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HIV-1表型耐药检测方法的研究进展
高效抗逆转录病毒疗法(HAART)的使用显著提高了HIV感染者和艾滋病人的存活率[1].然而,耐药性的产生却严重降低了治疗效率.因此,采用合适的HIV耐药检测方法,及时了解患者的HIV耐药性,对于治疗艾滋病患者和控制整个艾滋病疫情都有十分重大的意义.目前常用的耐药检测方法有基因型和表型耐药检测.基因型耐药检测是通过检测耐药相关基因序列的改变来判断毒株的耐药情况.由于该方法花费少、简便快捷[2]对检测条件和人员的要求比较低而被广泛应用.但是,基因型检测只是间接的耐药检测方法,只针对已被证实的突变位点,不能检测尚未被发现的潜在耐药突变位点,不能有效的解释多种耐药突变位点的协同、拮抗效应[3].能直接检测HIV耐药的表型耐药检测方法,可以克服以上的不足,更加准确的检测HIV病毒的耐药性.本文主要介绍了HIV-1表型耐药检测的基本原理,常用方法进展以及相对于基因型耐药检测方法的优缺点,并提出对其未来应用的展望.
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初治肺结核合并糖尿病患者噬菌体检测法一线抗结核药物耐药分析
2007-2008年全国结核病耐药性基线调查报告显示,涂阳肺结核患者总耐药率为37.79%,其中初治肺结核患者耐药率为35.16%,结果表明我国耐药结核病疫情严重[1].肺结核合并糖尿病发病率呈上升趋势,有报道10%~30%的肺结核患者患有糖尿病[2],两病互相影响,具有进展快、疗效差、耐药率高等临床特点,肺结核合并糖尿病患者的耐药率明显高于非糖尿病肺结核患者[3].在结核病患者中进行常规、定期的耐药检测,对制定结核病控制规划和化疗方案具有重大意义,传统的结核分枝杆菌耐药性测定方法需时太久,不能满足临床治疗的需要,噬菌体检测法(PhaB)检测结核分枝杆菌的耐药性,具有快速、简便、价廉等特点,而且又有较高的敏感度和特异度[4-5].本研究利用PhaB法检测初治肺结核合并糖尿病患者对一线抗结核药物异烟肼、链霉素、利福平和乙胺丁醇的耐药性,并对结果进行比较,分析肺结核合并糖尿病患者耐药情况,为临床治疗提供参考,现将结果报道如下.
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苏州市可疑耐药患者的耐药现状及影响因素分析
我国耐多药结核病疫情非常严重,被世界卫生组织列为"特别引起警示的国家和地区"之一.2007年全国结核分枝杆菌耐药性基线调查结果显示,我国肺结核患者中耐多药率为8.32%[1].为了发现和控制耐多药肺结核患者,苏州市从2012年开始对可疑耐药患者(5类高危对象)进行筛查,即进行痰培养和耐药检测,现将结果报告如下.
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某战区部队结核病耐药性检测分析
为了解部队结核病人诊治及结核菌耐药状况,我们对军人住院结核病人进行了痰涂片、培养,对分离出的92株结核分枝杆菌进行了耐药性检测.材料与方法1.检测对象:某战区医院收治的军人结核病患者.2.方法:(1)耐药检测:留取治疗前痰标本,进行涂片、培养.对培养出的阳性菌株,采用绝对浓度间接法进行耐药检测.4种药物的耐药界限为:异烟肼(INH)1μg/ml、利福平(RFP)50μg/ml、链霉素(SM)10μg/ml、乙胺丁醇(EMB)5μg/ml.
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安徽省结核杆菌药物敏感性试验结果分析
目的:用绝对浓度法对安徽省285株结核杆菌进行五种常用抗结核药物的耐药检测,了解目前结核杆菌的耐药状况.
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HAIN技术在结核病诊断及耐药检测中的应用
目的:评价HAIN技术在检测临床标本诊断结核病及利福平、异烟肼耐药检测中的应用价值[1].方法:对1372例初诊肺结核可疑患者痰标本进行涂片镜检,改良罗氏培养、药敏和HAIN技术检测,进行传统药敏方法和HAIN技术检测利福平、异烟肼耐药性的对比分析.结果:临床诊断结果作为终标准,涂片镜检的阳性率为26.6%、改良罗氏培养方法的阳性率为44.3%、HAIN技术的阳性率为45.9%;以传统药敏方法为标准,HAIN技术检测利福平、异烟肼耐药性的敏感度分别为90.8%、80.3%,特异性分别为97.4%、96.7%..结论:HAIN技术检测结核杆菌有较高的灵敏度,同时还可以检测结核杆菌对利福平、异烟肼的药敏结果,且药敏时间由传统方法的2-3个月缩短到2天,有较高的应用价值.
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恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化病毒耐药的临床观察
目的 观察恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化48周后的疗效及病毒耐药位点变异情况.方法 收集近2年门诊或住院患者,其中恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化患者19例,采用恩替卡韦0.5 mg/d治疗,同时阿德福韦治疗组(10 mg/d)23例、替比夫定治疗组(600 mg/d)15例、拉米夫定治疗组(100 mg/d)14例,于治疗48周后观测其肝功能、Child-Pugh分级以及血清HBV DNA自基线下降的水平.结果 治疗48周后各治疗组患者肝功能、Child-Pugh分级以及血清HBV DNA自基线下降的水平与治疗前比较均有显著性差异,而且恩替卡韦未出现耐药方面的相关表现.结论恩替卡韦能改善活动性乙型肝炎肝硬化肝功能,疗效与其他核苷类似物比较无显著性差异,但耐药方面表现较其他药物为优.
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2007年和2009年医院内获得性血流感染病原菌分布及其耐药性分析
目的 监测2007年和2009年我国不同地区13家教学医院内获得性血流感染中主要病原菌的分布并对其耐药性进行分析.方法 收集医院内获得性血流感染的病原菌,并对其进行药物敏感性检测,采用WHONET 5.6软件对数据进行分析.结果 本研究共收集到2015株医院内获得性血流感染病原菌,其中革兰阴性杆菌1332株(占66.1%),革兰阳性球菌683株(占33.9%).分离率排名前五位的病原菌分别为:大肠埃希菌(27.9%),肺炎克雷伯菌(11.3%),金黄色葡萄球菌(10.9%),铜绿假单胞菌(7.0%),鲍曼不动杆菌(6.0%).对血流感染中常见革兰阴性杆菌体外药物敏感率较高的抗菌药物依次为:替加环素(98.2%,不包括铜绿假单胞菌),多黏菌素(98.1%,非发酵菌),头孢他啶/克拉维酸(90.4%);对常见革兰阳性球菌体外药物敏感率较高的抗菌药物有:替加环素和利奈唑胺(敏感率均为100%),万古霉素和替考拉宁(敏感率均为99.4%).2007年度和2009年度数据显示:苯唑西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的发生率分别为42.3%和42.2%,产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌(ESBLs)的发生率分别为54.7%和53.4%,多重耐药铜绿假单胞菌(MDRP)的发生率分别为11.9%和15.9%,多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRA)的发生率分别为49.0%和64.8%,屎肠球菌和粪肠球菌对高水平庆大霉素耐药(HLGR)的发生率分别为62.6%和66.7%,对碳青霉烯类不敏感的发生率分别为2.1%和4.6%.高水平庆大霉素耐药(HLGR)肠球菌的发生率分别为62.6%和66.7%,碳青霉烯类不敏感肠杆菌的发生率分别为2.1%和4.6%.结论 医院获得性血流感染病原菌主要为革兰阴性杆菌(以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主),替加环素和碳青霉烯类药物对其敏感率较高;革兰阳性球菌中分离率高的为金黄色葡萄球菌、其次为屎肠球菌,替加环素、利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁对其敏感率较高.多重耐药菌中MDRA、HLGR、MDRP以及碳青霉烯类不敏感肠杆菌科细菌的发生率分别升高了:15.8%、4.1%、4.0%和2.5%,应引起临床的关注.
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支原体感染与非淋菌性尿道炎
为了解本地区非淋菌性尿道炎(NGU)患者支原体感染及耐药情况,我们对780例NGU患者分泌物标本的解脲脲原体(UU)和人型支原体(MH)进行了培养及耐药检测.
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应用噬菌体报告系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性
早期诊断耐药结核分枝杆菌是防治耐药结核病的关键和基础.1993年起噬菌体报告系统(LRPs)陆续应用于结核分枝杆菌的鉴定及耐药检测,噬菌体生物扩增法(PhaB)也在国内被用于检测结核分枝杆菌的耐药性.我们利用新的重组噬菌体phAE142建立LRPs检测方法,检测了106株结核分枝杆菌对4种常用抗结核药物的耐药性,评价LRPs在结核病临床和流行病学研究中应用的可行性.
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实验室新技术用于耐药结核病诊断流程的建议
2007年以前,全球使用固体培养和药敏试验技术(传统药敏试验)进行实验室MTB耐药诊断,传统药敏试验可检测一线抗结核药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素)和二线抗结核药物(卡那霉素、氧氟沙星等)的耐药情况,结果较可靠,价格便宜,但所需时间较长,约2~3个月[1-2]。为了提高耐药诊断速度,世界卫生组织2007—2010年陆续推荐了多种新技术,如液体培养和药敏试验技术(液体药敏试验)、分子生物学快速耐药检测技术[包括线性探针( LPA)、自动化Gene-Xpert等技术]。液体药敏试验将耐药诊断时间缩短至1个月,可检测一线抗结核药物和二线抗结核药物的耐药情况,结果较可靠,但价格较贵,且容易污染[3]。线性探针技术检测耐药需6 h,适用于涂阳痰标本和培养菌株,适合地市及以上级别实验室使用,但价格较贵,仅能用于异烟肼和利福平的耐药性检测[2,4]。自动化Gene-Xpert 技术检测耐药需90 min,操作简便,可在县级实验室使用,适用于涂阳和涂阴痰标本(目前国内注册仅对涂阳肺结核进行耐药检测),但价格较贵,仅能检测利福平耐药[5-6]。总之,不同的耐药检测技术各有优缺点,且不能相互替代。
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北京地区尸解证实艾滋病合并播散性卡波西肉瘤一例
患者男,40岁,汉族.主因"发现抗-HIV阳性10年,意识障碍伴大小便失禁7 h"于2008年3月17日收入院.患者于10年前体检发现抗-HIV(+),当时CD4+ T淋巴细胞230个/μl.9年来间断服用多种抗HIV药物(种类繁多,患者自述记不清楚).2006年经耐药检测发现其对多种常见抗HIV药物耐药,故患者自行停药.半年前因CD4+ T淋巴细胞<100个/μl,明显消瘦,再次口服抗HIV药物(司他夫定+拉米夫定+洛匹那韦-利托那韦复合剂),因为副作用故间断服用.4个月前第一次住我院治疗,诊为艾滋病、肺结核、肺炎、口腔念珠菌感染、慢性乙型肝炎,经抗结核、抗感染等治疗后好转出院.之后在家情绪低落、拒绝进食、拒绝服用任何药物10余天,于2008年3月17日家人发现其突然出现:意识不清、四肢无力、大小便失禁,无抽搐,故再次来我院诊治.
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基因芯片技术在结核耐药检测中的应用进展
近年来,由于人口数量及流动性的增加,耐多药结核(muhidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)特别是广泛耐药结核(extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB)的蔓延,结核病(tuberculosis,TB)再次对国际公共卫生构成严重威胁.1993年4月,WH0宣布"全球结核病处于紧急状态";2009年WHO报告在全球22个结核及耐药结核高负担国家中我国位列第二,仅次于印度[1].
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细菌鉴定和耐药性检测方法的发展
细菌鉴定和耐药性检测对于指导临床精确用药和及时治疗患者具有重要意义.目前临床上进行细菌鉴定和耐药检测仍以表型检测方法为主,主要包括:传统手工鉴定与药敏实验方法、自动化药敏鉴定系统.
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国内外细菌耐药监测研究介绍
细菌耐药已成为全球范围的重大公共健康问题;抗菌药物的广泛使用是造成细菌耐药的重要因素之一.细菌耐药监测是了解细菌耐药机制、细菌耐药发展趋势及细菌耐药与抗生素应用关系等知识的大门.在耐药监测有多种类型:不同的主办者、不同的规模以及不同的监测对象.在耐药监测中,细菌耐药性的产生与抗菌药物应用关系的研究,可谓重中之重.本文简介了国际上具影响力的一些监测项目及其特点.但耐药监测尚存在一定问题,如多个单位参加的细菌耐药监测,存在方法标准化和实验室标准化不统一的问题.
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人类免疫缺陷病毒耐药检测研究进展
艾滋病抗病毒治疗对于病毒抑制和患者生存意义重大,但病毒耐药问题的出现已成为治疗的严重威胁,不仅会导致个体治疗的失败,也会引发耐药毒株的传播风险,因此开展耐药检测工作十分必要。本文对耐药检测的意义、方法和应用研究新进展加以综述,从临床和公共卫生的角度为进一步加强耐药检测工作,更有效的降低耐药的发生、传播和流行提供参考依据。
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程京:开启中国“生物芯”时代
生物芯片,一个大多数人还很陌生、感觉“高大上”的词汇,其研发产品的领域和触角已伸入日常生活;人们以为“只是想象”的很多功能,比如乙肝病毒耐药检测、结核病快速分子诊断及耐药检测、肿瘤预警及个体化诊疗、HPV病毒分子分型检测等早已完成科研开发,做成了能面向市场需求的产品,却只能年复一年地等待上市许可。
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2007年河北省艾滋病病毒耐药检测结果分析
目的 评估河北省艾滋病高效抗逆转录抗病毒治疗(HAART)效果,及时发现艾滋病病毒(HIV)耐药毒株.方法 选择艾滋病(AIDS)患者77例进行横断面和跟踪随访调查,填写调查问卷,采集EDTA抗凝全血标本10 ml,检测病毒载量、CD4+T淋巴细胞计数.结果 77例患者在4种方案HAART治疗2~36个月(平均20个月)后,临床症状明显改善,患者病毒复制得到有效控制68例(88.3%),血浆病毒载量在检测水平以下50例(64.9%);CD4+T淋巴细胞绝对计数平均为(276±169)个/mm3,其中400个/mm 316例(20.8%).75例AIDS患者未出现耐药毒株,2例产生耐药毒株.结论 4种治疗方案疗效较好,88.3%的患者均可有效抑制HIV-1复制,促进机体免疫重建;2例(2.6%)产生耐药毒株.
关键词: 艾滋病病毒 高效抗逆转录抗病毒治疗 耐药检测 -
金黄色葡萄球菌89株的耐药性分析
金黄色葡萄球菌(SAU)是医院感染的重要病原菌之一,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与许多难治性感染有关[1].MRSA通常对多种抗菌药物耐药,给临床治疗带来了极大困难.因此,加强对SAU的耐药检测,及时了解医院MRSA发展趋势,对合理选用抗生素有效控制MRSA流行和传播具有重要意义.笔者现将2011年1月至12月临床分离的SAU结果进行调查分析,现报告如下.
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2011年我院淋球菌耐药结果分析
淋病是我国高发性传播疾病之一,文献[1]报道2011年淋病发病率已跃居传染病第4位,随着抗生素的广泛应用,淋球菌对抗生素的敏感性不断发生变化,不同地区的淋球菌对抗生素的耐药性有明显差别[1].为了解大连地区淋球菌耐药情况,2011年笔者收集了108株淋球菌进行耐药检测,现将结果报告如下.