首页 > 文献资料
-
用原子力显微镜检验渗出液细胞
显微镜是临床检验中不可缺少的工具,电子显微镜发明以后,使临床检验上升到了一个新的高度.比如用电镜检验头发以诊断微量元素情况等,但由于一般扫描电镜和透射电镜样品制备复杂且需要真空条件,所以至今没有广泛应用于临床常规检验.
-
电镜样品的快速制备
利用电子显微镜进行细胞的超微结构研究已成为生物科学研究领域的一个重要手段,为广大科研工作者所广泛应用。但由于电镜样品制备周期较长,制约了科研的进度,尤其制约了利用电镜做临床病理诊断的推广。近年来,随着诊断电镜学的发展,电镜样品快速制备方法受到广大电镜工作者的关注。我们通过大量实验,长期摸索,总结出一套比较满意的电镜样品的快速制备方法,报告如下。
-
豚鼠内耳毛细胞的电镜样品制备方法
内耳毛细胞的电镜样品制备较为广泛,方法各不相同.我们介绍的是较为简单的方法,多年实践经验证明这种方法容易掌握,很适合研究生进行科研课题的研究,并能达到预期目的.
-
培养细胞电镜样品制备方法
随着细胞生物学的发展,大量培养细胞实验取代了动物实验.由于培养细胞体积小而且数量少,给电镜样品制备带来一定的难度.细胞培养的方法一般分悬液式和贴壁式两种.根据观察目的及细胞培养方式的不同,培养细胞的电镜样品制备也可分成不同的几种方法.
-
防止电镜样品污染的几点体会
在电镜样品制备的工作中,常常会遇到切片污染的问题,甚至整个视野出现一些细小的颗粒,直接影响着电镜样品的观察研究.尤其是对初学者,当遇到切片污染时,如何分析污染的原因,少走弯路.准确找出解决污染的办法,我的体会是:首先要确定是那一类污染,然后找出污染的原因,采取相应的措施,杜绝污染的发生.
-
肝窦内皮细胞窗孔扫描电镜样品的制备及观察
目的:探讨肝窦内皮细胞窗孔扫描电镜样品的制备方法及观察其超微结构.方法:分别取经过灌注冲洗预固定和未灌注冲洗预固定的两组标本,经戊二醛前固定和四氧化锇后固定,稍延长水洗和脱水时间,两组均控制六甲基二硅胺烷干燥和真空干燥,采取多次短时的方式进行离子喷镀;电镜下观察肝窦内皮细胞的超微结构.结果:灌注冲洗预固定组电镜下观察肝组织结构较清晰,肝窦暴露内皮细胞,易见肝窦内皮细胞窗孔.结论:本文为制备肝窦内皮细胞窗孔的扫描电镜样品提供了有效的技术手段.
-
指导研究生游离细胞扫描电镜样品制备的体会
扫描电镜是用于观察组织细胞表面的超微结构,与透射电镜不同.透射电镜是利用穿透标本的电子进行成像,是观察样品的内部结构.而扫描电镜则由于电子束冲击样品,利用从样品表面发射的二次电子成像,这样所观察的就不是样品的内部结构,而是表面的特征.指导研究生游离细胞扫描电镜样品制备,目的是注重培养学生的操作技能,参与意识,掌握扫描电镜制样的要领,真正做到教学相长.
-
超声波在电镜样品制样过程中的应用
骨组织尤其是密质骨 ,其矿物质(又称骨盐)干重约占骨的65%~75%.其中95%是固体钙和磷,钙磷固体以结晶的羟基磷灰石形式存在,不溶于水,它使骨质十分坚硬,采用常规电镜样品制样方法 ,超薄切片困难,因此用于电镜观察的骨组织通常都需经过脱钙处理.络合剂乙二胺四乙酸 (ethylene diamine tetraacetic acid,简称EDT A)是常用的脱钙剂.对于1×3×0.2mm3体积的骨片,在常温下EDTA常规的脱钙时间需20d左右,致使骨标本的电镜制样周期很长.实验过程中我们发现应用超声波对骨组织进行脱钙,可大大缩短骨标本的电镜制样周期.取正常SD大鼠股骨中段,剪成面积约1×3mm2的小骨片,迅速投入4%甲醛-5 %戊二醛混合固定液中(0.1mol/L磷酸缓冲液配制,pH7.4),4℃固定2h 以上,再用0.1mol/L磷酸缓冲液漂洗3次,每次15min,分成二组进行脱钙. ①超声实验组:样品投入5%脱钙液,并用21kHz超声波,水浴内对浸泡在脱钙液内的样品进行连续辐照,持续时间为20min,随后静置在室温.如此超声辐照每天一次,持续7d.每隔24h更换脱钙液一次.②对照组:依常规脱钙程序,样品投入脱钙液于室温静置,每隔24h更换脱钙液一次,持续20d.脱钙后的样品,经磷酸缓冲液漂洗,1% 四氧化锇后固定2h,梯度乙醇逐级脱水,丙酮置换,国产618环氧树脂浸透后包埋,L eica公司 Reichert Ultrcut E超薄切片机切片(切片厚度约60n m),醋酸双氧铀和枸橼酸铅双重染色,后经JEOL公司JEM-1200EX透射电镜观察、摄片.实验结果表明,经超声脱钙7d实验组的骨组织在切片过程中未遇困难,电镜下观察,间质胶原微纤维上未见无机盐结晶,周期性横纹清晰可辨,骨陷窝内的骨细胞保存完好,未发现线粒体与内质网的形态改变.细胞核卵圆形,核膜完整,基本达到了与常规方法脱钙相同的实验效果.说明超声EDTA方法是一种简便、有效的骨组织脱钙技术.因而克服了常规骨组织电镜样品制备周期长的缺点.
-
血细胞超薄切片制备的质量保证
随着对血液病研究的深入,超薄切片技术已广泛应用于血液学诊断的科研和教学工作.熟悉电镜样品制备的原理,掌握该技术,并制备出一张优质的超薄切片是一位优秀的电镜技术工作者必备的技能,现就血细胞超薄切片制备中的质量问题进行说明.
-
单用叔丁醇和戊二醛的扫描电镜样品制备技术探讨
单用叔丁醇扫描电镜样品制备法是在叔丁醇冷冻干燥法的基础上作适当改良,以叔丁醇代替酒精脱水,不需置换直接进行叔丁醇冷冻干燥,后固定的锇酸价格昂贵,必须依靠进口.用戊二醛单固定处理的样品能达到双固定的效果,提高了部分生物样品的制备速度和质量,为制备扫描电镜样品提供了一条简易而快速的制备方法,现将制备方法报道如下.