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微柱凝胶法在血型鉴定和交叉配血中的应用
目的 分析微柱凝胶法在输血科的应用,以更好、安全、有效地指导临床输血.方法 分别采用微柱凝胶法,抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体)进行血型鉴定2 025人次,微柱凝胶卡氏法、聚凝胺法交叉配血1 220人次,进行比较分析.结果 在血型鉴定中有8例假阳性,假阳性率为0.39%.在交叉配血中有12例假阳性,假阳性率为0.74%.结论 微柱凝胶法在血型鉴定和交叉配血上灵敏度高,用血量少,操作简便,结果易于保存时间长,使临床输血更安全、有效.
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弱D型输血致产生抗-D抗体引起配血不合一例
患者男,43岁,维吾尔族,"A"型,有输血史,于2003年5月15日到新疆阿克苏地区第一人民医院住院,住院后患者Hb为70g/L,故申请输血,因医院没有要求Rh阴性血,故血站供给"A"型Rh阳性全血,后经医院检验科聚凝胺介质配血,主侧管呈强阳性反应,次侧管为阴性反应,故申请血站进行交叉配合实验,经血型、血清学试验检测发现患者为Du型输血致产生抗-D抗体引起配血不合.
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聚凝胺增强Ror2重组腺病毒感染K562细胞效应的研究
目的 探索应用聚凝胺(polybrene)试剂增强Ror2重组腺病毒对K562细胞转染效率的技术.方法 在K562细胞中分别加入0~12μl Ror2重组腺病毒,摸索佳重组腺病毒用量;同时加入0~5μg/ml polybrene和佳重组腺病毒用量,培养1~3d后,在荧光显微镜下计数,对比加入polybrene前后被感染的细胞数.台盼蓝染色观察重组腺病毒引起K562细胞死亡的情况.采用RT-PCR和Western blotting检测Ror2基因的表达情况.结果 Polybrene浓度为3μg/ml和重组腺病毒8μl时,感染效果佳,对细胞生长影响较小,实验组感染效果是对照组的17倍;加入polybrene后,外源性Ror2mRNA和蛋白表达水平均明显增高.结论 Polybrene能显著增强重组腺病毒感染K562细胞的作用,并能高效表达外源性Ror2基因,该法简便、价廉、有效,是血液疾病分子生物学研究的一个良好策略.
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聚凝胺方法在新生儿脐血血型鉴定的临床应用
目的 研究聚凝胺方法在新生儿脐血血型鉴定的应用.方法 通过盐水卡片凝集试验、盐水试管凝集试验、聚凝胺试验三种方法对新生儿脐血血型鉴定的对比分析.结果 盐水卡片试验积分为2856,盐水试管凝集试验积分为3506,聚凝胺试验积分为5442.结论 聚凝胺凝集试验能明显增强凝集反应,有利于新生儿血型的判断和终血型的鉴定.
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聚凝胺法与微柱凝胶法在交叉配血中应用效果比较
聚凝胺试验(MPT)近几年刚从国外传入国内,它作为输血前试验正在国内许多医院血库常规应用[1].微柱凝胶试验(MGT)在国外输血领域已作为常规方法应用,而在国内只在少数实验室应用.为找到一种既方便又灵敏的配血方法,自2003年起,笔者对在工作中碰到的MPT交叉配血阳性标本及MPT法阴性但有可能有抗体存在的标本再用MGT法进行配血,现将结果报道如下.
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9498次聚凝胺交叉配血的总结
我院血库2000年4月~2002年12月底常规地采用了ABO、Rh正反定型和聚凝胺交叉配血达9498次,成功杜绝血型错误,避免了3次不完全抗体存在的溶血性输血不良反应,我们分别进行了血型及不完全抗体的进一步检查鉴定,收效显著,并受到医患一致赞誉.现总结报告如下:
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聚凝胺交叉配血试验在临床输血中的应用分析
目的:探讨聚凝胺交叉配血试验保障临床输血安全的作用。方法对我单位2012年1月-2013年12月间494例输血患者与同型供血者进行聚凝胺法交叉配血试验。结果在494例样本中,聚凝胺法试验中共发现3例由冷凝集所造成的假阳性;2例是因IgG类不规则抗体所导致的配血不合。结论聚凝胺交叉配血试验可有效检出IgG类不规则抗体,从而确保临床输血的安全,是一种值得推广的配血方法。
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检验工作中的点滴经验
从事检验工作十几年来,笔者觉得检验知识涉及范围很广泛,需要自己认真学习和总结的知识很多,只有这样在具体的工作中才能应用自如,下面就工作中遇到的几种特殊情况作一总结,希望与同行共同探讨。
1输血方面
随着科学技术的发展,检验新技术、新项目日新月异,体现在检验领域的各个方面,尤其输血技术,为了更加安全的目的,出现了多种先进的配血方法,如聚凝胺、木瓜酶法,微柱法等,各种方法各有其优点,成为盐水配血很好的补救措施,使输血更加安全。在交叉配血过程中,笔者接触到两种特殊情况,以期给同行一点参考。 -
交叉配血中"O"型血误判为"AB"型1例
患者,84岁,因股骨颈骨折住院,术前由病房护士抽血送至我科进行检验.初次检查为"AB"型,Rh(D)阳性,于次日手术后因血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞计数(RBC)都低于正常而需输血,随即用玻片法和聚凝胺两种方法进行配同型 "AB"型血,结果两种方法都配血不合,两侧都发生凝集,再次配血还是不合.
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输血前不规则抗体筛查方法的比较
红细胞血型系统中有大量的抗原,相应的也有大量的特异性抗体识别这些抗原,血型抗体在红细胞血型的研究和应用中,占有十分重要的地位.红细胞血型抗体的主要功能是与红细胞的表面抗原结合,通过补体作用,导致红细胞破坏,产生血管内或血管外溶血[1].不规则抗体是指不符合ABO血型系Landsteiner法则的血型抗体,包括ABO亚型抗体和非ABO血型系统的抗体,多数为免疫性抗体(IgG性质),在37℃具有较高的活性,在盐水中不能凝集红细胞,必须通过其他介质,如酶、低离子强度溶液、抗人球蛋白、聚凝胺等才能使致敏的红细胞出现凝集.目前,输血仍然是现代医学不可替代的治疗手段,确保安全、有效是临床输血的关键,而不规则抗体中IgG性质的抗体是引起溶血性输血反应的主要原因之一,同时也是引起新生儿溶血病或使输入红细胞存活时间缩短的原因之一[2].因此快速准确地筛查出患者体内的不规则抗体对安全输血具有重要意义.我科室对2011年1月至12月临床科室要求备血或输血的患者进行不规则抗体筛查,比较聚凝胺法和微柱凝胶法的结果,现报告如下.
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太原地区正常献血者血浆中不规则抗体筛选的调查分析
不规则抗体是指除ABO以外的血型抗体,是临床引起溶血性输血反应和新生儿溶血病以及习惯性流产等的重要因素之一,有IgM和IgG两种抗体,IgM抗体由于其分子大,在盐水介质中就可凝集,而IgG抗体由于是单倍体分子,所以必须借助其他介质才可以检测到,本文对12 800人份正常献血者的血浆,先在盐水介质中观察是否有IgM不规则抗体,再用聚凝胺对其血浆(或血清)进行IgG不规则抗体的筛选,然后对其进行30%的随机抽取用抗人球蛋白试验进行筛选,比较两种不同的方法对不规则抗体的检出率和相合率,现报告如下.
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太原地区正常献血者血浆中不规则抗体筛选的调查分析
不规则抗体是指除ABO以外的血型抗体,是临床引起溶血性输血反应和新生儿溶血病以及习惯性流产等的重要因素之一,有IgM和IgG两种抗体,IgM抗体由于其分子大,在盐水介质中就可凝集,而IgG抗体由于是单倍体分子,所以必须借助其他介质才可以检测到,本文对12 800人份正常献血者的血浆,先在盐水介质中观察是否有IgM不规则抗体,再用聚凝胺对其血浆(或血清)进行IgG不规则抗体的筛选,然后对其进行30%的随机抽取用抗人球蛋白试验进行筛选,比较两种不同的方法对不规则抗体的检出率和相合率,现报告如下.
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微柱凝胶与聚凝胺交叉配血试验比较
目的:探讨应用微柱凝胶与聚凝胺技术交叉配血试验时,误判和漏检的因素.方法:应用微柱凝胶卡和聚凝胺技术与受血者的抗凝血标本做交叉配血试验.结果:5 820例次的交叉配血试验中, 两种交叉配血试验共同出现阳性结果的有22例,聚凝胺交叉配血试验出现阴性结果2例.结论:应用微柱凝胶技术的交叉配血试验,易引起假凝集.微柱凝胶技术操作过程的标准化、结果易判断、敏感性高、特异性强等规范化要求.聚凝胺交叉配血试验,易引起假阴性,结果易判断、操作过程不易规范化.
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对聚凝胺配血技术的改进实现"1+1"交叉配血
同时进行盐水交叉配血和聚凝胺交叉配血,称为"1+1"交叉配血.过去传统方法是盐水交叉配血,它只能检测完全抗体,近年来聚凝胺配血技术得到广泛应用,该方法敏感性高,操作简便、快速[1,2],对不完全抗体和不规则抗体检测十分有效,为了临床输血更安全,要求配血时两种方法同时进行,取长补短,发挥高效,我科血库通过几年的实践应用,对聚凝胺配血方法的第一步和第二步之间加一步"离心",在同一方法同一试管中,实现两项配血技术,即"1+l"交叉配血.
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多次输血引起抗-c抗-E所致配血不合1例
1 病例报告患者,男,53岁.因外伤致左股骨头坏死入院.入院前曾因上消化道出血3次住院输注红细胞悬液共11U.本次拟行手术治疗,术前申请用血600 ml.经查血型O,Rh(+).盐水中主侧配血不凝集,无溶血,聚凝胺中出现凝集.不完全抗体鉴定,患者血清中含有抗-E.与E抗原阴性同型洗涤红细胞配血相合,术中输注2U.术后第2天,再次申请用血2U,与E抗原阴性红细胞配合,盐水中主侧不凝集,无溶血,在菠萝酶及抗球蛋白介质中均发生凝集.
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抗-E引起配血不合1例
1 临床资料患者刘立伟,男,31岁,2000年9月患慢性粒细胞白血病(CML),曾多次反复输O型全身,无不良输血反应.2001年5月慢性粒细胞白血病急变,又输800ml全血.2001年5月25日输血前做交叉配合试验(聚凝胺方法)时,其中1袋血主管出现凝集,怀疑患者血清中含有意外抗体.
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微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体的对比分析与研究
目的 比较微柱凝集和聚凝胺法的灵敏度和重复性,为不规则抗体的检测更新方法.方法 使用微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体,对比观察2种方法检出的阴、阳性结果和重复检验的准确性,从而选择灵敏度高和重复性好的方法满足临床输血需要.结果 从18 000例住院患者中用微柱凝集筛选出不规则抗体阳性19例,阳性率为0.105%,其中D抗体7例,E抗体5例,C抗体3例,Ec抗体3例,Ce抗体1例;用聚凝胺法检测不规则抗体,仅有阳性为2例,阳性率为0.011%,2种方法比较差异有统计学意义(P<0.05);重复性检验:微柱凝集(19/19)和聚凝胺(2/2)均为100%,2种方法差异无统计学意义(P>0.05).结论 用微柱凝集检测不规则抗体能显著提高抗体的检出率,可避免漏检而降低输血反应的发生率.
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聚凝胺对免疫球蛋白比浊测定的增强效应
目的研究低离子聚合物Polybrene对透射免疫比浊测定的增强效应。方法应用聚乙二醇和Polybrene建立了一种新的检测体系,双试剂、双波长、两点终点法检测免疫球蛋白含量。结果 Ig低检测浓度为1 mg/L,脂血(Trig<4.0 mmol/L)、黄疸(T Bil<70 μmol/L)、和溶血(Hb<10 g/L)对测定无影响。批内CV分别为3.25%和2.67%,批间CV分别为3.5%和3.13%,与进口试剂相比较,结果无显著性差异,P>0.05。结论 Polybrene可明显增加检测吸光度,提高检测灵敏度。
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高滴度IgM抗-E合并IgG抗-c患者的大量输血
因各种不完全抗体引起配血不合的报道较多,原因多由一种抗体引起,但因IgM型合并IgG型的不完全抗体引起的配血不合则较为少见.IgM抗-E在0.9%NaCl溶液(以下简称生理盐水)介质中即可检测到,但Rh系统中抗体引起配血不合多见于IgG抗-E、抗-C、抗-c,而此类抗体需在特殊介质中(如聚凝胺介质、酶介质、抗人球蛋白介质等)能检测到.本文现将1例特殊的患者输血处理情况报道如下.
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聚凝胺及抗人球蛋白法在AA-PNH患者疑难配血中的应用
再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征(Aplastic anemia-Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria syndrome,AA-PNH)为临床较罕见疾病,患者病程长,长期依赖输血.由于反复接受异体血液的刺激,患者体内较易出现同种免疫性抗红细胞抗体,这些抗体绝大多数为不规则抗体,易引发溶血性输血反应(HTR)和临床配血困难.