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基于分子检测技术的实验室质量改进与管理
临床医生获得与疾病相关的分子检测数据以及据此做出准确诊断,是后续实行精准治疗的前提和基础.分子检测结果的准确与否不仅要依靠先进检测设备和检测技术,还要高度重视实验室管理和数据的质量控制.高质量的分子检测数据是包括技术人员的综合专业素质、实验操作流程的规范性、实验室内部质量管理等方面集中反映.正确处置这些要素对检测结果的准确性和可重复性起着重要作用.本文就核酸分子检测中常用的突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)技术结合实时荧光定量PCR(ARMS-PCR)检测技术和二代测序技术在应用过程中出现的问题进行分析和讨论,旨在与业内人士一起学习交流,以提高检测结果的可靠性,为临床提供可靠的实验室诊疗依据.
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空肠弯曲菌flaA-PCR-RFLP分子检测技术的初步应用
空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是导致细菌性肠炎的常见病原菌[1],作为食源性病原菌,主要是由于食用了被污染的食物、水等而感染,建立快速、准确的分子亚分型方法对于追踪污染来源和监控暴发流行具有重要意义.PCR-RFLP(PCR re-striction fragment length polymorphism)是针对单基因的一种亚分型方法,能够在短时间内对大量菌株进行调查研究,不需要特殊设备,普通临床实验室即可开展,已被应用于多种人兽共患病原菌的流行病学监测和溯源性分析[1].
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结核分枝杆菌耐药性检测技术进展
耐药MTB的流行与传播是导致结核病高发病率和高病死率的重要因素,MTB耐药性检测研究也是结核病研究的热点和难点问题.目前普遍应用的罗氏培养药敏试验的需时较长、准确性差,分枝杆菌快速培养系统虽能缩短检测时间[1],但仍需4~6周,远不能满足临床诊治需求.因此,迫切需要快速、灵敏、简便和价廉的耐药性检测新技术.近年来出现的耐药表型检测和耐药分子检测技术使MTB耐药性检测技术有了较大发展,并具有临床应用前景,现介绍如下.
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核辐射损伤剂量的生物学计量检测
核能在军事上的广泛应用,对核辐射的防护及专业军事人员的身体健康情况检测提出了现实的要求.用生物学指标检测核辐射剂量,在近几年的研究已取得了长足的发展.对接触核设施的特勤人员核辐射损伤的剂量检测,好的办法是联用多种分析方法,取各自之长.如:染色体分析具有高灵敏性,剂量可小至0.5 Gy;检测毛发直径判定身体局部照射的具体部位;辐射诱变分子化学技术检测的剂量宽度在0.5100 Gy之间.目前作为生物剂量检测的方法有:细胞检测技术,细胞遗传学检测技术,辐射诱变分子检测技术[1].
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LPA/AP作为缺血性心脑血管病早期诊断指标临床探讨
目的 探讨LPA/AP是否可作为缺血性心脑血管病早期血小板聚集及脑缺氧的灵敏指标.方法 对580例患者应用分子检测技术进行LPA/AP检测,总结其特点.结果 脑梗死、脑供血不足、冠心痛、高血压、糖尿病等疾病LPA/AP均不同程度增高,服用抗血小板聚集药物者溶血磷脂酸(LPA)增高不明显,与溶血磷脂酸极性相似总磷脂(AP)增高临床符合率迭100%.结论 血浆LPA是血小板活化早期释放的物质,AP是脑缺血的早期标志物,二者均可作为缺血性心脑血管病患者准确的早期干预指标.
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分子检测技术在甲状腺结节诊治中的价值
超声和超声引导下穿刺活检是甲状腺癌的主要诊断方式.超声诊断与病理诊断的符合率为60%~90%,不同医院甚至不同医师差异较大.目前各国指南推荐以细针穿刺细胞学检查(FNA)作为评估甲状腺结节的金标准,但仍存在20%~25%的FNA细胞学诊断不能确定性质,无法避免FNA技术上的局限性.从分子生物学层面对甲状腺癌发病机制的研究以及分子诊断技术的快速发展,使甲状腺癌在诊断、预后和治疗决策方面也取得了显著进展.这些技术的发展将弥补FNA诊断的不足,指导术前风险分层,优化初始治疗方案,并在综合考虑肿瘤治疗与生存质量之间取得平衡.
关键词: 分子检测技术 超声引导下穿刺细胞学活检 甲状腺结节 -
肿瘤标记物及分子诊断技术在甲状腺微小癌诊治中应用价值
细针穿刺活检(FNAB)是甲状腺微小癌(TMC)术前诊断的金标准.由于技术上的局限性,目前仍有25%~30%的病例通过FNAB不能明确病变性质.甲状腺癌的发生与基因密切相关,从分子生物学角度研究肿瘤标记物及分子诊断技术在TMC中的应用,有望弥补FNAB诊断的不足,提高TMC诊断的敏感度和特异度.同时,通过分子生物学分析,有助于指导术前的危险分层、判断预后,从而选择佳的初次治疗方案.
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查菲埃立克体分子检测技术研究进展
查菲埃立克体(Ehrlichia chaffeensis,EC)主要引起人单核细胞埃立克体病(human monocytic ehrlichiosis,HME),该病无特异的临床症状而容易误诊,延误治疗可使病情加重甚至造成患者死亡,故对HME实现早期诊断很重要.该文从临床诊断、血清学诊断、病原学诊断到分子生物学诊断等方面对HME的诊断方法进行总结,并着重介绍操作简单、敏感且高效的分子生物学诊断技术.
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嗜吞噬细胞无形体的分子检测技术研究进展
嗜吞噬细胞无形体(AP)主要引起人类经蜱叮咬传播的人粒细胞无形体病(HGA).快速、准确的针对HGA的检测技术能够有效地控制其爆发,减少死亡病例.目前AP感染的诊断方法有临床诊断、血清学诊断、形态学诊断、分子生物学诊断等.其中AP分子检测技术特异性高、操作简便,快速,是目前对AP感染诊断的常用方法.针对AP分子检测主要方法包括巢式PCR (nested PCR)、实时定量荧光PCR(real time PCR)、环介导等温扩增技术(LAMP)等.三类分子检测技术各有优缺点,应根据具体情况选用适当的检测手段,提高AP感染的早期诊断准确率.