基因转染细胞系促癌剂检测模型
目的建立促癌剂检测模型.方法采用电穿孔的方法,将突变的c-Ha-rasV12G基因转入人胚肺成纤维细胞WI-38及人支气管上皮细胞BEAS-2B中,将获得的G418抗性(G418r)单克隆细胞株进行DNA-DOT-Bloting及RT-PCR分析后,进一步用促癌剂佛波醇酯(PMA)处理,并选用克隆形成率(CFE)、锚着独立性生长(AIG)、血清抗性及裸鼠成瘤性等表型改变对受试细胞进行了恶性程度检测.结果 c-Ha-rasV12G基因使细胞对促癌剂的促癌敏感性增强,其中,对于WI-38G418r细胞,当PMA剂量分别为0、3.125×10-5、6.25×10-5、1.25 × 10-4、2.5×10-4及0.5×10-3mol/L时,其在含体积分数为1%FBS的1640培养基中的克隆形成率分别为7、8、11、12、15及14/200 cells,在含体积分数为10%FBS的培养基中分别为76、92、106、109、127及173/200 cells,在质量浓度为0.33%的琼脂中为47、61、70、69、80及97/1 000 cells.选取0.5×10-3 mol/L剂量组处理的G418r细胞进行裸鼠成瘤性实验,结果阳性.对照非基因转染细胞,用0.5×10-3 mol/LPMA处理后,在3种培养基中相应的克隆形成情况为3、33/200 cells,0/1 000 cells,裸鼠皮下注射部位无肿瘤生长.PMA以0、2.0×10-5、1.0×10-4、5.0×10-4、1.0×10-3及1.6×10-3 mol/L分别作用24 h,结果1.0×10-4 mol/L剂量作用使BEAS-2B G418r细胞获得了高的血清抗性及CEF,表现为在含体积分数为0.8%、0%FBS的LHC-8培养基及软琼脂中的CEF分别为190%、150%及75%(对照非基因转染细胞在不含PMA及FBS的LHC-8中CEF计为100%),对照细胞在含体积分数为0.8%FBS的培养基及软琼脂中不能生长,随着PMA处理剂量的增加,其CFE逐渐降低.结论 c-Ha-rasV12G基因可使上皮细胞BEAS-2B获得对PMA的促癌作用敏感性,其中当PMA剂量≤1.0×10-4mol/L时,可发挥促癌作用,大于该剂量则有促分化作用;上皮细胞发生恶性转化的标志之一是细胞对FBS、PMA等促分化剂的促细胞分化抗性增强.
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四川省大肠杆菌O157:H7分子流行病学、耐药性及对消毒剂抗性研究
目的研究从四川省分离的大肠杆菌O157:H7菌株流行病学特征.方法用多重PCR测定67株大肠杆菌O157:H7的slt、eaeA、hly毒力基因;对不同来源的大肠杆菌O157:H7进行质粒和PFGE分型;测定67株大肠杆菌O157:H7的耐药性和对消毒剂的抗力.结果62.7%的株茵(42/67)携带有毒力基因,毒力图谱类型主要为slt1+slt2+eaeA+hly.67株菌共有6种质粒谱型和7种PFGE谱型.64.2%(43/67)的菌株分别对7种不同的抗生素耐药,其中有23、35、34株茵分别对氨苄青霉素、四环素和SMZ耐药.不同来源的大肠杆菌O157:H7抗性谱不同,80.6%(54/67)的菌株对酒精和季铵盐产生了抗性,所有菌株对洗必泰敏感.结论四川省不同来源的大肠杆菌O157:H7带毒率相似,但毒力基因谱型不完全相同.细菌有较高的耐药性.菌株对常用消毒剂有很高的抗性,在消毒灭菌时需要用较大剂量的消毒剂才能将其杀灭.不同来源的大肠杆菌O157:H7耐药性、质粒和PFGE谱型有一定的相似性,提示茵株可能在人、动物、食品以及外环境之间相互传播并存在流行的可能.
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德国小蠊菊酯抗性与钠离子通道机制研究进展
菊酯杀虫剂长期使用会导致昆虫产生抗性, 严重影响德国小蠊等有害昆虫的治理.德国小蠊产生菊酯击倒抗性 (kdr) 与钠离子通道发生kdr突变有关.本文介绍了德国小蠊钠离子通道的跨膜分子结构、功能和基因表达调节方式, 同时讨论了钠离子通道kdr突变导致德国小蠊产生菊酯抗性的机制.理解钠离子通道kdr突变机制, 不仅为德国小蠊种群抗性监控提供有效分子靶标, 还可为新型杀虫剂研制提供思路.
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出入境货物滋生螨类硫酰氟熏蒸抗性初步调查
目的 初步调查出入境货物滋生螨类硫酰氟熏蒸抗性情况.方法 采集江苏张家港、南通、盐城、吴江、南京、常州等口岸经硫酰氟熏蒸处理后集装箱样本72份(其中装有废纸的集装箱样本42份,装有原木及木片的集装箱样本13份,其他货物集装箱样本17份),采用振筛分离法、Tullgren电热集螨法、直接镜检法对72份样本及97只箱内采获的蝇类体表携带螨类进行分离、鉴定.用平皿将实验室饲养的粉尘螨1 391只置于集装箱中用硫酰氟12 g/m3熏蒸处理24h后计算死亡率.结果 在入境货物中,共分离出螨类14种,经分类鉴定隶属7科9属;采用硫酰氟熏蒸处理现场后,粉尘螨死亡率仅为3.81％.结论 出入境货物中滋生螨类对硫酰氟产生了抗性,应加强对出入境货物滋生螨类的防治,以防虫媒传染病的国际间传播,保障人类健康.
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MRSA对6种消毒剂耐药性及相关抗性基因的比较研究
目的 观察医院分离的2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和金黄色葡萄球菌标准株(ATCC 6538)对6种消毒剂的抗性与耐药基因变化.方法 选择小抑菌浓度(MIC)试验、悬液定量杀菌试验和耐消毒剂基因PCR检测.结果 MIC检测,医院分离的2株MRSA,对6种消毒剂的MIC,明显高于标准菌株.只有醋酸氯己定对MRSA -1的MIC值与标准菌株相同.PCR检测,2株MRSA均未携带耐消毒剂基因qacA/B.定量杀菌实验,苯扎氯铵、过氧乙酸、双癸基二甲基氯化铵对MRSA -1菌株的杀灭对数值低于标准菌株；苯扎氯铵、过氧乙酸、有效氯对MRSA -2菌株的杀灭对数值低于标准株.结论 医院分离的2株MRSA对消毒剂的抗性普遍高于标准菌株,PCR检测未发现qacA/B基因.
关键词： 消毒剂 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 qacA/B 抗性 -
耐药性鲍曼不动杆菌的抗药基因检测及其对消毒剂的抗性研究
目的 了解临床分离的耐药性鲍曼不动杆菌携带抗药基因情况及其对常用消毒剂抗性水平.方法 采用基因扩增法和悬液定量杀菌试验方法,对临床分离的耐药性鲍曼不动杆菌qacE△Ⅰ-sul Ⅰ基因携带率和对3种常用消毒剂抗性变化情况进行评价.结果 临床分离的10株耐药性鲍曼不动杆菌中有9株qacE△Ⅰ-sul Ⅰ基因阳性.用浓度为250 mg/L有效氯或有效碘的消毒液,作用1min,对悬液内临床分离鲍曼不动杆菌平均杀灭率均达到99.9％以上;用浓度为250 mg/L的戊二醛消毒液作用3 min,对临床分离的鲍曼不动杆菌杀灭率为100％.结论 临床分离耐药鲍曼不动杆菌抗药基因携带率较高,但常规浓度的消毒剂均可有效杀灭,提示其对消毒剂抗性无明显变化.
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嗜肺军团菌和大肠杆菌对过氧乙酸抗性比较的试验研究
目的 通过过氧乙酸对嗜肺军团菌和大肠杆菌的定量杀灭试验,比较其对消毒剂的抗性.方法 采用悬液定量杀灭试验,比较过氧乙酸对两种细菌的杀灭效果.结果 100 mg/L过氧乙酸作用10 min,可有效杀灭悬液内大肠杆菌;20 mg/L过氧乙酸作用2.5 min,可有效杀灭悬液内嗜肺军团菌.结论 嗜肺军团菌对过氧乙酸的抗性远低于大肠杆菌,用大肠杆菌为指示菌评价过氧乙酸的消毒效果可用于对嗜肺军团菌的评价.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对碘伏抗性的研究
目的：研究临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对碘伏消毒剂的抗性变化及其抗消毒剂基因携带情况。方法采用肉汤稀释法和基因检测技术，对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗消毒剂基因携带情况及其对碘伏消毒剂抗性变化进行了观察。结果共检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌152株，其中有11株携带qacA/B基因，携带率为7.24％。碘伏消毒剂对携带qacA/B基因MRSA菌株的MIC值为100~300 mg/L范围，有4株菌的MIC值为300 mg/L。碘伏消毒剂对非携带qacA/B基因的MRSA菌株MIC值为100~200 mg/L范围。结论携带qacA/B基因的MRSA菌株对碘伏消毒剂的抗性有增大趋势，其抗性可能与qacA/B基因有关。
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 碘伏消毒剂 抗性 抗性基因 -
三种革兰阴性杆菌耐消毒剂基因检测及对苯扎溴铵抗性研究
目的 研究临床分离致病菌抗药基因情况及其对消毒剂的抗性水平.方法 采用基因扩增法和肉汤稀释法分别检测了三种21株革兰阴性杆菌的耐消毒剂基因和苯扎溴铵低抑菌浓度及低杀菌浓度.结果 临床分离的铜绿假单胞菌、大肠杆菌和鲍曼不动杆菌等21株三种革兰阴性杆菌,其中有13株携带耐消毒剂基因,携带率为61.9%.7株铜绿假单胞菌对苯扎溴铵MIC均低于标准菌株,共有7株菌的MBC高于标准菌株.结论 临床分离的三种21株革兰阴性杆菌多数携带耐消毒剂基因,有33.3%的菌株对苯扎溴铵的MBC高于标准株,提示其抗力有所增强.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对消毒剂抗性的观察
目的 了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对消毒剂的抗力水平,以指导医院消毒.方法 采用悬液定量杀菌试验方法进行检测,同时与金黄色葡萄球菌标准株作平行比较.结果 20株MRSA对戊二醛、碘伏、乙醇等三种常用消毒剂的抗性率分别为15%、15%、5%,对上述三种消毒剂中一种以上具有抗性的抗性率为25%,多重抗性率为10%.结论 MRSA存在抗消毒剂菌株,提示在医院消毒工作中要合理使用消毒剂,防止MRSA感染的传播和流行.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 消毒剂 抗性 -
氯己定乙醇与碘伏对MRSA体外抗菌活性研究
目的：观察氯己定乙醇与碘伏对医院分离的26株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ MRSA）和标准菌株金黄色葡萄球菌（ ATCC 29213）的体外抗菌活性。方法采用经典二倍稀释法，进行低抑菌浓度（ MIC）试验和低杀菌浓度（ MBC）试验。结果两种消毒剂对26株MRSA的MIC值均等于标准菌株（分别为1 mg/L醋酸氯己定乙醇、21 mg/L碘伏），两种消毒剂对其中23株MRSA的MBC值等同于MIC值。醋酸氯己定乙醇对2株MRSA的MBC值为标准菌株的31倍；碘伏对2株MRSA的MBC值为标准菌株的2倍；其中1株MRSA对醋酸氯己定乙醇的MBC值为标准菌株的31倍，同时对碘伏的MBC值为标准菌株的2倍。结论对醋酸氯己定乙醇及碘伏均产生抗性的MRSA菌株已经出现，且具有交叉耐药性。应积极探讨高效低毒消毒剂的研制与合理应用、消除细菌对消毒剂抗性的问题。
关键词： 醋酸氯己定乙醇 碘伏 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 抗性 -
葡萄球菌对消毒剂抗性的研究进展
抗菌药物的广泛使用,造成耐药菌株不断出现,致使通常有效的药物失去抗菌作用给临床治疗带来了极大困难.事实上,细菌的耐药现象已不仅仅限于抗生素,早已扩展到了消毒剂.与耐抗生素菌株一样,抗消毒剂菌株的出现可能会导致医院消毒的失败,甚至引起医院内感染的流行和传播.因此,探讨细菌对消毒剂抗性方面的研究就显得十分必要.本文就对葡萄球菌对消毒剂抗性方面的研究作以综述.
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细菌对消毒剂抗性的研究进展
关于微生物对抗生素的耐药性出现已经对抗生素的疗效提出了严峻的挑战,消毒剂与抗生素同属于具有特殊抑杀微生物作用的化学物质,它们对微生物的作用机制也有很多相同或相似之处,因此,某些微生物同样可能产生对消毒剂的耐药现象.为了能与抗生素耐药相区别,本文中将消毒剂的耐药现象称为消毒剂抗性.
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分枝杆菌抗性与消毒研究进展
全球有20亿人感染结核,我国就有5亿多.据世界卫生组织报告:现有结核病人约2000万,每年新发生约900万病人,每年死亡人数高达300万.
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社区获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对含氯消毒剂的抗性研究
目的 研究社区获得感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)对含氯消毒剂的抗性,以指导消毒剂的合理使用.方法 采用悬液定量杀菌试验和抑菌试验方法,对医院门诊患者标本分离的CA-MRSA对含氯消毒剂抗性进行观察.结果 用有效氯浓度为250 mg/L的含氯消毒剂对悬液内CA-MRSA菌株作用5 min,平均杀灭对数值为5.64,低于标准菌株.含氯消毒剂对临床分离21株CA-MRSA的MIC值在400 mg/L～700 mg/L范围,其中有10株CA-MRSA MIC值高于标准菌株.结论 CA-MRSA菌株对含氯消毒剂所需剂量较标准株有所提高,提示此类MRSA抗力较标准株强.
关键词： 社区获得感染 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌:含氯消毒剂 抗性 -
高分辨率熔解曲线分析检测家蝇kdr基因突变
目的 探讨kdr基因在家蝇溴氰菊酯抗性增加中的作用.方法 首次将高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析与半定量PCR相结合,用于分析家蝇抗性基因kdr扩增和突变情况.对扩增的PCR产物进行测序来验证HRM准确性.结果 与敏感品系家蝇相比,kdr的mRNA表达量在现场品系家蝇中没有显著改变(P＞0.05).使用HRM对kdr进行突变分析,发现所有样本均为同一基因型.经核酸测序,该扩增片段没有突变位点.结论 杭州家蝇溴氰菊酯抗性增加与kdr基因无关.
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浅谈细菌基因的水平转移
细菌--体积小、数量多、存活久的一种生物--以简单的无性二分裂方式繁殖.如果,细菌仅依靠亲代遗传的信息和点突变来适应环境,那么,细菌对抗生素产生抗性应该还是一个漫长的过程.然而,事实却是恰恰相反.
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绍兴市城区德国小蠊对5种杀虫剂敏感性测定
目前化学杀虫剂是防治德国小蠊的重要手段之一,且具有速杀特效、使用方便等优点;但一种杀虫剂长期连续使用会使小蠊对该药产生抗性,同时又污染环境,越来越引起人们的高度重视.掌握小蠊抗药性的发生及发展趋势是科学合理使用杀虫剂的依据.我们于2004年5月,采集绍兴市不同地区、不同场所的小蠊野外品系,测定对常用杀虫剂溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯菊酯、敌敌畏、残杀威的敏感性.
