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凝固酶阴性葡萄球菌菌种鉴定与苯唑西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌检测准确性
目的 评价凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)菌种鉴定与苯唑西林耐药凝固酶阴件葡萄球菌(MRCNS)检测的准确性.方法 139株临床分离CNS,经ID 32 STAPH鉴定到种,用头孢西丁(FOX)、苯唑西林(OXA)纸片扩散法检测MRCNS,以Slidex MRSA detection乳胶凝集法检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)作为参考方法.结果 139株CNS鉴定为8个种,依次为溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、木糖葡萄球菌、腐生葡萄球菌、耳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、沃氏葡萄球菌.FOX纸片法总的敏感度和特异度为99.0%和86.0%;OXA纸片法总的敏感度和特异度为91.7%和74.4%.影响FOX纸片法敏感度的菌种为1株表皮葡萄球菌;影响其特异度的菌种包括木糖葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、腐生葡萄球菌;而影响OXA纸片法敏感度的菌种包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、模仿葡萄球菌、耳葡萄球菌;影响其特异度的菌种包括人葡萄球菌、模仿葡萄球菌、木糖葡萄球菌、耳葡萄球菌、腐生葡萄球菌、沃氏葡萄球菌.结论 FOX纸片法检测MRCNS准确性因菌种不同有所差异,尤其应关注木糖葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、腐生葡萄球菌的影响.建议检测MRCNS时,尽可能将CNS鉴定到种,视菌种必要时用PBP2a或mecA基因予以确认.
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头孢哌酮-舒巴坦药敏纸片中舒巴坦量对药敏结果的影响
目的 探讨头孢哌酮-舒巴坦药敏纸片中舒巴坦量对药敏结果 的影响.方法 用琼脂稀释法检测头孢哌酮、头孢哌酮-舒巴坦(2:1)和头孢哌酮-舒巴坦(1:1)3组药对临床分离的534株革兰阴性杆菌的MIC值;用纸片扩散法检测头孢哌酮、头孢哌酮-舒巴坦75/30μg和75/75μg 3种纸片对此534株菌的抑菌环直径;分析MIC结果 之间、纸片扩散法之间,以及2种药敏方法 之间的结果 是否有差异.结果 经琼脂稀释法检测头孢哌酮、头孢哌酮-舒巴坦(2:1)和(1:1)MIC_(50)分别为:32、16、16μg/ml,MIC_(90)分别为≥256,128,64μg/ml,Wilcoxon秩和检验两种药量配比MIC结果 无统计学差异(Z=-0.248,P=0.804);头孢哌酮-舒巴坦75/30μg药敏纸片(75/30纸片)检测的敏感率(S%)、耐药率(R%)和中介率(I%)分别为55.3%、24.5%和20.2%,与琼脂稀释法结果 相似.头孢哌酮-舒巴坦75/75μg(75/75纸片)敏感率、耐药率和中介率分别为72.5%、12.4%和15.1%,比75/30纸片检测的总敏感率高17.2%,对75/30纸片及75/75纸片测所有菌株的2组抑菌环直径进行配对t检验(t=21.613,P＜0.01),但这种差异只来自于CISI规定检测出的产ESBL菌株、鲍曼不动杆菌和未经ESBL检测的其他肠杆菌科菌株;而对铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌和ESBL阴性菌株的敏感率或耐药率差异无统计学意义.结论 头孢哌酮-舒巴坦(2:1)和(1:1)琼脂稀释法药敏结果 及75/30μg纸片法药敏结果 无差异.当使用75/75μg药敏纸片报告产ESBL菌株、鲍曼不动杆菌和其他肠杆菌科菌株的药敏结果 时,应注明舒巴坦的含量.
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幽门螺杆菌克拉霉素纸片扩散法药敏试验标准化研究
目的 比较纸片扩散法和E-test法检测幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药性,并进行纸片扩散法检测的标准化研究.方法 从接受胃镜检查患者的胃黏膜活检样本中分离出44株幽门螺杆菌,用纸片扩散法和E-test法检测菌株对克拉霉素的敏感性,并建立直线回归方程评价两种方法的一致性.结果 采用E-test法,克拉霉素的小抑菌浓度(MIC)为0.016 ～ 256 μg/mL,菌株对克拉霉素的耐药率为27.3％ (12/44).采用纸片扩散法,抑菌圈直径是0～ 35 mm,两种方法具有良好的相关性(r2 =0.91,P＜0.01).根据回归方程,抑菌圈直径≥18 mm表示菌株对克拉霉素敏感,≤15 mm为耐药.根据上述折点,两种检测方法检测的一致率为100％.结论 纸片扩散法与E-test法具有良好的一致性,在临床上可以替代E-test法.
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纸片扩散法检测肺癌患者念珠菌药物敏感性的研究
目的：与微量肉汤稀释法比较，评价丹麦ROSCO纸片扩散法在检测肺癌患者念珠菌药物敏感性方面的应用价值，为临床实验室寻找一种简便的念珠菌药物敏感性检测方法。方法采用丹麦ROSCO公司抗真菌药物敏感性纸片和法国生物梅里埃公司ATB FUNGUR2念珠菌药物敏感性板条检测肺癌患者感染的78株常见念珠菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑4种抗真菌药物的敏感性。以美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）M27-A方案的微量肉汤稀释法为金标准。结果以NCCLS微量肉汤稀释法作为金标准，纸片法检测5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的药物敏感性的κ值达到了0.89，未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象。用纸片扩散法对78株念珠菌的药物敏感性进行分析，各菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感度高，分别为88.20%和89.17%，对氟康唑和伊曲康唑敏感度较低，分别为56.34%和52.12%。白色念珠菌和热带念珠菌对四种抗真菌药物的敏感度较高，分别为90.95%、85.71%，而光滑念珠菌和克柔念珠菌的敏感度低，分别为67.50%、41.67%。结论纸片扩散法与微量肉汤稀释法一致性高，在临床实验室可以替代微量肉汤稀释法进行念珠菌的药物敏感性分析。
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天津地区志贺菌耐药性及整合子携带调查
目的:了解天津地区志贺菌抗生素耐药性变迁及1、2类整合子携带状况.方法:K-B纸片法测定1981-1983年及2009年天津地区临床分离的57株志贺菌药敏情况.以煮沸法制备细菌总DNA作为PCR扩增模板.PCR方法扩增1、2类整合子整合酶及可变区并测序分析.PCR产物直接测序,结果经BLAST程序与GenBank数据库标准菌株比对分析.结果:1981-1983年组志贺菌对四环素、链霉素、氯霉素及复方新诺明敏感率低,3种及3种以上抗生素多重耐药率为66.67%;2009年组志贺菌对氨苄西林、链霉素、复方新诺明、哌拉西林和四环素敏感率低,3种及3种以上抗生素多重耐药率为83.33%.1981-1983年组1类整合子阳性率为87.88%(29/33),27株可变区含氨基糖苷类药物耐药基因aadA;1株宋内志贺菌可变区含甲氧苄啶耐药基因dfrA 17和氨基糖苷类药物耐药基因aadAS;未发现2类整合子阳性株;2009年组1类整合酶阳性率为79.17%(19/24),可变区及3'末端扩增均阴性;2类整合子阳性率87.50%(21/24),可变区含dfAl+satl+aadAl,介导甲氧卞啶、链丝菌素和链霉素耐药;其中17株1、2类整合酶均阳性.结论:2009年分离的志贺菌抗生素耐药较上世纪80年代分离的志贺菌增强,多重耐药菌株增加.天津地区志贺菌携带1、2类整合子.
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187株洋葱伯克霍尔德菌的临床分布及对抗生素的耐药性
目的 了解洋葱伯克霍尔德菌在临床的分布与耐药特征,指导临床更加合理使用抗菌药物.方法 使用法国生物梅里埃API20NE系统对菌株进行鉴定,采用药物敏感性纸片琼脂扩散(K-B)法和微量肉汤稀释法进行药敏试验.结果 187株洋葱伯克霍尔德茵临床标本来源以痰液为主,占80.2％.其对复方磺胺甲恶唑、米诺环素、氯霉素、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、美罗培南的耐药率较低,分别为4.3％、14.4％、19.8％、26.2％、34.6％、27.3％,而对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、黏菌素、头孢唑林、阿莫西林/克拉维酸的耐药率在95.0％以上.结论 洋葱伯克霍尔德菌引起的感染以呼吸道为主,对临床常用的多种抗生素有极高的耐药性,应积极开展病原学检查,指导临床合理使用抗菌药物.
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儿童血流感染唐菖蒲伯克霍尔德菌的临床特点及其药敏分析
目的 探讨儿童血流感染唐菖蒲伯克霍尔德菌(B.gladioli)的临床特点及其药敏分析.方法 回顾性分析2015年1月至2016年1月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院收治的63例血流感染B.gladioli和81例同期非细菌感染性疾病患儿的临床资料,比较两组患儿的C-反应蛋白(CRP)水平、降钙素原(PCT)水平和白细胞(WBC)计数.分离培养B.gladioli,使用Phoenixtm100型全自动微生物鉴定仪进行细菌初步鉴定,并用MALDI-TOP/MS质谱仪进行验证.采用纸片扩散法(Kirby-Bauer法)进行B.gladioli的体外药敏试验.结果 感染B.gladioli的患儿主要集中在婴幼儿时期,年龄≤3岁者占82.54%(52/63).所有患儿均患有严重的基础疾病,主要为支气管炎、肺炎和白血病等.与非细菌感染组比较,感染B.gladioli组患儿的PCT水平、CRP水平和WBC计数均升高,差异均有统计学意义(P均<0.05).依据铜绿假单胞菌药敏标准,分离的B.gladioli对阿米卡星、庆大霉素、四环素、米诺环素、复方新诺明、环丙沙星、左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦高度敏感,对氯霉素低度耐药,对头孢他啶、氨曲南高度耐药.结论 感染B.gladioli的患者常为年龄≤3岁、免疫力低下、抵抗力差的患儿.血培养及CRP水平、PCT水平和WBC计数可作为疾病转归的判断指标.哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦是儿童感染B.gladioli的首选治疗药物.
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重症医学科的病原菌分布及抗菌药物耐药性分析
目的 分析重症医学科常见病原菌、分布特点及其耐药性,为合理应用抗菌药物提供参考.方法 回顾性分析2010年6月至2012年6月重症医学科送检的分泌物、痰液、尿液、血液及脑脊液等标本分离出的菌株,按照美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)的标准进行分析,药敏试验使用纸片扩散法.结果 在524株培养阳性的病原菌中,革兰阴性杆菌占67.1％；革兰阳性球菌占20.0％；真菌占12.9％.大肠埃希菌占革兰阴性杆菌中的34.3％；革兰阳性球菌以金黄色葡萄球菌常见,约占524株中的8.4％；真菌以白色假丝酵母菌为主.革兰阴性杆菌对亚胺培南耐药率低.结论 重症医学科常见病原菌类型主要以革兰阴性杆菌为主,亚胺培南耐药率低.
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碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌感染51例分析
目的 研究碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKP)致使患者感染的临床特征及耐药性,为临床治疗方案的选择提供参考依据.方法 收集从2011年至2015年于淮安市淮安医院住院治疗患者51株非重复CRKP,对其进行临床特征分析、抗菌药物药敏试验,分析耐药性情况及导致感染的危险因素.结果 按照占比从高到低顺序排列,菌株来源病区分别为重症监护室、感染科、呼吸内科、胸心外科、神经内科以及血液科;菌株来源标本类型按照占比从高到低顺序排列,分别是痰液、尿液、血液、胆汁及创面、脓液;头孢菌素类、青霉素类以及美罗培南和环丙沙星耐药率高达100.00％(51/51),其余抗菌药物按照耐药率高低顺序分别为左旋氧氟沙星、头孢呋辛、庆大霉素、四环素、复方磺胺甲唑、氨曲南、妥布霉素等.碳青霉烯耐药同时合并产生广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)11株.根据logistic回归分析法评价可知,入住ICU、住院时间≥7 d、机械通气时间≥5 d、合并糖尿病以及多种抗生素联用均为影响患者感染的危险因素.结论 CRKP具有严重的多重耐药情况,其耐药性可能与呼吸机使用及产ESBLs存在一定的相关性.
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化脓性眼内炎259例致病菌分析
目的：分析化脓性眼内炎的病原菌分布特点及其药物敏感性，为临床选择有效的抗菌药物提供有价值的信息。方法对259例眼内炎患者采集前房液或玻璃体液进行病原菌培养和药物敏感试验并对结果进行分析。结果259例标本中，细菌培养阳性标本113例，检出率为43．63％，共培养出120株病原菌，革兰阳性球菌89株，占74．17％，革兰阳性杆菌11株，占9．17％，革兰阴性杆菌13株，占10．83％，革兰阴性球菌5株，占4．17％，真菌2株，占1．67％。结论化脓性眼内炎主要致病菌是以革兰阳性球菌为主，应及时监测病原菌种类分布和药敏变化，合理使用抗生素，减少耐药菌株的产生。
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纸片扩散试验检测β-内酰胺酶的研究进展
在产酶细菌感染的治疗和预后中,美国临床实验室标准化协会(CLSI)M100-S20文件弱化了细菌产酶机制的检测,而认为细菌小抑菌浓度(MIC)与临床治疗结局的相关性更好,但是除了参考新修订的抗生素折点外,β-内酰胺酶的检测和报告规则不变[1],该文件作为临床治疗重要的参考依据不容忽视,对于感染的控制及流行病学调查更是至关重要.在新形势下,如何快速、可靠地检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶及碳青霉烯酶是国内外学者研究细菌耐药机制的热点课题.
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用纸片扩散法和微量稀释法进行药物敏感性测定的比较
目的：探讨纸片扩散法和微量稀释法用于临床常见葡萄球菌和肠杆菌的药物敏感性测定的相关性和一致性，为抗菌药物的选用提供参考依据。方法收集2011年3月至2012年2月临床分离的97株葡萄球菌和86株肠杆菌，用纸片扩散法与微量稀释法对以上临床分离的菌株进行药物敏感性测定，分析两种方法的差异。结果纸片扩散法和微量稀释法对葡萄球菌和肠杆菌药物敏感性测定结果比较，差异均无统计学意义（犘＜0．05）；但个别药物敏感性测定结果不在可接受范围内。结论纸片扩散法和微量稀释法用于微生物药物敏感性测定的一致性较好，应注意个别药物敏感性测定结果不在可接受范围内。
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荧光聚合酶链反应检测在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测中的应用
目的 探讨荧光聚合酶链反应(PCR)检测在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测中的应用.方法 收集上海市监狱总医院肺部感染患者的痰液标本,共3 768份,分别进行PCR、纸片扩散抗菌试验、琼脂稀释法检测.结果采用一般细菌培养分离鉴定与荧光PCR检测均检出103例金黄色葡萄球菌,阳性率2.7%.采用纸片扩散抗菌试验检测,检出57株MRSA阳性;采用琼脂稀释法检测,检出58株MRSA阳性.采用荧光PCR检测,有58株MecA基因扩增呈阳性.结论 荧光PCR检测具有快速、简易、稳定、敏感性强、特异性高的特点,可用于MRSA的快速鉴定.
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重视纸片扩散法药敏试验的主要影响因素
纸片扩散法药敏试验操作简便、结果准确,可在各级医院的细菌室使用,是适合国情的药敏试验方法.我国已经统一操作规程,但因各实验室条件的不同,要特别注意MH琼脂质量、药敏纸片稳定性、菌液浊度、抑菌环边缘不齐等因素影响纸片扩散法药敏试验结果的准确性.
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VITEK2-COMPACT全自动微生物分析仪的正确度验证
目的：验证VITEK2-Compact全自动微生物分析系统鉴定和药物敏感性试验的正确度。方法用纸片扩散（K-B）法和细菌鉴定仪（ATB）鉴定系统作为评价VITEK2-Compact全自动微生物分析系统药物敏感性试验和鉴定的参考方法，14株已知室间质评菌株和19株临床菌株分别用VITEK2-Compact和参考方法鉴定和药物敏感性试验，并对结果做统计学分析。结果 VITEK2-Compact鉴定与所选定ATB参考鉴定方法比较，符合率为100.00%。药敏卡与K-B法结果标准符合率为96.90%：一般错误率为2.35%，严重错误率为0.75%，重大错误率为0.00%。结论 VITEK 2-Compact全自动微生物分析系统的正确度能满足临床要求，可应用于临床微生物实验室临床标本的细菌鉴定及药敏试验。
