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Spurr树脂低黏度包埋剂在电镜制样中的应用
电镜制样由于步骤多,周期长,无论哪个环节有问题,都会影响效果,其中包埋剂是重要环节之一.目前普遍采用的Epon812环氧树脂包埋剂,由于易吸潮,尤其是夏季,很难制作出令人满意的超薄切片.Spurr树脂低黏度包埋剂,由于黏度低,渗透组织快,所需聚合时间短,大大缩短了制样周期.
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散在细胞的电镜制样方法
在对胸腹水、表皮下或深层组织的针吸细胞、外周血、骨髓穿刺以及精液等分散体系进行电镜样品制备时,若不采用预包埋进行固定处理,在以后的制样过程中就会造成样品的分散和丢失.对于这类分散体系的样品,即使进行多次离心沉淀也难以集中样品,会有可能错失某些发生概率较小的临床病例.通过实践,我们摸索出几种有效的方法,先将样品离心,使之成团,然后再根据样品的来源、浓度,选择不同的方法.
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两种电镜包埋剂在制样中的联合使用
LR White是芳香族交联性丙烯酸,它具有聚合时间短,易切片,染色时间短,反差强等特点.但是使用LR White包埋剂制备的样品在电镜下观察显示有部分细胞成分的颗粒较为粗大.使用PDAP(苯二甲酸二丙烯酯)制备的样品其亚微结构细腻,但是聚合时间过长(60℃ 72h),硬度较大难切片,染色时间长,污染多,反差较弱等.因此,我们设计了用PDAP渗透然后用LR White包埋的实验,就如何排除LRWhite和PDAP两者的缺点而更好的利用它们的优点进行了研究.
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绦虫及其虫卵的电镜制样探讨
在带绦虫超微结构研究中,样品制备一直存在较多困难。为配合我院研究生课题研究,我们对绦虫成虫及其虫卵的电镜制样进行了探索和改进,获得了满意的结果。
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临床肾脏穿刺超微病理诊断透射电镜制样的方法改进
肾脏疾病是临床常见的疾病之一,严重地威胁着人类的健康.随着肾脏穿刺组织病理活检技术的广泛开展,电镜超微病理诊断已成为肾脏疾病病理诊断中常规的检查方法,研究显示电镜观察对30%~50%的肾活检病例的诊断提供有价值的信息,电镜技术从过去的单纯应用于科研走向临床辅助检查,对肾脏疾病阐明病因、发病机制发挥了重要作用.同时,电镜对一些光镜认识不清的肾病能起到确定诊断、辅助诊断和分型的作用,对其他组织肿瘤的诊断、分型、识别组织来源、判断预后等,以及对肌肉的疾病、肝脏淤胆性疾病的诊断方面也都起到重要的作用.
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CVB3病毒VP1基因及其真核表达质粒的原子力显微镜图象
原子力显微镜(AFM)是一种具有原子级分辨率的超微结构研究工具.与传统的X射线衍射、电镜等方法相比,它具有分辨率高、制样简单、可在接近生理条件下成像等优点.本研究拟用AFM观察柯萨奇B3病毒(CVB3)VP1基因及其真核表达质粒,探讨AFM在观察线性和质粒DNA中的应用.
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强碱变性法制备电子自旋共振剂量测定用的牙釉质样品
牙釉质的电子自旋共振(ESR)剂量测定技术是当前用来估算核事故受照射人员辐射剂量的重要方法.使用传统的机械法制样不能彻底除去牙本质,笔者探讨了用强碱变性法制备用于ESR剂量测定的牙釉质样品的新方法[1],报道如下.
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EcoRI酶切柯萨奇B3病毒基因片段的原子力显微镜观察
以往对生物大分子的形态研究主要依靠电镜、X射线衍射、核磁共振等方法,这些技术都有一定的局限性.新近发展起来的原子力显微镜(AFM)是一种具有原子级分辨率的超微结构研究工具,与传统手段相比,具有分辨率高、制样简单以及可以在接近生理条件下成像等优点,因此在生物结构的研究中具有独特优势.本研究通过AFM对柯萨奇B3病毒(CVB3)基因片段的酶切观察,探讨AFM在生物大分子领域的应用前景.
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大鼠卵泡颗粒细胞透射电镜制样的简便取材方法
近年来,在很多妇科或更年期疾病的实验研究中,实验动物大鼠卵泡中颗粒细胞的超微结构观察是一个重要指标[1~4].由于大鼠卵巢卵泡都很小,而颗粒细胞又是半游离在卵泡液中,数量更少,因此,要得到足量的颗粒细胞进行电镜制样,并及时固定,显然取材比较困难.本实验中,我们在取材方面进行了一些技术上的处理,防止了目标细胞的流失与混淆,可以获得足量的颗粒细胞,方便制样,提高固定效果,方法简便易行,现介绍如下.
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透射电镜样品制备中常见污染问题的探讨
透射电镜生物样品制备常用的是超薄切片法,超薄切片技术的制片过程很复杂,要求很细致,稍有不慎便会造成污染,影响图片质量.本文就如何减少样品制备污染问题,总结了本实验室长期以来的制样经验,供广大电镜工作者,特别是初学者借鉴.
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透射电镜EMTP组织处理仪制样方法
对透射电镜制样国内许多学者及研究人员在标本的取材时间、包埋、染色等环节进行了有效的探索[1~3].透射电镜制样周期较长,在长时间制样过程中,传统手工制样较容易吸收空气中的水份,从而影响标本的脱水和包埋剂的浸透,并终影响电镜下的观察结果.我们采用德国LeicaEMTP组织处理仪进行制样,主要在标本脱水与浸透环节.并与常规制样进行比较,具体如下.
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肾穿刺组织远程邮寄电镜检验方法
超微结构病理检验技术正被越来越广泛地应用于临床病理检验,其中主要的应用是经皮肾穿刺超微结构病理检验.但在许多地区和医疗单位仍难以用作常规检验,究其原因主要是电子显微镜、超薄切片机等高档仪器的不普及和制样技术难度大,不易掌握.我院利用自行研制的肾穿组织电镜固定邮寄盒自1998年底开始收集院外肾穿标本,不仅解决了由于人力、物力、财力不具备开展此项业务的单位肾穿标本电镜检查问题,而且结果满意,组织微细结构固定保存良好,图像优良、反差好.
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指导研究生游离细胞扫描电镜样品制备的体会
扫描电镜是用于观察组织细胞表面的超微结构,与透射电镜不同.透射电镜是利用穿透标本的电子进行成像,是观察样品的内部结构.而扫描电镜则由于电子束冲击样品,利用从样品表面发射的二次电子成像,这样所观察的就不是样品的内部结构,而是表面的特征.指导研究生游离细胞扫描电镜样品制备,目的是注重培养学生的操作技能,参与意识,掌握扫描电镜制样的要领,真正做到教学相长.
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指导研究生电镜取材的体会
电子显微镜技术现已广泛用于科研、医学领域,用于临床诊断.对于疾病的治疗提供可靠的依据.我们电镜室工作人员主要负责电镜制样工作,但足取材是由研究生和科研人员亲自操作,标本取好后,放入2.5%戊二醛固定后送到我们电镜室.
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铁矿石取制样标准的研究
铁矿石贸易中,品质检验结果是结算的主要依据之一.取制样工作对品质检验的影响至关重要,不同取制样标准之间的差异可能导致检验结果的差异.本文以ISO标准为主,并对比其他相关标准,对铁矿石的取样、制样标准进行了研究,以期发现其中的差异,供标准的使用者参考.