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微量全血中有核细胞单细胞凝胶电泳技术
单细胞凝胶电泳技术(single cel gel electrophoresis,SCGE),又称彗星试验(comet assay),是近年来发展起来的在单细胞水平上检测DNA断裂的方法,具有简便、快速和敏感的特点[1],已被广泛应用于毒理学、临床研究及人群监测等多种领域[2].
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诊断早期肾损伤的标志物
低分子量蛋白血清胱抑素C(cystatin-C):是内源性的半胱氨酸蛋白酶抑制因子.为非糖基化的碱性蛋白质,人体有核细胞均可以产生排泄率恒定,能自由通过肾小球滤过,在近曲小管全部重吸收并迅速分解代谢,使之成为能准确反应肾小球滤过滤(GFR)的理想内源性物质.
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骨关节炎细胞凋亡与一氧化氮的调控作用
凋亡是有核细胞在一定条件下,启动自身内部机制,通过内源性DNA内切酶的激活而发生的细胞自然死亡过程.目前已认识到细胞凋亡在胚胎发生、器官发育、炎症损伤、肿瘤发生及保持机体的稳态中发挥着至关重要的作用[1].骨关节炎(OA)是以关节软骨基质降解为特征的退行性关节疾病,其发生发展与软骨细胞凋亡及一氧化氮的调控异常有关,现将近年有关文献综述如下.
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自体骨髓和脐带血有核细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化
目的:研究自体骨髓和脐带血有核细胞治疗肌萎缩侧索硬化(ALS)的疗效.方法:采集1例ALS患者的自体骨髓或新生儿脐带血,获取含干细胞的有核细胞悬液,每份平均含有核细胞4.72×10s个.通过腰椎穿刺,将其移植入该患者的蛛网膜下腔.在4年内分别对本例ALS患者进行骨髓及新生儿脐带血有核细胞移植治疗3次和50次,观察患者治疗后运动功能的变化,脑脊液常规、生化指标和不良反应.结果:第1次自体骨髓移植后病情好转,第3次移植后达到好状态.此后患者病情逐渐加重,但较移植治疗前进展速度明显减缓.治疗过程中患者脑脊液压力、常规生化指标均在正常范围内,无明显不良反应.结论:自体骨髓和脐带血有核细胞移植治疗ALS有短期效果,可延缓ALS的进展,该方法是安全的.
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酶联免疫吸附法测定三种CTB与其受体GM1的亲和性
霍乱毒素(cholera toxin,CT)是霍乱弧菌产生的相对分子质量为84 kD的肠毒素,由1个A亚单位(CTA)和5个B亚单位(CTB)形成的五聚体共价连接而成.CTA(大约28 kD)为毒性亚单位,CTB(大约12 kD)为无毒的受体结合亚单位,可以和所有有核细胞膜上的单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)结合.CTA则通过CTB与GM1的结合作用得以进入细胞发挥其毒性级联反应[1,2].目前,CTB已作为载体蛋白广泛用于基础研究.本文采用ELISA法测定了两种国产CTB与其受体GM1之间的亲和性,并与国际标准品CTB进行了比较.
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细胞凋亡、PCNA、bcl-2和p53蛋白在子宫颈癌的表达及其意义
细胞凋亡是指有核细胞在一定条件下通过启动自身内部机制,经过一系列连续性的变化发生主动性死亡的过程[1].
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肾结核并肾盂艾氏同小杆线虫感染1例
患者,男,38岁,武汉市建筑工人,广东人.因间歇性终末血尿伴尿频、尿痛半年,发热1月余,于1999年8月就诊.曾以"前列腺炎"行抗炎治疗,无效.入院后热型为驰张热,体温高达40℃,以午后发热为主.体检:右肾区叩击痛(+).实验室检查:尿常规:蛋白1 g/L,白细胞少量,余正常.多次尿镜检、查霉菌、尿细菌培养,结果阴性,未发现虫体.骨髓穿刺细胞学检查:粒系细胞占有核细胞的比值偏高,为61.5%,未见寄生虫.结核系列检查结果阳性,包括血抗结核抗体(+)、血麦科多特实验(+)、PPD皮试(+).
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用流式细胞术分析1例无关脐血移植后的免疫重建
脐血移植后的早期免疫重建不仅受到移植脐血状况和移植时患者状态的影响,而且与GVHD、感染、免疫抑制剂及G-CSF、GM-CSF的使用都有着重要的关系。我们利用流式细胞术,研究了国内罕见的4岁急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿HLA 2个位点不相合的无关脐血移植后3个月免疫重建的过程。 患儿,男,4岁,体重14.5kg,血型为AB型,ALL,第二次完全缓解(CR)。经搜寻,供者编号980229,移植脐血48ml,有核细胞数25.9×107/kg,血型O型。HLA配型采用BU/CY/ATG预处理方案。移植脐血样本于42℃水中快速复温,通过中心静脉输注,有核细胞回收率85%,活率80%,CD34+细胞5.014×107/kg,CFU-GM 8.319×105/kg。使用环孢霉
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1例急性造血功能停滞患者的护理
患者女,52岁,因发热、腹泻鲜红色水样便伴伞身乏力7 d,血常规示:WBC0.8×109/L,RBC 3.55×1012/L,PLT16×10/L,门诊以全血细胞减少,再障于2007年7月1日收入院.人院时急性病容,营养差,脱水貌,体温38.0℃,脉搏120次/min,呼吸19次7min,血压85/50 mm hg,大便常规示:鲜红色水样便,镜榆示:RBC(+++)/HP,OB(++++);尿常规示:黄,隐血(++),PRO(++);镜检示:RBC(++)/HP,肝功能示:ALT280U/L,AST 861 U/L;骨髓穿刺(右髂后卜棘)提示:(1)粒红二系统可见的有核细胞为中、晚幼阶段的细胞,成熟红细胞大小一致,形态无异常改变.(2)涂片均未见巨核细胞,血小板未见.(3)未见异常或病理细胞.诊断考虑:急性再生障碍性贫血.经抗炎(头孢吡肟)、止血、成分输血(血小板)、粒细胞集落刺激因子、丙种球蛋白0.4 g/(kg·d)等降酶及对症支持治疗.7月10日复查血常规示:WBC 3.7×109/L,淋巴细胞43%,中性粒细胞57%,RBC 2.99×1012/L,HGB 95 g/L,PLT 155×109/L,Ret1.1%;尿常规示:镜检(-);大便常规:镜检(-).肝功能示:ALB 29/L,ALT 110 U/L,ASI'267 U/L;骨髓常规示:有核细胞增牛活跃,以红系为主,巨核系血小板分布正常.诊断:急性造血功能停滞(acute arrest of hemotopaisis,AAH).于7月16日出院.8月16 日随访,复查血常规结果正常.
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血胱抑素测定在临床诊断中的应用
1 胱抑素的结构和生物学特性 血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C分为A、B、C等几种,其中,cystatinC (cysC)又称胱抑素,是一种低分子量非糖基化碱性蛋白质,分子量约为13kD,有122个氨基酸,是超家族成员之一,机体内几乎所有的有核细胞均能产生,产生率多处在相对衡定状态.cysC的生理功能是调节半胱氨酸蛋白质的活性,在细胞内肽类和蛋白质的代谢中起重要作用,特别是在胶原代谢中,能使一些前激素的蛋白质水解,释放于靶组织中发挥各自的生物学作用,它的基因突变、体液中含量的升高或降低直接与多种疾病有关.
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嗜酸粒细胞性胸腔积液的研究进展
嗜酸粒细胞性胸腔积液(eosinophilic pleural effusion,EPE)是指胸腔积液中嗜酸粒细胞占有核细胞至少10%以上.早是Harmsen 在1894 年描述及定义的.在临床中部分EPE 患者能够明确病因,但多数EPE 患者的病因不能完全明确.到目前为止,EPE 的发病机制还不十分清楚,为此现将有关EPE 进展综述如下.
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胱蛋白酶抑制剂C对肾小球滤过功能的评价
胱蛋白酶抑制剂C(Cyst C)是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员之一[1],由机体所有有核细胞产生,产生速率比肌酐稳定[2],可自由通透肾小球基底膜,在近曲小管重吸收后,被小管上皮细胞完全代谢降解成小分子肽或氨基酸.研究证实血清中Cyst C浓度与肾小球率过滤(GFR)有明显的负相关[2-4],可作为肾功能损伤的早期评价指标.本研究对仅Cyst C的临床应用价值进行探讨.
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石油醚替代二甲苯作油镜头和染油标本片脱油剂
二甲苯作脱油剂洗脱血片、骨髓片和显微镜镜头上的香柏油由来已久,其缺点也是显而易见的,使用者长期接触可出现头晕、乏力、失眠、记忆力减退等症状,偶见白细胞降低及接触性皮炎者,误入口、眼毒害有加。有的使用70∶30的乙醇乙醚混合液,但乙醚刺激气味太大,在阳光下遇空气,有形成爆炸性过氧化物的危险,长期接触也会导致头痛、眩晕、疲惫、胃肠功能紊乱。我们用石油醚作脱油剂为时不短,涂片不褪色、有核细胞无裂纹、洗脱效果佳。石油醚属于烷烃类,微毒、无刺激性气味,使用方便,但石油醚亦属易燃品,使用时仍须注意防火。
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Cystatin C的临床应用
Cystatin C(Cys C)称半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,是一种非糖基化蛋白,分子量为13.359KDa,由有核细胞产生,在人体大部分组织中稳定表达,广泛存在于各种体液中,在脑脊液和精液中的浓度高,尿液中低.
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李斯忒菌感染性化脓性脑膜炎一例
患者男性,65岁,因头痛、高热伴失语、呕吐、大小便失禁于2000年4月13日入院.查体:体温39.5℃,呼吸24次/min,脉搏60次/min,血压140/80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),浅昏迷,呼之有反应,双侧瞳孔等大等圆,直径0.25 cm,光反应存在,颈软,心界无扩大,心率60次/min,律齐,各瓣膜区未闻及心脏杂音.左侧Bell征(+),右下肢外旋位,Kernig征(-),Brudzinski征(-).予急诊头颅CT示:双侧基底节腔隙性梗死.2 h后呼吸不规则,呼吸屏气,2次/min,呼吸停顿时间14 s/次,血气分析无CO2潴留,考虑中枢性脑病致呼吸中枢损伤.次日下午出现深昏迷,颈部抵抗,脑膜刺激征出现,Kernig征(+),Brudzinski征(+).入院后第2天起出现血尿、便血,弥漫性血管内凝血(DIC)全套示:血小板70×109/L,血浆凝血酶原时间延长,血浆纤维蛋白原1.2 g/L;1周后开始心动过缓,心率60次/min;血压90/60 mm Hg.入院当天下午行气管切开,呼吸机支持,并行腰穿取脑脊液(CSF)培养,结果示:有核细胞4.28×106/L(单核细胞0.15,多核细胞0.80),Rivalta试验(+),蛋白定量3.16 g/L,糖0.88 mmol/L,Cl-114.4 mmol/L,涂片未找到霉菌、细菌.治疗上予以西力欣、稳可信抗菌,甘露醇降颅压,地塞米松减轻脑水肿,纳络酮和醒脑静醒脑.用药第2天体温有所下降,但第3天又开始持续高温,体温在39.6~40.0℃之间.痰培养示革兰阳性杆菌,药敏示青霉素类有效.入院后第5天始抗生素改为特治星和青霉素G,并再次腰穿,CSF示:有核细胞5.72×106/L(单核细胞0.18,多核细胞0.82),Rivalta试验(++),蛋白定量3 g/L,糖0.60 mmol/L,Cl-113.2 mmol/L,细菌培养找到产单核李斯忒菌.白血常规示:细胞1.36×109/L,中性0.87.因此改用特治星、安美汀和复方新诺明联合抗菌,并加用大扶康预防霉菌,用药达1个月之久.1个月后复查腰穿,CSF正常范围,细菌培养阴性.治疗中同时对症处理相应并发症(尿血、便血,心动过缓,低血压等),患者生命体征平稳,神志清醒,进入康复.
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以成熟淋巴样细胞增多为特征的急性淋巴细胞白血病一例并文献复习
当急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓涂片中具成熟特征的白血病细胞占有核细胞的20%以上,诊断为伴成熟特征的ALL(ALLm)[1],临床鲜见且易误诊.
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胆囊恶性腹膜间皮瘤一例
患者女,68岁,因腹部胀痛不适2个月加重伴突发右上腹剧痛2h入院。患者于2个月前无明显诱因出现腹部胀痛不适,以右上腹为重,伴腹部胀满,无发热,伴纳差、食欲不振。2h 前突发右上腹持续性剧痛,阵发性加重,向后背部放射,并伴恶心、呕吐等,无寒战发热。既往37年前有石棉接触史。入院查体:体温36.0℃,脉搏80次/min,呼吸20次/min,血压130/80 mmHg (1 mmHg=0.133 kPa)。痛苦病容,心肺无明显异常,腹部饱满,全腹压痛,右上腹为重,无反跳痛,肝区叩击痛,Murphy征阳性,肝脾未及,移动性浊音可疑阳性,肠鸣音正常,双下肢无水肿。辅助检查:胸片未见异常。上腹部CT:胆囊不大,底部壁明显增厚,胆囊及胆总管内可见多发类圆形高密度影,肝内、外胆管扩张,腹腔可见少量腹腔积液(图1)。诊断:胆囊及胆总管多发结石,胆囊炎穿孔并腹腔积液。血常规、肝功能正常。肿瘤标记物:CEA 1.2 mg/L,CA19-95.0 mU/L;腹腔积液常规:总细胞4.88×109,有核细胞1.24×109,多核细胞0.02,未见肿瘤细胞。入院后予以抗炎治疗,效果不佳,行剖腹探查术。术中见:肝表面光滑无结节,胆囊化脓与周围组织粘连,可见少量脓液,大网膜增厚,散在分布大小不等灰白色结节,胆囊床与周围组织粘连,将胆囊充分游离,钳夹胆总管,切除,并行大网膜切除术。术后病理示:(胆囊)恶性上皮型间皮瘤(图2,3),局部瘤组织侵及黏膜层,部分组织凝固性坏死及炎细胞浸润,免疫组织化学染色:波形蛋白抗体(Vimentin)(+)(图4,5),钙视网膜蛋白(Calrentinin )(+)(图6,7),间皮细胞(mesothelialcell,MC)(+)(图8,9),细胞角蛋白抗体(cytokeratin,CK)(+)(图10,11),CEA (-)(图12),肝细胞(-)(图13)。患者术后再次出现腹腔积液,未行进一步治疗,自动出院。术后4个月随访,患者死于肠梗阻。
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脐血的采集和分离及有核细胞的富集
脐血中富含造血干/祖细胞,是骨髓和外周血后的第三种造血干细胞的来源[1].脐血的采集、分离和保存方式对单个核细胞(MNC)和CD+34细胞的回收有一定的影响.分析不同性别、胎龄、胎次和体重的胎儿脐血量、MNC数,以及脐血采集后处理方式对MNC和CD+34 细胞的影响,有助于脐血临床移植和建立脐血库.
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白血病脑实质浸润一例报告
患者 男,52岁.头晕、乏力伴低热1个月.血常规:白细胞4.3×10 9/L,红细胞4.9×10 9/L,血小板24×10 9/L,异型细胞7%,以"急性白血病"入院.骨髓检查:骨髓增生极度活跃,有核细胞量增多,有骨髓小粒,粒细胞异常增生,以原始粒细胞为主,占88.5%,粒红系明显受抑制,中晚幼红细胞比例减少,成熟淋巴细胞比例减少,巨核细胞数量中等,未见产板巨核细胞.胸部X线片示:两肺纹理增粗.
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半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的生物化学特性及其临床意义
半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)为120个氨基酸序列的低分子量(13 359)蛋白.人体所有的有核细胞都能持续地产生Cystatin C.肾脏是Cystatin C的主要分解代谢器官.由于Cystatin C的低分子量及正常pH的阳电荷,使其能自由地通过肾小球滤过,几乎完全被肾小管重吸收,并且在肾近曲小管代谢分解.