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HIV-1耐药性研究的新进展
随着多种抗逆转录病毒治疗(ART)药物的广泛使用,以及高效抗逆转录病毒疗法(HAART,high-ly active antiretroviral therapy)的应用和推广,HIV-1感染者的并发症和AIDS病人的死亡率明显下降,抗HIV/AIDS的治疗效果是极其明显的,但是,HAART应用的局限性也是显而易见的.其中,HIV-1的耐药性是维持HAART长期疗效的主要障碍,如何加强HIV-1耐药性的临床和基础研究对治疗有十分重要的意义.本文旨在对产生HIV-1耐药性的分子机制,HIV-1治疗药物及其耐药性与HIV-1基因突变的相关性,HIV-1耐药性检测方法及其临床应用的可靠性和指导意义等方面的新进展作一综述报道.
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浙江省仙居县痢疾菌型分布及耐药性检测
细菌性痢疾(简称菌痢)是仙居县常见肠道传染病,过去认为以福氏志贺菌2a(简称F2a)菌型引起为主,但近Kaisar等[1]报道菌痢主要由福氏志贺菌2b(简称F2b)引起,并有新菌型发现.作者于2003年5月至2005年10月对该县菌痢患者的病原菌进行检测,现将结果报道如下.
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宜昌市2002-2006年间住院肺结核患者耐药状况及趋势分析
结核病是当今具威胁传染病之一,耐药结核病增加是疫情上升重要因素之一.对本院2002-2006年期间住院结核病患者进行了耐药性检测,报告如下.
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某战区部队结核病耐药性检测分析
为了解部队结核病人诊治及结核菌耐药状况,我们对军人住院结核病人进行了痰涂片、培养,对分离出的92株结核分枝杆菌进行了耐药性检测.材料与方法1.检测对象:某战区医院收治的军人结核病患者.2.方法:(1)耐药检测:留取治疗前痰标本,进行涂片、培养.对培养出的阳性菌株,采用绝对浓度间接法进行耐药检测.4种药物的耐药界限为:异烟肼(INH)1μg/ml、利福平(RFP)50μg/ml、链霉素(SM)10μg/ml、乙胺丁醇(EMB)5μg/ml.
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加强基层医疗机构结核菌检测能力的重要性
随着国家对结核病的控制力度加大和经费投入增多,结核病疫情得到了相当程度的控制.但也不能不看到,由于我国人口众多,结核病患者的基数大,疫情仍然十分严峻.基层医疗机构的实验室设施简陋,检验方法单一,且结核病检验人员调动频繁,实验技能普遍偏低,导致肺结核菌阳检出率低,耐药性检测基本没有开展,对加快控制结核病疫情起到了一定的阻碍作用.
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医院内不动杆菌流行现状及耐药性分析
不动杆菌(Acinetobacter species)广泛存在于医院环境及人体皮肤,是专性需氧菌,不需要特殊营养,易在潮湿的环境中生长,为条件致病菌.近年来,不动杆菌已成为医院内感染的主要病原菌之一.在大量广谱抗生素的使用压力下,临床分离的不动杆菌大多表现为多重耐药,治疗十分困难.作者对北京医院各病区5年中不动杆菌的分布状况进行了调查,并对临床分离的536株不动杆菌进行产酶和耐药性检测,结果报告如下.
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显微镜观察药物敏感性检测技术及其在结核病诊断和耐药性检测中的应用
自20世纪80年代以来,结核发病率又呈上升趋势,据WHO估计,全球约有20亿人患有结核病,每年有880万新发病例,死亡人数约为200万[1].同时,耐药结核病也随之增多,使结核病的诊断及治疗变得更为困难.
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2009-2014年浙江省苍南县就医患者幽门螺杆菌耐药性分析
幽门螺杆菌( Helicobacter pylori, HP)是定植于胃黏膜上皮表面的致病菌。 HP感染可能会引发慢性活动性胃炎和消化性溃疡,部分患者可发展为萎缩性胃炎、胃癌和胃黏膜相关淋巴瘤。 HP的根除失败率居高不下主要是由于所感染的HP菌株对抗生素的耐药[1],因此对分离株进行耐药性检测,并依据其结果选择合适的抗生素药物十分必要。为此对浙江省苍南县人民医院检出的HP菌株进行临床耐药性的回顾性分析,为选用正确的根除方案用药提供依据。
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急诊科C、D类慢性阻塞性肺疾病急性发作患者细菌分布及耐药性分析
目的 研究分析浙江中医药大学附属第一医院急诊科C、D类慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重患者细菌感染的分布情况及其耐药性.方法 对急诊科C、D类COPD急性加重患者痰液进行培养+药敏试验,采用VITEK-2 compact微生物分析仪鉴定细菌,采用CLSI制定的纸片扩散法进行细菌耐药分析.结果 在分离出的222株细菌株中,革兰阳性(G+)菌60株,占27.0%,革兰阴性(G-)菌162株,占73.0%.G+菌主要为金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为50.00%,耐药率显著高于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA),对万古霉素、利奈唑胺、替加环素均敏感(100%).G-菌主要为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌,非发酵菌铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药率较高,肠杆菌科中大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株检出率高于肺炎克雷伯菌,具有多重耐药性.结论 急诊科C、D类COPD急性加重患者的细菌耐药形势严峻,铜绿假单胞菌分离率高,需加强耐药性检测,及时有效控制感染减少耐药率.
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用DNA芯片快速检测结核分枝杆菌对异烟肼的耐药性
本研究采取的方法是针对耐药性基因突变情况设计相应的探针,然后将合成好的寡核苷酸探针点阵,并固定于玻璃片表面制作DNA芯片,通过杂交的方法对结核分枝杆菌(TB)异烟肼耐药性进行检测.报告如下.一、材料与方法1.TB菌株均由上海市肺科医院提供,40株耐异烟肼菌株,5株异烟肼敏感株,1株标准株(敏感株H37RV),均已通过常规的耐药性检测.
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结核分枝杆菌耐药机制及耐药性检测的研究进展
自20世纪80年代以来,结核病疫情重新上升,成为严重危害公共卫生的问题之一。据世界卫生组织估计,目前全球约有20亿人感染结核分枝杆菌(结核菌),其中约有5 000万人感染耐药结核菌[1]。因此对结核菌耐药机制和耐药性检测的研究意义重大。结核菌的耐药性的产生主要是由于不合理用药引起的结核菌内抗结核药物作用靶基因突变所致[2]。目前检测结核菌耐药性的方法有表型检测和基因型检测两大类。 一、结核菌的耐药机制 染色体基因变异是结核菌产生耐药性的主要机制。结核菌95%以上的基因变异是直接由于抗结核药物引起[2]。细菌可以通过染色体自身突变或者外源遗传因子如质粒或转座子而获得耐药性,但迄今为止结核菌中尚未发现质粒和转座子介导的耐药[2]。Musser等经大量研究发现大约12种基因突变和结核菌的耐药性有关。已确定主要为基因突变引起耐药性的抗结核药有利福平(RFP)、异烟肼(INH)、链霉素(SM)、吡秦酰胺(PZA)、乙胺丁醇(EMB)、喹诺酮类等。 1.RFP通过和结核菌中DNA依赖的RNA聚合酶的结合来抑制转录过程,导致细胞死亡[3]。96%RFP耐药菌株的产生是因为编码该酶β亚基的rpoB基因发生改变所致。这些改变主要是集中在rpoB中的81个碱基区域(利福平耐药决定区)内的各种突变,也有少量碱基插入或缺失,共35种,其中43%为531-Ser错义突变,此位点突变常见;36%为526-His错义突变。rpoB基因中513、526、531位点突变导致RFP高度耐药(MIC>32 μg/ml),尤以513位点突变产生的耐药性高;514、521、533位点突变导致RFP低度耐药(MIC<12.5 μg/ml)[4]。已知rpoB基因的9种突变同时和结核菌对利福布丁(refabutine)、利福喷丁(refapentine)等的耐药有关[3]。 2.INH被结核菌内过氧化氢-过氧化物酶(由katG基因编码)激活,作用于enoyl-ACP还原酶(由inhA基因编码),抑制杆菌酸和细胞壁合成。结核菌耐INH的机制比较复杂,katG基因的突变、部分缺失是主要机制,该基因的完全缺失在INH耐药株中只占很小一部分但导致高度耐药[5]。多数文献都对KatG基因中315位AGC突变成ACC及463位CGG突变成CTG作了报道,认为这两个突变和耐药性关系密切[6]。但近年来有些学者认为R463/L突变无意义[7]。inhA、katA、ahpC等基因和结核菌对INH的耐药关系正在研究之中,近又提出kasA可能是一个耐药相关基因[8]。InhA 突变也对乙硫异烟胺1314th(ETH 1314th)耐药[3]。
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基因诊断技术在结核分枝杆菌耐药性检测中的应用
近年来,由于人口流动普遍增加、人体免疫缺陷病毒(HIV)与结核分枝杆菌(结核菌)伴发感染以及耐药菌株的出现等原因,使结核病发生率有上升趋势,全球结核病防治面临新的挑战.鉴于近年来核酸检测技术广泛应用于结核杆菌耐药性检测,综述如下.
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人类免疫缺陷病毒1型耐药性检测方法及其应用进展
近年来,艾滋病临床治疗失败中的耐药性问题,已经引起了越来越多的关注.在此背景下,耐药性检测逐步成为优化艾滋病联合化疗方案的有力工具.
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结核分枝杆菌耐药性检测技术进展
耐药MTB的流行与传播是导致结核病高发病率和高病死率的重要因素,MTB耐药性检测研究也是结核病研究的热点和难点问题.目前普遍应用的罗氏培养药敏试验的需时较长、准确性差,分枝杆菌快速培养系统虽能缩短检测时间[1],但仍需4~6周,远不能满足临床诊治需求.因此,迫切需要快速、灵敏、简便和价廉的耐药性检测新技术.近年来出现的耐药表型检测和耐药分子检测技术使MTB耐药性检测技术有了较大发展,并具有临床应用前景,现介绍如下.
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胃肠肿瘤术后切口感染病原菌监测与预防性抗菌药物的选择分析
目的 统计分析胃肠肿瘤患者术后切口感染病原菌分布与耐药性监测数据,探讨预防使用抗菌药物的选择,以降低患者术后切口感染,提高手术质量.方法 对医院2014年1月-2016年1月行手术治疗的525例胃肠肿瘤患者临床资料进行分析,收集术后切口感染患者的实验室检测、病原菌培养、分离、鉴定及药敏数据,整理分析胃肠肿瘤术后切口感染病原菌的分布情况及主要病原菌对常用抗菌药物的耐药性,结合胃肠肿瘤术患者的临床特点,探讨胃肠道肿瘤术患者围术期预防性抗菌药物的选择方案.结果 525例胃肠道手术患者切口分泌物中36例患者病原菌培养阳性,切口感染率6.86%,36份标本共检出42株病原菌,其中革兰阳性菌32株占76.19%,革兰阴性菌7株占16.67%,真菌3株占7.14%;金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、表皮葡萄球菌对头孢唑林、头孢拉定耐药率>50%,而对替考拉宁、头孢噻吩、头孢氨苄、利奈唑胺、亚胺培南、美罗培南有较高的敏感性;大肠埃希菌、铜绿假单胞菌对替考拉宁、头孢噻吩有较高的耐药率>50%,对氨苄西林、头孢曲松、阿莫西林、亚胺培南、美罗培南敏感性较高;患者经敏感抗菌药物治疗后,感染均得到有效控制.结论 定期总结胃肠肿瘤术切口感染病原菌分布及药敏性数据,合理应用抗菌药物,延缓院内病原菌耐药性发展进程,以降低胃肠肿瘤患者术后切口感染率.
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冬季儿童上呼吸道菌群分布调查
上呼吸道感染多发生在冬春季节,了解儿童上呼吸道菌群的分布状况,有助于阐明儿童上呼吸道感染的发病机理。我们于2000年1月份,对165名学龄前儿童进行了咽部菌群分布调查。 对象 全部165份标本取自北京市某幼儿园3~6岁健康儿童的咽部分泌物,其中男童77名,女童88名。取材当日无流感流行。 方法 用无菌棉棒取儿童咽后壁分泌物无菌封闭保存,1 h内送实验室接种于5%羊血琼脂平板及含50 mg/L万古霉素的兔血巧克力琼脂平板上,置8%CO2孵箱中,35℃过夜培养。细菌的分离与鉴定均按操作规程进行[1],用VITEK试卡将细菌鉴定到种。将分离到的嗜血杆菌、卡他莫拉菌及葡萄球菌,用Nitrocefin纸片进行β-内酰胺酶测试,纸片变红为阳性。对分离的肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌,用苯唑西林(1 μg)纸片进行耐药性检测,结果按NCCLS标准[2]进行判断。实验用Ⅹ、Ⅴ因子、OP、氧化酶、Nitrocefin、苯唑西林(1 μg)纸片,蛋白胨、脑心浸液(干粉)、DNA琼脂均购自OXOID公司(英国)。标准菌株流感嗜血杆菌ATCC 49766、肺炎链球菌ATCC 49619和金黄色葡萄球菌ATCC 25923为本实验室菌库保存。
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新疆乌鲁木齐市2014年HIV-1耐药毒株传播分析
目的 调查乌鲁木齐市2014年艾滋病病毒1型(HIV-1)耐药毒株的传播情况.方法 参考世界卫生组织(WHO)的艾滋病传播性耐药调查方法,按确证时间顺序采集当年16~25岁新确证HIV 1感染者全血样本33份,分离血浆,提取病毒基因组RNA,扩增包含完整蛋白酶编码区和反转录酶1~250氨基酸基因区的pol基因片段并测序,利用Mega 6.0软件,通过与参考株pol序列构建进化树确定HIV-1亚型,pol序列与Stanford耐药数据库中的共享序列进行比对,利用WHO提供的CPR 5.0软件分析传播性耐药突变位点和耐药程度.结果 检测的33份样本中成功获得序列的有32份,亚型以CRF07-BC (50.0%,16/32)为主,其次是CRF01-AE(34.4%,11/32).32份样本中只有1份出现了耐药传播相关的突变位点,耐药传播率为3.1%(1/32).结论 乌鲁木齐市2014年的耐药传播水平较低,但应继续定期进行HIV-1耐药毒株传播的监测,了解HIV-1耐药毒株传播的动态变化.
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新疆部分艾滋病病人抗病毒治疗效果和耐药变异分析
目的 观察接受中国现行一线抗病毒药物治疗的艾滋病病人,在治疗1年内免疫功能恢复、病毒抑制效果,以及耐药性产生和发展情况0方法 采用Logistic回归分析病毒抑制失败和耐药发生的相关因素.结果 共调查156例病人,基线病毒载量<1 000拷贝/ml的病人比例为5.1%,治疗6和12个月后,分别上升到71.1%和70.8%;病人治疗前的CD<,4>细胞数平均值为191个/μl,在治疗6个月和12个月分别达到324个/ml和327个/ml.基线样本的耐药性检测未发现主要耐药突变,治疗6个月有5例(5.2%,5/97)出现耐药突变,治疗12个月后增加到12例(10.6%,12/113),其中7例对核苷类和非核苷类反转录酶抑制剂均有不同程度的耐药.治疗12个月,病毒抑制失败的相关因素是:近1个月内有漏服史(调整OR值:AOR=12.6,P=0.0002)、基线CD<,4>细胞数在100个/μl以下(AOR=6.6,P=0.0026),均为耐药发生的危险因素;而静脉吸毒以外的途径感染则是减少耐药发生的相关因素(AOR=0.2,P=0.0244).结论 大多数艾滋病病人在抗病毒治疗一年内病毒复制得到有效抑制,CD<,4>细胞水平明显升高,但是耐药突变率也在不断升高,需采取有效措施防止耐药的发生,保证抗病毒治疗效果.
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HIV耐药性检测方法及其临床应用
艾滋病病毒(HIV)是一个极其多样化的"准种"群体,通过对不同HIV株env、gag基因的同源性比较与系统学分析,证实了M、O、N演化群的存在,并在M群内划分出若干个"丛"(cluster)或"簇"(clade),即基因亚型,分别用A、B、C、D...表示,原有欧美株被归入B亚型.
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抗艾滋病病毒治疗进展
2002年第9届逆转录病毒和机会性感染会议于2月24~28日在美国西雅图举行,会议在抗艾滋病病毒(HIV)/艾滋病(AIDS)治疗方面提供了新的信息,相关的研究涉及到以下各方面:新药治疗的对象,包括从未经过治疗的新病人以及用过抗病毒治疗的患者;病毒对药物发生耐药性的机制,药物耐药性检测的临床研究和治疗药物的随访措施;治疗方针和途径的探讨,包括何时开始治疗,有计划的间歇治疗和治疗的免疫反应.