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CLIA与RIA测定血清β-HCG的对比分析
HCG是一种分子量为39000的糖蛋白,由胎盘滋养层细胞合成和分泌,其分子结构包括α、β两个亚单位.由于其α亚单位与LH、FSH和TSH的α亚单位相似,存在免疫交叉反应,而其β亚单位与LH等不同,故测定β亚单位意义更大.β-HCG的测定,在早期妊娠、先兆流产、流产不全、绒毛膜癌和恶性葡萄胎的诊断、监测及疗效观察方面有重要意义.目前实验室测定血清β-HCG的方法有RIA、EIA和化学发光免疫分析(CLIA)等.本文应用CLIA和RIA同时对β-HCG不同浓度混合血清及50份标本进行检测,并进行对比分析,现报道如下.
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天花粉蛋白治疗宫外孕的护理体会
天花粉为葫芦科植物瓜蒌的块根,含有大量的淀粉和氨基酸.它的主要药理作用是对胎盘滋养层细胞有变性、坏死及阻断胎盘血循环作用,导致胎儿死亡娩出,达到终止妊娠目的.我院于1998年1月~1999年8月,用天花粉蛋白治疗未破裂型宫外孕20例收到良好的效果.
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透射电镜及激光共聚焦技术观察体外丙型肝炎病毒感染的人胎盘滋养层细胞
目的:探讨体外分离培养的人体胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒(HCV)的可能性,以及滋养层细胞感染HCV后的超微结构改变.方法:采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞后,以HCV RNA阳性血清对滋养层细胞进行体外感染试验,应用RT-PCR法定性及定量检测感染后细胞培养上清中HCV RNA,透射电镜观察HCV感染后滋养层细胞的超微结构改变,并用激光共聚焦技术观察免疫荧光染色后HCV NS5在滋养层细胞中的定位.结果:HCV感染后的细胞培养上清中可间断检测到HCVRNA,而对照组始终未检出;激光共聚焦观察显示HCV NS5主要定位于细胞核周;HCV感染后滋养层细胞超微结构发生了明显改变,主要表现为溶酶体大量增生,粗面内质网增生,脂滴减少,出现空泡状结构,并可观察到病毒样颗粒.结论:HCV可以感染滋养层细胞,并导致滋养层细胞的超微结构发生类似黄病毒科病毒感染后的改变.
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体外感染丙型肝炎病毒的滋养层细胞超微结构变化
丙型肝炎病毒(HCV)主要经血液或血制品传播.已有研究证实,HCV存在母婴传播[1-4],其传播的途径可能为宫内传播、出生时传播和出生后的母乳、唾液传播.目前,关于HCV母婴传播的机制尚不清楚,宫内感染可能是HCV母婴传播的主要机制之一[2].本研究采用HCV RNA阳性血清,感染体外培养的人胎盘滋养层细胞,并应用透射电镜观察滋养层细胞感染HCV后的超微结构改变,现将结果报道如下.
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芳香烃受体(AhR)内源性配体ITE对胎盘滋养层细胞的增殖抑制作用及其机制
目的 研究芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)的内源性配体2-(1'H-吲哚3'-羰基)噻唑-4-羧酸甲酯(ITE)对胎盘滋养层细胞增殖的影响及其机制.方法 用免疫组织化学及Western blot检测AhR在早期绒毛和晚期胎盘组织中的表达,利用人胎盘滋养层细胞系JEG-3和JAR作为细胞模型研究ITE对胎盘滋养层细胞增殖的影响.结果 AhR主要分布于人胎盘合体滋养层细胞的胞质中,并且晚期胎盘组织中AhR蛋白的表达水平高于早期绒毛组织(P<0.05).AhR蛋白质在JEG-3中表达较高,而在JAR中几乎检测不到.ITE可诱导JEG-3细胞中AhR下游靶基因细胞色素P4501A1(CYP1 A1) mRNA的表达,该诱导作用具有剂量和时间依赖性.同时,ITE使JEG-3细胞滞留于细胞周期的S期,进而抑制细胞的增殖.结论 ITE通过激活AhR信号通路抑制胎盘滋养层细胞的增殖,该抑制作用主要通过调节细胞周期的改变来实现.
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ki67蛋白在胎盘组织中的表达
随着妊娠进展,胎盘滋养层细胞不断成熟和分化.ki67与增殖细胞核抗原(PCNA)同样为细胞增殖的一种标记,其表达和合成与细胞周期有关,但与PCNA略有不同,在细胞凋亡中细胞周期S、G2、M期均有表达,而G0期缺如.本研究同时检测80例不同妊娠时期、不同程度妊娠高血压综合征(PIH)及过期妊娠、低体重儿胎盘组织中ki67的表达,以期为进一步探索人类妊娠时胎盘组织的机制提供有益的线索.
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胎盘滋养层细胞的功能
胎盘滋养层细胞对妊娠与胚胎发育具有非常重要的作用,侵袭功能和内分泌功能是滋养层细胞的两大主要功能。侵袭性迁移行为是胎盘形成、胚胎发育、妊娠顺利完成的基本要素,滋养层细胞在侵袭血管方面上与癌细胞非常相似。同时滋养层细胞也发挥着极其复杂的内分泌功能,能分泌甾体类激素、神经肽类激素、生长因子、细胞因子等多种生物活性物质,构成了复杂的脐血造血微环境。滋养层细胞所分泌的激素、神经肽等活性物质对母婴之间能量代谢转运、维持早孕、营养黄体等方面起到重要的作用。同时,滋养层细胞是胎盘屏障的重要组成部分和母血进入胎儿的第一道屏障,所分泌的各种细胞因子发挥了极其重要的免疫功能。在本文中作者旨在微环境的层面上阐述胎盘滋养层细胞的功能。
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缺氧对胎盘滋养层细胞细胞周期和凋亡的影响
目的 观察缺氧时滋养层细胞细胞周期及凋亡变化.方法 体外培养胎盘绒毛膜癌滋养层细胞株(BeWo细胞),二氯化钴(CoCl2)处理模拟化学缺氧.噻唑蓝法测定不同浓度(0、125、250、500μmol/L)CoCl2作用不同时相(6、12、24 h)后细胞活力;流式细胞术检测250 μmol/L CoCl2处理细胞不同时间(6、12、24 h)后细胞周期和凋亡改变.结果 125 μmol/L CoCl2对细胞活力无明显影响(P>0.05);250μmol/L CoCl2作用时细胞活力呈下降趋势(P>0.05);500μmol/L CoCl2处理6、12、24 h后细胞活力均有明显下降(P<0.01).250 μmol/L CoCl2诱导构建滋养层细胞缺氧模型.250μmol/L CoCl2作用12、24 h后,G2/M期细胞比例增多(分别为0.24±0.13和0.31±0.01)(P<0.05或P<0.01).250 μmol/L CoCl2作用细胞24 h后细胞凋亡呈增加趋势(P>0.05).结论 成功构建了滋养层细胞体外缺氧培养模型.缺氧诱导滋养层细胞周期向G2/M期进展,增加细胞凋亡.
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妊娠高血压综合征胎盘滋养层细胞凋亡的研究
妊娠高血压综合征(妊高征)是一种常见的严重危害母亲与胎儿健康的妊娠并发症,其病因与发病机制至今尚未完全阐明.近来研究表明,胎盘滋养层细胞显著凋亡,导致绒毛植入宫壁过浅,使胎盘无法从母体获得丰富血供,可能是构成妊高征的病因[1].分析妊高征胎盘滋养层细胞的凋亡及其特征,探讨其与妊高征的病因及发病机制的关系,将为妊高征的防治提供新的理论依据.
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β2-微球蛋白的临床意义
β2-微球蛋白(β2-MG)是除红细胞和胎盘滋养层细胞以外的有核细胞(特别是淋巴细胞和肿瘤细胞)膜上组织相容性性抗原(HLA)的轻链蛋白组分,随HLA更新降解释放入血,可自由通过肾小球,几乎全部由近曲小管重吸收,正常血清内浓度很低.β2-MG主要由淋巴细胞产生,但肿瘤细胞合成β2-MG的能力非常强.血清β2-微球蛋白可反映肾小球滤过功能受损或滤过负荷是否增加的情况;而尿液β2-微球蛋白则可提示肾小管损害或滤过负荷增加;故此通过临床生化检验的相关方法对其进行检测.
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内皮脂酶与重度子痫前期的相关性及其对滋养层细胞功能影响的研究
目的:探讨内皮脂酶(EL)基因在重度子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达,以及EL对人胎盘滋养层细胞生物学功能的影响及其调控机制.方法:收集12例重度PE患者和12例正常孕妇的胎盘组织.Real time-PCR、Western blot法检测EL mRNA和蛋白水平表达.脂质体转染人正常绒毛膜滋养层细胞系HTR8/SVneo干扰EL表达,Real time-PCR、Western blot法检测EL转录及表达水平.用Annexin V-FITC、Transwell、Invasion、Tube formation等检测EL表达降低对HTR8/SVneo细胞凋亡、侵袭、迁移及血管化等能力的影响.Real time-PCR探究HTR8/SVneo功能改变的分子机制.结果:PE胎盘组织中EL表达水平下降;EL表达下降影响滋养细胞凋亡、侵袭、迁移等生物活性,MMP-9表达降低.结论:EL可能通过改变MMP-9表达影响人滋养层细胞的生物学功能,并通过S1 PR-SPHK-eNOS通路参与胎盘血管的浅着床过程,从而促进PE的发生发展.
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P-糖蛋白介导的药物疗效和毒性改变
1970年Bielder首次提出多药耐药(multidrug resistance, MDR)的概念,1986年Chen将MDR基因克隆,自此MDR研究得到广泛开展.MDR基因在人类有两种:MDR1和MDR2,其中前者起主导作用,与肿瘤的多药耐药有关.人类MDR基因位于第7号染色体长臂21区,含有28个外显子,全长4.5 kb,编码1280个氨基酸多肽,经糖基化后形成170 KD的P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp).P-gp是一ATP依赖型外向转运蛋白,属ATP结合盒(ATP binding cassette, ABC)超家族,由2个重复分子组成,每一分子包括6个跨膜的极度疏水区和一个包含高度保守的ATP结合域的亲水区.P-gp依赖ATP供能,排出细胞内药物或毒物.人类P-gp不仅存在于肿瘤细胞,而且在某些正常组织和屏障组织中也有表达.P-gp主要定位在小肠粘膜上皮细胞和胎盘滋养层细胞的刷状缘、肝小管和肾近曲小管的管腔面、脑血管内皮细胞血管面,参与药物的吸收、分布和排泄等过程.P-gp活性可经诱导或抑制,其底物、抑制剂及诱导剂在常用药物中普遍存在,介导多种药物的相互作用.
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骨唾液蛋白的糖基化与功能
骨唾液蛋白(bone sialoprotein,BSP)是细胞外基质中的一种酸性糖蛋白,主要由成骨细胞、破骨细胞及软骨细胞合成,其含量约占骨细胞外基质中非胶质蛋白质的15%[1-2].BSP的分布相对局限,主要在矿化组织特异性表达.在胎盘滋养层细胞、血小板和多种骨转移瘤中也能检测到BSP的表达.近年来的研究表明,BSP具有细胞黏附性能,参与细胞黏附、细胞转移和信号识别,不仅能介导成纤维细胞、成骨细胞和破骨细胞黏附于骨基质表面,BSP以及与整合素受体结合还直接影响癌转化细胞的转移能力,并对血管生成有促进作用.
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滋养细胞凋亡在妊娠期高血压疾病发病机制方面的研究
妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy)是导致孕产妇和围产儿病率及死亡率增高的主要原因,其病因和发病机理多年来一直是产科重要的研究课题.近来研究表明,胎盘滋养层细胞显著凋亡,导致绒毛植入宫壁过浅,使胎盘无法从母体获得丰富血供,可能是构成妊娠期高血压疾病的病因[1].孙丽洲等通过TUNEL研究证实,妊娠期高血压疾病患者胎盘滋养细胞确实存在明显的凋亡现象[2],现将滋养细胞凋亡在妊娠期高血压疾病发病机制方面的研究综述如下.
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胶体金早早孕试纸在临床的应用
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是胎盘绒毛膜滋养层细胞产生生的一种多肽类激素.凡妊娠及胎盘滋养层细胞肿瘤如葡萄胎、绒毛膜上皮癌、胎盘床滋养层细胞假瘤(PSTT)及男性睾丸畸胎瘤均分泌HCG,使尿HCG呈阳性反映.