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溶血症——血型不合惹的祸
夫妻间若是性格不合,可能过不到一块儿去;如果夫妻之间的血型不合,则会造成孩子溶血症的发生.临床上经常能见到新生儿溶血症,根本发病原因就是夫妻血型不合.如果母亲体内的胎儿与母亲的血型不同,母亲的身体会产生排斥婴儿血型的抗体,抗体结合在婴儿红细胞的表面,导致溶血,婴儿就会发生溶血症.
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放射免疫分析的新进展
放射免疫分析(radioimmunoassay, RIA)是一种通过比活度(specific activity)高的示踪物,观察抗原与抗体结合反应产物来定量微量物质的一种分析方法.它产生于50-60年代交界,是医学生物学界微量分析中有划时代意义的创新,Yalow,Berson因此获得诺贝尔奖.
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高压锅水浴法修复组织抗原防脱片技术的应用
目前用于免疫组化的抗体近千种,不同抗体对病理切片的要求不尽相同.有些抗体(单抗或多抗)必须在组织切片经高压修复后才能有效使用,如ER、PR、p53及一些多药耐药标记等.用于免疫组化的病理组织,经福尔马林固定后许多抗原决定簇被醛基交联封闭,无法与抗体结合,采用高温高压(下称常规法)处理这些组织,就可破坏醛基交联,使抗原暴露,从而与抗体有效结合.
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一种能使免疫组织化学DAB显色变浅的方法
免疫组织化学(免疫组化)或免疫细胞化学是应用免疫学或组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位定性、定位或定量的研究.方法是利用抗原与抗体结合所具有的高度特异性,先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫获得特异性抗体,用此抗体去探测组织或细胞中的抗原物质.
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全血金标检测试纸条法在HBsAg献血者初筛中的应用
目前,血站对献血者HBsAg的筛查,大多采用ELISA法,虽然该法特异性、敏感性均佳,但因操作繁琐,故不适用于非固定采血点对献血者的快速筛查,而未经筛查直接采集的血液,往往由于该项检验不合格而报废。采用全血金标试纸条法对献血者进行HBsAg初筛,几分钟内即可完成检验,降低了血液报废率。 1 材料与方法 1.1 原理 全血金标试纸采用胶体金免疫技术,在硝酸纤维素膜上预包被金标抗HBsAg单抗(Au-ssAb),硝酸纤维素膜上检测线和对照线上分别包被抗HBsAg单抗(sAb2)和羊抗鼠kgG。检测时,样本血清中HBsAg可与胶体金-抗体结合形成复合物,由于层析作用,复合物沿纸条向前移动。
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应用组合抗体结合磁珠个体化分选调节性T细胞
调节性T细胞的分选和体外扩增是制约其临床治疗的瓶颈问题.目前广泛使用的商品化调节性T细胞分选试剂盒价格昂贵,无法针对不同生物品系进行个体化的调整,造成分选效果不稳定;本研究建立的个体化分选方法 基于相同原理,调整抗体用量和实验步骤,大大地节约了实验成本,并且可以针对不同生物品系,选配不同的抗体和调整抗体用量,以达到佳的分选效果.采用鸡尾酒分步分选方法 :先用不同抗体组合磁珠去除非目的 细胞来预富集CD4+T细胞,然后从富集的CD4+T细胞中阳性分选出CD25+细胞.
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SARS-CoV核衣壳蛋白单克隆抗体识别抗原位点的分析
SARS-CoV主要的结构蛋白包括刺突糖蛋白(spike glycoprotein, S)、包膜小蛋白(small envelope, E)、膜蛋白(membrane, M)和核衣壳蛋白(nucleocapsid protein, N).研究发现,N蛋白诱导机体产生很强的免疫应答[1],我们用SARS-CoV全病毒免疫小鼠制备的单克隆抗体,发现有80%是针对N蛋白的抗体,证明N蛋白具有很强的免疫原性,这与以往对动物冠状病毒N蛋白研究结果是一致的[2].本研究通过对SARS-CoV N蛋白单克隆抗体结合抗原位点分析,以及用SARS-CoV抗体阳性血清与单抗对N蛋白进行竞争抑制试验,分析自然状态下机体对N蛋白抗原位点的抗体应答,同时初步观察了临床应用情况.此结果有益于SARS-CoV生物学性状、蛋白组学、发病机制及诊断试剂的研究.
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胃癌相关抗原模拟表位的筛选及鉴定
噬菌体表面呈现技术作为一种揭示蛋白质相互作用的快捷有效工具,已受到广泛重视,并在抗原表位的确定及多肽疫苗的设计中显示出优势〔1,2〕。噬菌体随机肽文库是基于上述技术而构建的。噬菌体其被认为是配体的“万能库”,这些配体不一定和天然配体完全相同,但能模拟天然配体与受体的结合特性。因此,在抗原表位-抗体的识别研究中,可以从肽库中直接筛选出能和抗体结合的表位,这些表位既可以是线性表位,也可以是模拟的构象性表位。
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原子力显微镜对甲状腺滤泡上皮细胞抗体结合后细胞膜表面形态结构的观察
目的 运用原子力显微镜(AFM)观察甲状腺滤泡上皮细胞抗体结合后的细胞膜表面结构的变化,并分析有无抗体结合的异同特点.方法 以甲状腺滤泡上皮细胞为研究对象,采用细胞印片法获取各组甲状腺细胞,分别标记Villin抗体和CK7抗体为实验组及滴加PBS缓冲液的对照组三个试验组(每组各300个).应用AFM(轻敲模式)扫描各组细胞并利用件自动分析系统进行分析.结果 (1)AFM扫描后图像分析结果:未加抗体的对照组甲状腺滤泡上皮细胞表面的隆起较光滑,分布均匀、形状规则,排列疏密适中;Villin抗体组细胞表面的隆起较对照组突起与凹陷无明显变化;CK7抗体组细胞体积稍变大,部分隆起处高度也增加,突起数量明显增多,隆起分布不均匀,沟裂处平均深度较对照组细胞浅.(2)各组细胞膜表面重要参数比较结果:各组细胞膜表面的平均粗糙度、平均峰高度、平均凹陷深度和表面积差值的比较,对照组和ViHin抗体免疫组化组无统计学意义(P>0.05),对照组和CK7抗体免疫组化组具有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论 AFM从纳米级水平为我们提供了一条临床诊断的新思维,滴加抗体后细胞表面抗原与抗体结合,其细胞膜表面形态结构上存在显著差别,为以后的免疫组化纳米级研究奠定基础.
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视神经脊髓炎治疗进展
视神经脊髓炎是一种发生在中枢神经系统的炎性自身免疫性疾病,病变多局限于视神经和脊髓,早期很少累及脑[1].现有的资料提示,视神经脊髓炎发生的机制是致敏B淋巴细胞产生的特异性抗体结合补体,沉积并破坏血脑屏障的水通道蛋白-4以及巨噬细胞、嗜酸粒细胞等趋化渗出,分泌炎性因子,继而导致髓鞘脱失、轴索和组织坏死.某种程度上类似血管炎变化,区别于多发性硬化[2-3].视神经脊髓炎具有反复发作的临床特征,致残率高.所以,控制急性发作期的炎症改变,预防复发是视神经脊髓炎治疗的两个主要目标.有关视神经脊髓炎的治疗现无规范可循[4],本文复习近年国外发表的文献,以其为临床工作提供参考.
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三种特异性抗体结合流式细胞术分选母血中胎儿细胞方法的评价
研究证实母血中的游离胎儿细胞可用于无创性单基因病产前诊断[1,2].胎儿细胞仍是检测胎儿染色体异常的惟一来源[3],虽然母血中胎儿有核红细胞(FNRBC)数量很少,但其特异性形态在正常人外周血中极罕见,并可携带完整的胎儿基因.因此,建立富集母血中胎儿细胞的方法则是无创性产前诊断的关键.本研究用3种FNRBC特异性抗体和流式细胞术分选胎儿细胞,并通过计算FNRBC准确率和特异性,以评价分选母血中胎儿细胞的适宜方法.
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抗核内不均一核糖核蛋白B1单克隆抗体结合131I对肺癌小鼠靶向治疗结果
核内不均一核糖核蛋白(hnRNP)B1是存在于细胞核的一种RNA结合蛋白,在肺癌细胞株和手术切除的肺癌组织中表达,在临近的正常组织、正常的支气管上皮和肺泡上皮细胞的细胞核未见表达.我们推测抗hnRNP B1单克隆抗体(MAb)能特异性与肺癌组织高表达的hnRNP B1蛋白结合,是潜在的肺癌治疗靶点.
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毒品胶体金免疫层析检测板在缉毒侦查中的应用
毒品胶体金免疫层析检测板即"尿检板",由于具有操作简便、经济实用、快速准确等优点,一直是公安机关检测嫌疑人是否吸毒的重要工具,在禁吸戒毒执法工作中应用广泛.其实,如果善加利用,"尿检板"在缉毒办案过程中,也可以发挥重要作用.1 "尿检板"的工作原理"尿检板"是采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析分析技术,通过单克隆抗体竞争结合原理进行检测的[1-2].即样本中的毒品与硝酸纤维素膜上的毒品完全抗原竞争结合胶体金标记的毒品单克隆抗体,通过观察检测区的色带情况判别样本中是否存在毒品.如果样本中含有毒品,毒品与胶体金标记的毒品单克隆抗体结合,检测区不会出现色带;如果样本中不含毒品或毒品含量低于"尿检板"的检测阈值,毒品完全抗原与胶体金标记的毒品单克隆抗体结合,在检测区呈现红色色带.而不论样本中是否含有毒品,对照区都会出现红色色带,否则说明测试结果无效.
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新生儿溶血病的实验室检查
新生儿溶血病(HDN)是由于母婴血型不合而引起的同族血型免疫性疾病,可发生于胎儿和新生儿早期.胎儿由父亲方面遗传抗原而恰为母亲所缺少,此抗原侵入母体,刺激母体而产生免疫抗体,此抗体可经过胎盘进入胎儿血循环,胎儿红细胞与相应抗体结合而大量溶血造成贫血,大多数病例出生时与正常新生儿相似,并无明显的贫血水肿和肝脾肿大,在1~2天后逐渐出现贫血和黄疸,程度日益加深.是新生儿发生高胆红素血症的主要病因.由于我国Rh(-)人群约占0.4%,远低于白种人的15.0%,故临床上以ABO血型系统的HDN多见,Rh血型系统的HDN相对较少[1,2].
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循环免疫复合物检测和血清乙肝病毒标志物间的关系
免疫复合物(IC)是抗原和相应抗体结合形成的复合物.正常情况下.体内产生的IC对人体是有益的,如病原体与相应的抗体结合形成的IC更易被单核细胞吞噬并清除.但如果IC因某些原因在体内不能被迅速清除,则会在局部沉积,激活补体,并在血小板、中性粒细胞参与下,引起一系列连锁反应.
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过敏性鼻炎与感冒不一样
过敏性鼻炎是由于鼻粘膜接触过敏原如螨虫、花粉、尘埃、真菌等产生抗原抗体结合,形成的变态反应性疾病,是一种全球性的疾病.显然过敏性鼻炎不是一种严重的疾病,但它直接影响人们的日常生活,长期不愈者可并发支气管哮喘和渗出性中耳炎.
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胰蛋白酶-尿素联合消化增强石蜡切片免疫组化敏感性
胰蛋白酶和尿素均能明显地增强石蜡切片免疫组化的敏感性染色、降低背景[1],但胰蛋白酶消化力强,易脱片和破坏组织结构,而尿素消化力较弱,对多克隆抗体染色较差.针对上述缺点、我们曾对胰蛋白酶尿素联合处理的石蜡切片进行免疫荧光染色进行初步观察[2],近来我们对常用抗体结合的抗原用胰蛋白酶-尿素联合消化,进行免疫酶组织化学染色,获得了比单纯胰蛋白酶或尿素消化更好的特异性染色结果,现报告如下.
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特发性血小板减少性紫癜患者血小板膜糖蛋白抗体检测的临床应用
特发性血小板减少性紫癜(ITP)的特征是针对血小板膜表面糖蛋白(GPs),特别是GPⅡb/Ⅲa和GPⅠ b/Ⅸ复合物的自身抗体所导致的血小板减少和紫癜,这些被自身抗体结合的血小板容易被机体的网状内皮系统清除.
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过敏咋办?
为什么老是"过敏"?过敏在医学上称为"变态反应性疾病",它是指由于外来的抗原物质与体内特异性抗体结合后产生的一系列反应,表现为组织的损伤或生理功能的紊乱.常见的过敏性疾病有过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性紫癜、急慢性荨麻疹、过敏性结肠炎、春季结膜炎等等.
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流式细胞术检测强直性脊柱炎患者白细胞HLA-B27抗原的表达及意义
HLA-B27的检测对于强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)的诊断及其发病机制的研究具有重要意义,目前国内较为普及的检测HLA-B27的方法主要包括微量淋巴细胞毒法和多聚酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法.利用荧光标记的HLA-B27单克隆抗体结合细胞表面的B27抗原,然后采用流式细胞术检测HLA-B27的表达,近年国外已有报道[1,2].