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CLIA与RIA测定血清β-HCG的对比分析
HCG是一种分子量为39000的糖蛋白,由胎盘滋养层细胞合成和分泌,其分子结构包括α、β两个亚单位.由于其α亚单位与LH、FSH和TSH的α亚单位相似,存在免疫交叉反应,而其β亚单位与LH等不同,故测定β亚单位意义更大.β-HCG的测定,在早期妊娠、先兆流产、流产不全、绒毛膜癌和恶性葡萄胎的诊断、监测及疗效观察方面有重要意义.目前实验室测定血清β-HCG的方法有RIA、EIA和化学发光免疫分析(CLIA)等.本文应用CLIA和RIA同时对β-HCG不同浓度混合血清及50份标本进行检测,并进行对比分析,现报道如下.
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零值混合血清和生理盐水对PSA高浓度稀释的影响
近年来,老龄男性前列腺癌肿发病率升高.临床对PSA>150ng/mL的高浓度样品,需要作稀释后再复检以便提高诊断的可靠性.本文探讨用生理盐水及女性PSA零值混合血清作稀释介质,分别对同一高值PSA样品倍比稀释测定并作回收率试验及胶体稳定试验.现报道如下.
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肌酐酶法试剂盒在OLYMPUS自动生化分析仪的应用
临床实验室肌酐测定方法从早的全血肌酐碱性苦味酸法(Jaffe)到血清肌酐苦味酸比色法[1],又发展为同一原理的速率法[2]。我们对Jaffe氏反应原理的肌酐速率法和肌酐酶法在OLYMPUS-AU600 自动生化分析仪上的测定结果做了分析比较。 一、材料和方法 1.试剂:(1)上海长征康仁医学科学有限公司生产的肌酐酶法试剂盒,批号 D80315及苦味酸速率法试剂盒,批号:60110。(2)肌酐标准液浓度为440 μmol/L,由长征康仁公司生产批号:35940。血清标本:来源于内蒙古医学院第一附院患者。 仪器:日本OLYMPUS-AU600型全自动生化分析仪。 2.肌酐酶法(PATE):波长 340 nm,温度37℃,双试剂,样品:试剂1∶试剂2为20∶200∶40。启动试剂3 min后加入,反应时间3.9 min到6.3 min,读取吸光度变化。肌酐苦味酸速率法(FIXED),波长520 nm,温度37℃,单试剂,样品:试剂为20∶200。反应时间,54 s至126 s,读取吸光度变化。标准type 4点定标,浓度分别为110、220、330、440 μmol/L,公式:X=AY2+BY+C。 二、结果 1.线性试验:将高值肌酐血清(H)与正常混合血清(L)按下表比例混合测定血清肌酐,测定结果见表1。
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混合血清ELISA筛检HIV-Ab的可行性研究
目的 际检测条件下,运用混合血清ELISA筛检HIV-Ab的效果.方法 利用ELISA对6份不同浓度的HIV-Ab阳性样本在不同稀释倍数下测定OD值,找出适混合比例;用佳混合比例测定6份阳性标本作重复性试验;对336份待检血清样本进行逐一法和混合血清法检测HVI-Ab.结果 混合样本为4份时,高、中、低浓度阳性标本的S/CO都呈阳性结果.该方法经重复性试验和临床实验,符合率为100%.结论 开展艾滋病监测和流行病学调查时,混合血清ELISA筛检HIV-Ab是一种经济、有效的方法.
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尿液与脑脊液总蛋白测定方法研究
蛋白质是临床生化和生物化学基础的问题.在定性与定量两个方面进行了全面的研究.①首创了考马斯亮蓝法定性尿液蛋白质;②建立了钨酸比浊法定量测定尿液与脑脊液蛋白质;③以人混合血清做蛋白标准,应用邻苯三酚红钼法;④确立了尿总蛋白/肌酐参考值,消除了尿量对蛋白测定的影响; ⑤探讨了疾病的应用价值.正常尿液与脑脊液蛋白浓度很低,测定方法相似,其临床意义重大.
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检测人绒毛膜促性腺激素水平的结果分析与评价
本文对定量人绒毛膜促性腺激素(HCG)的化学发光免疫分析法与放射免疫分析法进行双盲比较分析与评价.现将结果报告如下.1 材料与方法1.1 正常血清组分别收集经肝功能、肾功能、血脂体检合格者男性(年龄18~50岁)和女性未婚未孕者(年龄18~23岁和45~50岁)无溶血、无脂血、无黄疸的新鲜混合血清按性别分组分批用化学发光免疫分析法(A法)和放射免疫分析法(B法)同时测定批内x、s、CV%及批间x、s、CV%,和回收率试验,作为实验室参考值进行统计学处理.
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检测人绒毛膜促性腺激素水平的结果分析与评价
本文对定量人绒毛膜促性腺激素(HCG)的化学发光免疫分析法与放射免疫分析法进行双盲比较分析与评价.现将结果报告如下.1 材料与方法1.1 正常血清组分别收集经肝功能、肾功能、血脂体检合格者男性(年龄18~50岁)和女性未婚未孕者(年龄18~23岁和45~50岁)无溶血、无脂血、无黄疸的新鲜混合血清按性别分组分批用化学发光免疫分析法(A法)和放射免疫分析法(B法)同时测定批内x、s、CV%及批间x、s、CV%,和回收率试验,作为实验室参考值进行统计学处理.
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维生素C对TRINDER反应结果的影响评价
我们对报道较多的维生素C(Vc)对trinder反应的影响做了一系列相关试验,分别检测了健康人群,未使用Vc治疗患者和静脉滴注Vc患者的血清Vc实际含量;采用混合血清体外添加成含系列Vc浓度的血清后检测其CHOL、TG、UA含量的变化;检测混合血清室温放置若干时间后Vc浓度的变化,对相应结果进行了比较分析,探讨在日常临床检验工作中,血清Vc含量对CHOL、TG、UA测定的实际影响程度.
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荧光定量PCR检测 HBV-DNA、HCV-RNA室内质控物的制备及评估
荧光定量 PCR 法检测人血浆中乙肝 HBV-DNA、HCV-RNA具有较高的灵敏度和较强的特异性[1],但是检测的结果易受很多因素影响,因此严格的室内质量控制才能预防和控制检验误差,保证结果的准确性。目前,PCR检测试剂盒并未提供定值的室内质控品,且商用质控品的价格昂贵、不易获得,给常规 PCR 检测过程中室内质量控制带来不便。根据卫生部临检中心对质控品的相关规定,结合近年来临床PCR工作的基础,我们应用混合血清自制单一模式的混合血清实验室室内质控品,并根据《体外诊断试剂注册管理办法》(试行)等相关文件要求对其准确性、稳定性进行了初步评价,报告如下。
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提高胆红素标准液稳定性的方法
配制胆红素标准液一般都用混合血清作稀释剂[1、2],由于胆红素的易氧化性及血清易出现絮状沉淀等原因,致使稳定性很差.我们根据高浓度多元醇具有抗氧化及高渗抑菌作用这一机制[3],选用丙三醇加响入胆红素标准液中,配制出可长期保存使用的胆红素标准液,现报告如下.
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自制血清蛋白质电泳质控品用于室内质控的研究
目的 比较血清蛋白质电泳自制质控品和Helena质控品的性能,探讨自制质控品在血清蛋白质电泳室内质量控制中的应用.方法 用美国Helena SPIFE 2000全自动快速电泳分析系统,分别测定Helena质控品和自制质控品的批内精密度、凝胶板间的差异、自制质控品的日间精密度和稳定期.结果 自制质控品与Helena质控品相关性好,电泳后蛋白质各组分的批内CV均小于5%;2种质控品在琼脂糖凝胶板间的CV也均小于5%;自制质控品的日间CV除α1球蛋白7.36%、β球蛋白5.50%外,其余均小于5%.结论 自制质控品的性能符合室内质量控制的要求,可在常规工作中应用.
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不宜采用混合血清以ELISA检测HBsAg
有少数检验部门为了减轻工作量、节省成本,采取将5人份或10人份血清等体积混合后再测HBsAg(以下简称混合法),有关文献[1]也指出其方法不妥,但该文献 [1]对结果的解释尚欠完整.为此我们对采用混合法检测HBsAg的影响原因进行了实验探讨.1 材料与方法1.1 试剂 HBV血清标志物(HBsAg、抗-HBs)检测试剂为科华公司(批号 :HBsAg20000505;抗-HBs 2000525).
关键词: 乙型肝炎病毒表面抗原 酶联免疫吸附试验 混合血清 -
自制HBsAg定量检测低值室内质控品应用
近几年乙肝表面抗原(HBsAg)定量检测的室内质控品种少,稳定性不好,特别是生物制品的价格昂贵,限制了中小实验室室内质控的开展。用低滴度混合血清样本自制室内质控品开展室内质控,对实验室乙肝准确定量检测方便有效[1]。考虑到HBsAg和HBsAb结合而形成复合物会使混合血清中HBsAg定量不稳定,作者选取HBsAb= OmIU/ ML的血清样本作单一模式混合,并与雅培公司提供的HBsAg室内质控品比较,自制一套适合实验室HBsAg定量检测的室内质控品,应用效果满意。报告如下。
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血清混合法筛检供血者抗-HCV的应用
血清混合法筛检供血者抗-HCV的可行性及其实用价值已有学者报道[1~5].笔者通过大量试验证明血清混合法筛检血清中抗-HCV与单份血清筛检血清中抗-HCV的原理及结果完全相同.血清混合法筛检血清中抗-HCV的前景在血站系统尤为深远广阔,现将结果作一报道.
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SARS冠状病毒S蛋白部分序列1的纯化及免疫活性分析
表达和纯化SARS冠状病毒S蛋白部分序列1(S1),分析其诱导的免疫应答.大量诱导表达SARS冠状病毒S1蛋白,亲和层析予以纯化;用纯化蛋白免疫小鼠,分析S1蛋白诱导的免疫应答.亲和层析纯化获得能被SARS病人混合血清识别的S1蛋白,融合蛋白免疫小鼠三次后诱导产生了高滴度的抗体和Th1/Th2型的免疫应答.纯化的S1蛋白有良好的免疫学活性.
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实验室不同分析仪测定肌酐和尿素氮结果对比
目的 通过对肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)在不同的分析仪上进行测定,分析其结果是否具有可比性.方法 在日立7170和贝克曼Backman CX7全自动生化分析仪上参照NCCLS《EP9-A文件》要求,进行精密度,相关性试验和实验方法的系统误差(SE)及临床可接受性能评价.结果 (1)同一混合血清在两台仪器上分别测定BUN和Cr各20次,CV值为2.4~4.5.两者比较,均无显著性差异.(2)两台仪器的相关系数BuN为0.9837,Cr为0.9905,γ2>0.975,相关性能良好.(3)实验方法SE评比,BUN和Cr的医学决定水平2、3,临床均可接受,水平1,BUN和Cr临床均不可接受.结论 新购BackmanCX7和日立7170在各项性能考核中,基本一致,无显著性差异,但部分系统误差不可接受,应进行调整.
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南昌市内24家医疗机构临床实验常规生化检测项目现场调查分析
目的 为了解南昌市内医疗机构常规医学检测项目结果之间的差异,推进同级医疗机构结果互认工作.方法用新鲜混合人血清,同一时间分送南昌市内24家医疗机构实验室,现场随病人标本同时检测肝、肾功能、血脂、心肌酶谱、电解质等常规项目,当天用传真回报结果.结果 25项生化项目中21项例数合格,其中变异系数小于10%的有11个,以Na+的变异系数1.19%为小,变异系数大于10%的有10个项目,以CK-MB的变异系数119.2%为大.结论在加强质量监控的情况下,检测结果相互认可在同级医疗机构是可行的,而以疗效监测为目的 的检测项目好在同一实验室进行,结果互认没有现实意义.
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乙肝表面抗原定量检测室内质控的建立及其意义
目前卫生部门尚未提供乙肝定量检测的室内质控,而美国雅培公司提供的室内质控品成本很高,限制了室内质控的开展,所以作者认为用混合血清自制室内质控是保证乙肝准确定量检测的重要一环[1].考虑到HBsAg和HBsAb结合而形成复合物,使混合血清中HBsAg定量不稳定,故作者选取HBsAb=OmlU/ML的血清样本作单一模式混合,并与雅培公司提供的HBsAg室内质控品比较,探讨建立一套适合实验室HBsAg定量检测的室内质控.
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10家临床实验室定值冰冻人血清校准前后γ-GT测定结果分析
由多家实验室用参考方法对覆盖该测定方法测量范围的多份新鲜混合血清进行检测获得参考值结果,用于校准不同检测系统是酶学测定标准化工作的重要部分,可提高临床酶学活性测定的准确性和实验室间的可比性.
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维生素C对某些生化检测项目的干扰
我们在使用岛津CI-7200全自动生化分析仪做生化项目检测时发现,某些病人血清中的残留物质对检测项目有干扰现象,致使检测结果无法准确报导.为此我们对血清残留物进行了排除试验,后发现维生素C对一些生化检测项目有干扰.我们利用正常混合血清配成含不同浓度维生素C溶液,进行生化项目的检测[2、3],结果发现维生素C对尿酸、总胆固醇、甘油三酯、果糖胺、总胆汁酸的测定均有不同程度的扰,现将结果报告如下: