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酶法测定血清钙的方法学评价
目的:对脲酰胺酶(urea amidolyase)法测定血清钙进行方法学评价,探讨脂血.溶血等对其测定的干扰影响.方法:用脲酰胺酶法测定血清钙,按NCCLS评价方案系统评价其重复性、回收率、线性范围和脂血、黄疸、溶血、NH4+和Mg2+对血清钙测定的干扰影响,并与偶氮胂Ⅲ(Arsenazo Ⅲ)法测定血清钙相关性进行分析.结果:脲酰胺酶法与偶氮胂Ⅲ法有良好的相关性(y=1.046x+0.096,r=0.972,P=0.000);脲酰胺酶法测定血清钙浓度在0.5～4.5mmol/L性良好(r=0.997),检测低限为0.19mmol/L,批内变异为2.02%,日间变异为2.87%,回收率为98.9%;胆红素340μmol/L、血红蛋白500g/L.TG7.0mmol/L.NH4+ 2.5mmol/L、Mg2+ 3.5mmol/L无明显干扰.结论:脲酰胺酶法测定血清钙具有线性范围宽、抗干扰能力强、准确性高等特点,值得推广应用.
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尿肌酐检测影响因素
肌酐(creatinine,Cr)主要是由肌肉产生的低分子量含氮化合物,是肌酸的终末代谢产物.血液中的肌酐通过肾小球滤过,从尿中排出体外,肌酐在体内含量较为恒定,在肾脏功能损伤不严重时,尿液中肌酐的排泄很少受尿液稀释以及浓缩的影响,因此通常用尿液中肌酐含量作为尿中其他物质排泄的参照物[1].尿肌酐校正尿微量白蛋白可替代24 h留尿检测尿微量白蛋白研究[2-3]、随机尿微量白蛋白与糖尿病、高血压早期肾损伤研究[4-6],尿微量白蛋白/尿肌酐比值与心血管病相关性研究中均用尿肌酐进行校正[7-8],在开展尿液污染物、重金属等研究中,都用到了尿肌酐含量校正[9],故尿肌酐检测的准确性至关重要.
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水产品的生物保鲜技术
水产品味道鲜美，营养丰富，深受人们喜爱。水产品具有的蛋白质属优质蛋白，水分较大，与畜肉不同的是结缔组织较少，易腐败变质。为后续的储运、加工、销售中带来很多的不变。目前，常应用于水产品保鲜的技术主要有低温保鲜、化学保鲜、气调保鲜和辐照保鲜等。本文主要介绍微生物保鲜技术和酶法保鲜技术。
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食品生产中酶制剂的应用
酶制剂在肉类原料综合利用的作用在肉类分割和加工过程中,很多优质的蛋白质资源由于得不到很好的提取和深加工而白白的浪费或低价处理,利用酶法对肉类原料的综合利用,可以很好的提高原料的利用率,带来可观的附加利润,并为您的肉类产品提供更好的风味、更好的食品安全性和更丰富的营养.诺维信独特的专用酶组合,能够大程度的将这些蛋白质资源转化为特征风味浓郁、口感鲜美的肉类提取物(MPE).
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低密度脂蛋白胆固醇直接法测定值与计算值的相关性研究
目的探讨酶法测定TG、TC条件下的LDL-C的测定值与利用Friedewald[1]公式计算值的相关性.方法氧化酶法测定TG、TC,直接高、低密度脂蛋白胆固醇测定法测定HDL-C和LDL-C,然后比较LDL-C的测定值与计算值.结果与结论当TG、TC在一定范围内LDL-C的测定值与计算值无多大差异,否则有明显差异.
关键词： 酶法 LDL-C的计算值 LDL-C的测定值 Friedewald公式 -
应用电极法和酶法测定血清K+、Na+、Cl-浓度的实验对比
目的:比较酶法、离子选择电极法测定血清钾离子浓度的不同实验结果.方法:收集本院80例正常标本,分别通过酶法、电极法实验测定其血清钾浓度.结果:线性范围与平均回收率上,两种方法均符合要求,批内、批间CV值均为正常值,电极法较酶法更具优越性,两种方法K+、Na+、Cl-测定系数为0.976 5、0.968 6与0.952 3(P ＞0.05),溶血样品对K+测定有显著正干扰,高脂血样品对酶法测Na+、CL-则有显著性负干扰,但对电极法无干扰.结论:经实验比较,两种方法均符合要求,但电极法较酶法更具优越性.
关键词： 电极法 酶法 血清K+、Na+、Cl- 实验 -
金标法与酶法检测心肌梗死标志物的临床应用
目的:探讨急性心肌梗死(AMI)标志物金标法与酶法检测在临床应用的价值.方法:采用金标法,快速检测病人血清中肌红蛋白(MB),肌酸激酶同工酶(CK-MB),心肌钙蛋白(TnI);采用酶法检测谷草转氨酶(AST),肌酸激酶(CK),CK-MB,乳酸脱氢酶(LDH),乳酸脱氢酶同工酶(LDH1)等.用两种方法同时检测68例心血管内科病人的血液标本.结果:68例中,47例AMI全部检查项目均超过正常值;21例其它心血管疾病中,有2例全部结果均在正常范围,另19例有部分项目超过正常值.结论:金标法诊断AMI特异性高;酶法诊断AMI敏感性高,但特异性较金标法低.
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墨旱莲多糖的酶法提取工艺优选
目的:优选酶法提取墨旱莲多糖的工艺条件.方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,以多糖提取率和蛋白质含量的综合评分为指标,采用单因素试验筛选酶的种类.以多糖总提取率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察酶用量、酶解温度、酶解时间、pH对墨旱莲多糖提取工艺的影响.结果:选用纤维素酶,佳提取工艺条件为pH 5.0,纤维素酶用量3％,酶解时间3h,酶解温度50℃.结论:酶解水提法可显著提高墨旱莲多糖的提取率.
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半仿生提取法在中药提取中的应用
提取是中药制药工程的关键环节,直接影响着药品的质量,提取新技术的发展是中药制造工业技术升级转型的关键,关系着中药现代化的进程.作为一种新兴的提取技术,半仿生提取利用“灰思维方式”,根据中药大部分药效成分未知的特点和中药物质基础整体特征,采用模拟口服给药经胃肠道吸收和转运的过程,得到有效成分更高的活性混合物.本文总结了半仿生提取技术在中药提取中的应用,并对近年来出现的新技术(微波、超声波及酶法)辅助半仿生法在中药提取中的应用进行总结,结果表明相对于传统提取技术,半仿生提取技术具有明显的优势,应用前景良好.
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酶法提取竹节参中多糖成分的工艺研究
目的:研究酶法提取竹节参中多糖成分的工艺.方法:以多糖得率为考察指标,采用正交试验法对竹节参中多糖成分酶法的提取工艺进行优选.结果:优化后的提取工艺为pH 5.0,50℃,料液比为1:50,纤维素酶的质量分数1.2%,果胶酶的质量分数1.0%,酶解时间2 h,90℃灭酶和浸提2 h,多糖得率为14.3%.结论:酶法能有效提高竹节参多糖成分的得率.
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酶法在中药提取中的应用和进展
作者对酶法在中药提取中的酶解作用机制、提取工艺以及目前在中药有效成分提取中的应用情况进行文献综述,分析酶法用于中药提取的现存问题,并对酶法在中药提取中的应用进行了展望.
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CX9生化分析仪电极法和酶法测定血糖的结果比较
目的评价CX9生化分析仪电极法和酶法检测血糖的可靠性及临床应用情况.方法采用电极法和酶法对血糖含量测定的准确性、精密度及方法间的相关性进行比较.结果两种方法的线性范围、回收率符合要求,重复性良好,批内批间cv均在允许范围内.电极法与酶法的相关性比较,两者的相关系数为r=0.997,(p>0.05).结论电极法是一种准确,快速的检测方法,适合急诊检验,而酶法结果稳定,但检测所需时间长,适合常规批量检验.
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血清肌酐测定方法的研究
目的 建立血清中肌酐浓度的测定方法 .方法 采用肌酐酶水解样品中的肌酐生成肌酸,肌酸在肌酸酶的催化下生成肌氨酸,然后在肌氨酸氧化酶的作用下氧化生成的产物过氧化氢.通过Trinder反应可计算出样本中肌酐的含量.结果 本法的线性为0～8800μmmol/L,精密度:批内变异系数(CV)＜2.0%,回收率为98%～101%.本法(Y)和日本东洋坊试剂(X)比较(r=0.998).结论 研究建立的酶法测定血清中肌酐具有准确度及精密度高,线性范围宽,抗干扰能力强,值得推广应用.
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酶法测定糖化血红蛋白的临床应用
目的 对在全自动生化分析仪上用酶法测定糖化血红蛋白(HbAlc)进行临床应用评价.方法 用高效液相色谱法(HPLC)和酶法测定HbAlc,对其精密度、线性范围、相关性、干扰试验进行分析,以探讨酶法测定HbAlc的可靠性.结果 酶法的批内平均变异系数(CV%)为2.54%,批间平均CV%为2.75%(都在允许误差5%的范围内),均低于HPLC法的批内和批间的平均CV%值3.41%和3.55%.HbAlc在4%～16%的范围内线性良好(γ=0.9980),两种方法具有良好的相关性,y(HbAlc)= 0.9957x +0.102,r=0.9965,两种方法测定结果差异无统计学意义(P>0.05),酶法测定HbAlc有较高的可靠性;当甘油三酯(TG)<8.9 mmol/L,胆固醇(TC)<8.1 mmol/L,胆红素(TBil)<824 μmol/L时,使用酶法测定对结果无干扰.结论 酶法比HPLC法具有更好的精密度,且快速、准确,能适用于各种自动化分析仪,易于推广使用.
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不同方法测定人血清、全血乙醇浓度的结果分析
目的:研究不同测定方法、人不同标本类型血清、全血乙醇浓度的结果分析.方法:收集进行人血液乙醇浓度司法鉴定的样本共60例,每例用EDTA真空采血管和普通干燥真空采血管采集标本各2份.用顶空气相色谱法和生化酶法检测不同样本类型血中乙醇的含量.采用SPSS 20.0统计软件进行处理,采用配对样本t检验比较不同方法测量乙醇浓度的差异以及不同标本类型乙醇浓度的差异,以P＜0.05为有统计学意义.结果:①全血中乙醇含量与血清乙醇含量用顶空自动进样气相色谱法检测结果比较,差异有统计学意义(t=12.62,P＜0.01);②血清乙醇含量用顶空气相色谱法检测结果和用贝克曼生化仪酶法检测结果比较差异有统计学意义(t=3.34,P＜0.01).结论:气相色谱法检测全血、血清中乙醇浓度比较差异有统计学意义;气相色谱法检测血清乙醇浓度和生化仪酶法检测血清中乙醇浓度差异有统计学意义.为保证测定结果的准确性,评价不同测定方法以及不同标本类型对乙醇检测结果的影响很有必要.
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酶法与苦味酸法测定血清肌酐差异的Meta分析
目的采用Meta分析的方法比较酶法与苦味酸法对血清肌酐在不同水平段的测定差异。方法计算机检索中国期刊全文专题数据库、万方电子期刊、中国科技期刊数据库所收录的在国内发表的有关酶法与苦味酸法测定血清肌酐对照研究的文章，采用 RevMan 5软件对符合条件的文献进行分析。结果共有9篇文献纳入本次研究，包含有2545例患者的血清样本，依血清肌酐水平，将数据分为低（＜130μmol/L）、中（130～500μmol/L）、高（＞500μmol/L）三组。当血清肌酐浓度低于130μmol/L时，酶法所测血清肌酐值小于苦味酸法测定结果[WMD＝-29.44，95％ CI（-32.76，-26.13）]，当血清肌酐浓度介于130～500μmol/L时，酶法所测血清肌酐值小于苦味酸法测定结果[ WMD＝-11.80，95％ CI （-19.09，-4.52）]，当血清肌酐浓度高于500μmol/L时，酶法所测血清肌酐值大于苦味酸法测定结果[ WMD＝31.88，95％CI（11.44，52.32）]。结论根据目前证据可认为：当血清肌酐浓度低于500μmol/L时，酶法测定结果低于苦味酸法；当血清肌酐浓度高于500μmol/L时，酶法测定结果高于苦味酸法。
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常见肌酐测定方法中存在的干扰
目的 探讨目前常见肌酐测定方法中存在的干扰。方法 以漂白土（fuller′s earth）吸附法为标准，对Jaffe′氏反应速率法、紫外法、比色法和电极法进行方法学评价。结果 在所采用的8种干扰物(丙酮酸钠、α-酮戊二酸、胆红素、血红蛋白、肌酸、多巴胺、抗坏血酸、地塞米松)中，Jaffe′氏反应速率法受干扰物影响大，α-酮戊二酸(≥0.061 5 g/L)、抗坏血酸(≥0.82 mmol/L)、丙酮酸钠(≥0.186 mmol/L)对该法有正干扰，而胆红素(≥165.5 μmol/L)则有明显负干扰；紫外法基本不受干扰物影响；比色法不仅受肌酸(≥0.21 mmol/L)的正干扰，而且也受多巴胺(≥0.28 mmol/L)的负干扰；电极法仅受到肌酸(≥0.62 mmol/L)的正干扰。结论 紫外法是目前测定肌酐好的方法。
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结合胆红素酶法测定的一种新方法
目的建立一种特异性更高的酶法血清结合胆红素(CB)测定的新方法.方法在pH 5.5、有氟化钠(NaF)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)的存在下,胆红素氧化酶(BOD)选择性氧化CB,引起450 nm吸光度下降,计算CB的浓度.结果批内精密度,n=20, =17.65 μmol/L,s=1.15,CV=6.52%和=301.49 μmol/L,s =1.01,CV=0.33%;批间精密度,n=20,=31.50 μmol/L,s=3.12,CV=9.90%和=184.12 μmol/L,s=5.01,CV=2.72%;线性范围至少可达320 μmol/L;选择性抑制物的适浓度,NaF 2.5 mmol/L, NAC 2.5 mmol/L;与重氮法的相关性,Y (酶法)=0.839X (重氮法)-7.965, r=0.969 0.结论该研究建立的反应条件,能有效地抑制BOD对游离胆红素的"非特异性"氧化,提高CB测定的准确性.
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PCR限制性内切酶法在苯丙酮尿症突变基因诊断中的应用
苯丙酮尿症(PKU)是一种常染色体隐性遗传病,由苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变导致肝脏PAH酶活性降低或丧失所致.临床表现为不可逆的智力发育迟滞、癫痫等症状.新生儿筛查显示,PKU在中国人群中发病率为1/11 000[1].在中国人pah基因的已知突变中,一些突变改变了基因序列中限制性内切酶的酶切位点.为此,我们应用PCR限制性内切酶法(PCR-RFLP)直接检测一些改变了限制性内切酶酶切位点的突变基因.
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肌酐酶法试剂盒在OLYMPUS自动生化分析仪的应用
临床实验室肌酐测定方法从早的全血肌酐碱性苦味酸法(Jaffe)到血清肌酐苦味酸比色法［1］，又发展为同一原理的速率法［2］。我们对Jaffe氏反应原理的肌酐速率法和肌酐酶法在OLYMPUS-AU600 自动生化分析仪上的测定结果做了分析比较。 一、材料和方法 1.试剂：(1)上海长征康仁医学科学有限公司生产的肌酐酶法试剂盒，批号 D80315及苦味酸速率法试剂盒，批号：60110。(2)肌酐标准液浓度为440 μmol/L，由长征康仁公司生产批号：35940。血清标本：来源于内蒙古医学院第一附院患者。 仪器：日本OLYMPUS-AU600型全自动生化分析仪。 2.肌酐酶法(PATE)：波长 340 nm，温度37℃，双试剂，样品：试剂1∶试剂2为20∶200∶40。启动试剂3 min后加入，反应时间3.9 min到6.3 min，读取吸光度变化。肌酐苦味酸速率法(FIXED)，波长520 nm，温度37℃，单试剂，样品：试剂为20∶200。反应时间，54 s至126 s，读取吸光度变化。标准type 4点定标，浓度分别为110、220、330、440 μmol/L，公式：X=AY2+BY+C。 二、结果 1.线性试验：将高值肌酐血清(H)与正常混合血清(L)按下表比例混合测定血清肌酐，测定结果见表1。
