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糖肾汤对糖基化蛋白诱导培养下系膜细胞表达金属蛋白酶组织抑制物1、2的影响
目的:研究糖基化蛋白诱导培养下,糖肾汤对大鼠肾小球系膜细胞表达基质金属蛋白酶组织抑制物1、2(TIMP1、TIMP2)mRA的影响.方法:采用血清药理学及体外大鼠肾小球系膜细胞培养方法,用糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)刺激肾小球系膜细胞,采用RT-PCR法检测系膜细胞TIMP1、TIMP2 mRNA表达.结果:糖基化蛋白可上调TIMP1、TIMP2 mRNA表达,糖肾汤能降低TIMP1、2mRNA表达.结论:糖肾汤对金属蛋白酶系统紊乱有一定的调节作用.
关键词: 糖肾汤 糖基化蛋白 基质金属蛋白酶组织抑制物 糖尿病肾病 -
5株不同亚型HIV-1毒株gp120序列特征分析及其蛋白的表达
目的 分析我国HIV-1主要亚型毒株的gp120区域的序列特征,并表达出gp120糖基化蛋白,为研究gp120的致病机制和设计疫苗奠定基础.方法 利用巢式PCR从来自于不同省份的5名HIV-1感染者外周血单个核细胞DNA中扩增全长gp120基因并测序,对序列特征进行分析,并将获得的gp120基因克隆入真核表达载体,体外表达获得gp120糖基化蛋白.结果 序列分析显示,此5条gp120序列分属HIV-1 Thai-B、BC重组和AE重组哑型,虽然亚型不同,但这些gp120序列在相同的位置都存在着一些保守的糖基化位点,且都具备相同的Furin蛋白酶第一切割位点,与参考序列比较发现,不同的HIV亚型序列中,除V3序列长度较为保守外,V1、V2、V4、V5各区域都有不同程度的缺失现象,与BC重组和AE重组亚型相比,Thai-B亚型V3的顶端环呈现出多种组合.终将这5条gpl20序列都克隆人真核表达载体并表达出糖基化的gp120蛋白.结论 在设计疫苗和检测试剂时应考虑到膜区的高变性,gp120糖蛋白的体外表达有利于进一步开展针对我国主要HIV流行毒株膜蛋白致病机制和疫苗学的研究.
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诱骗受体3在疾病检测中的进展
DcR3又名TNFRSF6B/TR6/M68,其编码基因位于人类染色体20q13.3,是一种缺乏穿膜结构域的可溶性受体,DcR3编码长度为300个氨基酸(NCBI accession #NM_032945),产物相对分子质量为30 000的糖基化蛋白,有2个变异体DcR3v1( NCBI accession#AAM94173)和DcR3v2(NCBIaccession #AAM94172),分别编码74和139个氨基酸[1].DcR3能够中和3种肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员[死亡因子(Fas)、LIGHT和TL1A]的生物学效应.现将其在疾病检测中的进展阐述如下.
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Cystatin C的临床应用
Cystatin C(Cys C)称半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,是一种非糖基化蛋白,分子量为13.359KDa,由有核细胞产生,在人体大部分组织中稳定表达,广泛存在于各种体液中,在脑脊液和精液中的浓度高,尿液中低.
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糖基化终产物对纯化培养大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响
糖尿病性视网膜病变是糖尿病患者严重的眼部并发症,其病因和发病机制尚未阐明.近年来人们认为慢性高血糖引起体内糖基化蛋白的过量沉积,形成糖基化终产物,从而导致各系统的慢性疾病和功能丧失.传统上人们多认为糖尿病性视网膜病变主要是微血管病变,包括:内皮细胞增殖、基底膜增厚、周细胞丧失等.
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运动引起肌源性IL-6分泌的研究进展
白细胞介素6(IL-6)是一个包含白血病抑制因子,IL-11,纤毛嗜神经因子,制瘤素M(Oncostatin)等的细胞因子家族的成员之一[1].这个家族的相似结构是螺旋状蛋白质和共用的受体亚单位(跨膜糖蛋白130)[2,3].IL-6是一种糖基化蛋白,由于其细胞来源不同,并且转录后修饰的程度也不一样,因此分子量在22~27kD之间变化,在机体内合成为一种含212氨基酸的前体蛋白,带有28个信号序列和184个成熟片段[3].
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重组人生长激素的临床应用
生长激素(growth hormone,GH)是垂体前叶嗜酸粒细胞分泌的含191个氨基酸非糖基化蛋白,它的主要功能是促进生长、减少蛋白质的消耗.既往GH的来源仅限于尸体垂体组织的提取,GH的产量有限,应用范围小.
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糖肾汤对糖基化蛋白诱导培养下系膜细胞MMP-2表达的影响
目的:研究糖基化蛋白诱导培养下,糖肾汤对大鼠肾小球系膜细胞表达基质金属蛋白酶2(MMP-2)活性及mRNA的影响.方法:采用血清药理学及体外大鼠肾小球系膜细胞培养方法,用糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)刺激肾小球系膜细胞,以明胶酶谱法检测培养上清MMP-2的活性,并提取细胞RNA,采用RT-PCR法检测系膜细胞MMP-2 mRNA表达.结果:糖基化蛋白可抑制MMP-2的活性及mRNA表达,糖肾汤能提高MMP-2活性及mRNA表达.结论:糖肾汤对糖尿病肾病金属蛋白酶系统紊乱具有一定的调节作用.
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桔梗有效部位对糖尿病大鼠微血管病变干预作用研究
目的:研究桔梗有效部位对糖尿病大鼠血管并发症的干预作用.方法:体外实验:采用高糖或H2O2进行血管内皮细胞造模,MTT法进行细胞活力测定,观察桔梗多糖或醇提上清对血管内皮细胞的保护作用:同时设计体外蛋白糖基化反应体系,NBT法测定糖基化蛋白,观察桔梗醇提上清对蛋白糖基化形成的干预作用.体内实验:采用STZ腹腔注射得到糖尿病模型小鼠,分别以含生药量2、4、8 g/kg的药物水溶液、拜唐苹或纯净水进行28 d灌胃实验,观察小鼠TG、TC、HDL、LDL等血脂指标及肾脏的组织形态学变化.结果:体外实验表明,桔梗多糖部位对高糖引起的血管内皮细胞损伤的保护作用呈剂量依赖关系;桔梗水提醇沉上清部位能有效对抗H2O2对血管内皮细胞的损伤,且能抑制体外蛋白糖基化的形成.体内实验表明,高剂量(8 g/kg)的桔梗水提醇沉上清部分能显著降低糖尿病大鼠的血脂水平并有效抑制肾脏并发症.结论:桔梗能通过降低高糖和H2O2对血管内皮细胞的损伤,并降低蛋白糖基化的形成,有效抑制糖尿病血管并发症和肾脏的损伤.
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糖基化免疫球蛋白IgG免疫学特征的变化
免疫球蛋白IgG与其它蛋白质一样,在氨基酸序列合成(蛋白质翻译)之后,蛋白修饰的过程中均会有不同程度的糖基化,是机体正常的生理现象.蛋白质糖基化修饰对其功能有重要的影响,包括蛋白折叠、运输和功能等方面.体内约1/2的蛋白属于糖基化蛋白,但是,过度的、异常的糖基化修饰却对机体产生损害.IgG异常糖基化修饰涉及到其免疫学特征的改变.
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糖基化蛋白终产物对血脑屏障中ZO-1表达的影响
糖尿病患者脑微血管疾病的发生与大脑内神经和血管的晚期糖基化蛋白终产物(advanced glycosy lation end products,AGEs)的积聚密切相关,但确切的发病机制尚未明确[1].前期的实验证明AGEs能介导微血管内皮细胞重要的连接蛋白膜突蛋白(moesin)的磷酸化,并导致内皮形态和屏障功能的变化,从而引起血脑屏障通透性升高[2],但其具体机制还可能与其他因素有关.作者自2011年1月至2012年12月探讨AGEs的刺激下血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)紧密连接蛋白中ZO-1的表达变化,以期阐明AGEs引起BBB通透性的增加是否与ZO-1的表达直接相关.报道如下.
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血清胱抑素C(CysC)测定在糖尿病肾病早期诊断中的意义
CysC是一种非糖基化蛋白,其分子量小,生成率稳定,由于其在血清中的浓度与肾小球滤过率(GFR)有密切的关系,并且对肾小球滤过率比肌酐更为敏感.本文通过对50例糖尿病患者的CysC和Cr(肌酐)测定的比较.探讨CysC在糖尿病肾病的早期诊断价值.
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氨基胍滴眼液防治大鼠糖尿病性白内障的研究
目的探讨氨基胍对链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病性白内障的防治效果及其作用机制.方法采用一次性腹腔内注射链脲佐菌素(65 mg·kg-1)的方法建立大鼠糖尿病模型,血糖值大于14 mmol·L-1为成模标准.治疗组左眼滴氨基胍溶液,2次·d-1.每周监测大鼠血糖、尿糖、体重的变化,并在裂隙灯下观察大鼠晶状体混浊的进展.第13周测定晶状体中谷胱甘肽还原酶活力、过氧化氢酶、谷胱甘肽以及糖化蛋白的含量.结果 71%(32/45)达成模标准,并出现糖尿病表现.糖尿病大鼠晶状体混浊呈2阶段发展,前8周缓慢进展及后5周快速进展.氨基胍眼液治疗可延缓糖尿病性白内障发生,第4周出现统计学差异(P《0.05).氨基胍治疗组晶状体中糖基化蛋白含量明显低于未治疗组(P《0.05),氨基胍治疗组晶状体中谷胱甘肽含量较未治疗组有提高.结论氨基胍滴眼液可抑制早期糖尿病性白内障的进展,其抗糖基化蛋白作用可能参与抑制糖尿病性白内障的形成.
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心血管组织糖基化终产物的形成与其受体表达的关系
晚期糖基化终产物(advanced glycation end products, AGEs)的形成是糖尿病血管并发症病理变化的一个特征.AGEs与其受体(receptor for AGEs, RAGE)结合引起细胞内信号转导的变化,激活核转录因子引起靶基因的一系列反应,是导致糖尿病血管并发症的关键途径.目的:本实验探讨了AGEs在糖尿病大鼠心血管组织内的形成量与RAGE基因表达的关系.方法:雄性Wistar大鼠分为:1:对照组(8只);2:糖尿病4周组(6只);3:糖尿病12周组(8只);4:糖尿病4周氨基胍(AG)治疗组(6只)和5:糖尿病12周AG治疗组(8只).大鼠禁食12 h后腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病模型.参照Monnier的方法用荧光法检测主动脉及心肌组织的AGEs含量;取主动脉和心脏组织进行组织匀浆和冰冻切片分别用RT-PCR及原位杂交方法检测RAGE基因的表达.培养人脐静脉内皮细胞,用免疫组化方法检测在糖基化蛋白(参照Lander的方法在体外制备)刺激下内皮细胞NF-κB的激活变化.结果:糖尿病大鼠血糖明显高于对照组(P<0.01);糖尿病12周模型鼠主动脉和心肌组织AGEs含量明显高于其他4组大鼠(P<0.01),血管内皮细胞RAGE表达明显增强(P<0.01);用AG治疗可明显降低AGEs形成和RAGE基因的表达;AGEs含量与RAGE表达呈明显正相关,相关系数为0.97 (P<0.01).免疫组化结果表明,在糖基化蛋白的刺激下血管内皮细胞核呈棕褐色,表明有NF-κB激活后向核内转位的变化.结论:随着糖尿病病程的延长,AGEs在心血管组织内的含量明显增加,RAGE主要在糖尿病大鼠血管内皮细胞表达,其表达量与AGEs含量明显相关;用AG治疗可降低AGEs的形成.提示AGEs与RAGE相互作用,可能通过激活NF-κB诱导RAGE基因自身的表达,而RAGE的持续表达是引起糖尿病慢性血管内皮细胞功能紊乱和损伤的关键环节.
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生长激素在外科营养支持中的合理应用
生长激素(growth hormone,GH)是脑垂体前叶嗜酸粒细胞分泌的一种非糖基化蛋白质激素,由191个氨基酸组成,有22kd和20kd两种分子量形式.在体内以前者为主,约占循环GH的90%.初获得GH制剂主要作为激素替代疗法用于治疗儿童GH缺乏性侏儒症.后来对其的代谢研究表明,GH有节氮效应.