首页 > 文献资料
-
3C蛋白酶及抑制剂研究进展
3C蛋白酶是催化小RNA病毒前体蛋白中非结构蛋白部分裂解的关键蛋白酶,对病毒的复制有着重要作用,是当前抗病毒研究的一个重要靶点.本文简要概述了3C蛋白酶的结构、功能和抑制剂的研究进展,对该酶的抑制研究和相关病毒的治疗有积极意义.
-
丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶及抑制剂研究进展
丙型肝炎病毒(heptitis cvirus,HCV)丝氨酸蛋白酶(serine protease)是催化病毒前体蛋白中非结构蛋白部分裂解的关键蛋白酶.对病毒复制和宿主细胞都有重要作用,是当前抗病毒研究的一个重要靶点.本文从丝氨酸蛋白酶结构、功能和抑制剂等三方面,介绍丝氨酸蛋白酶的研究进展,这对该酶抑制研究和丙型肝炎的治疗研究会有积极意义.
-
丙型肝炎病毒基因编码的蛋白及其功能
丙型肝炎病毒(HCV)基因组是一单股正链RNA,全长9 600个碱基对(bp),含有一个大的开放读码框架(ORF),编码约3 010个氨基酸的病毒前体蛋白,HCV基因组5'端(5'UTR)和3'端(3'UTR)为非翻译区,或称非编码区(UCR),前者位于ORF上游;后者位于下游,含有poly A或ply U尾巴.
-
氯贝丁酯抑制大鼠海马神经元HMG还原酶表达和胆固醇外流
氯贝丁酯广泛用于高脂血症及其继发症动脉粥样硬化的治疗.研究证实高脂血症还是阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)发生的重要因素.β-淀粉样蛋白前体蛋白(amybid precursor protein,APP)代谢产生β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ),是AD发生的关键,APP的3种同功体即APP695、APP751和APP770均能生成AB.高胆固醇水平促进APP生成AB,降低神经元胆固醇合成和/或促进胆固醇排出均可抑制AB的生成[1].
-
幽门螺杆菌空泡毒素基因克隆、表达及其重组蛋白免疫学特性的鉴定
已发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)疫苗具有预防和治疗Hp感染的效果[1].大多数Hp菌株均能产生空泡毒素(vacuolating cytotoxin, vacA),其前体蛋白在分泌过程中只有相对分子质量(Mr)约87×103的VacA被转运到细胞外,Mr为4×103氨基末端信号肽和50×103羧基末端多肽分别留于细菌内、外膜中[2].Hp感染者血清中可出现VacA抗体,重组VacA在Hp SS1株小鼠感染模型中有80%的保护率[3].我们构建了vacA原核表达系统,所表达的重组VacA可作为Hp基因工程疫苗的候选抗原.
-
HIV-2 gp105重组鸡痘病毒引起小鼠细胞和体液免疫应答
人免疫缺陷病毒Ⅱ型(human immunodeficiencyvirus type 2,HIV-2)于1986年在几内亚-比绍被发现.起初HIV-2仅在西非呈区域性流行,随后在欧洲、美洲和亚洲也出现了感染者和发病者.我国的首例HIV-2感染者于1998年在福建省发现[1],并检测出HIV-1与HIV-2的共感染患者[2].因此,研究有效的HIV-2疫苗势在必行.HIV-2 env基因编码前体蛋白gp140,后者裂解后生成外膜蛋白gp105和跨膜蛋白gp36.gp105是病毒的主要抗原,其表面具有大量的Ab表位、TH表位和CTL表位,能诱导机体产生强烈而广泛的中和抗体和细胞毒(CTL)反应,因此是基因工程疫苗研究的重要靶点.本研究将已构建的HIV-2 gp105重组鸡痘病毒大量制备后免疫BALB/c小鼠,观察其在小鼠体内的免疫原性,以获得第一手的实验资料.
-
p7蛋白--丙型肝炎病毒潜在抑制靶点
丙型肝炎(hepatitis C)是严重的慢性传染病之一,全世界病毒感染者约1.7~2亿[1].HCV为单链RNA病毒,一个开放读码框编码了3010个氨基酸的前体蛋白,在细胞和病毒蛋白酶共同作用下,前体蛋白被降解成结构蛋白和非结构蛋白两部分.
-
血管新生抑制因子软骨调节素I前体蛋白的剪切加工研究
目的研究参与血管新生抑制因子软骨调节素I( ChM-I)前体加工的前蛋白转化酶( PCs)的种类及其作用,探讨ChM-I蛋白的翻译后加工成熟机制。方法构建ChM-I前体蛋白真核表达质粒并转染多种细胞,Western Blot检测细胞裂解液和培养基上清中ChM-I的表达变化;将ChM-I前体蛋白表达质粒与5种不同前蛋白转化酶表达质粒在ChM-I前体加工缺陷型细胞COS7中共表达,Western Blot检测细胞裂解液和培养上清中ChM-I蛋白的表达。结果 ChM-I前体荧光表达质粒构建成功,可在多种细胞系中表达ChM-I前体蛋白;ChM-I前体蛋白在COS7细胞中无法被有效地剪切加工成成熟ChM-I蛋白,可作为ChM-I加工缺陷型细胞使用;除PACE4以外,Furin、ΔFurin、PC5A和PC7均能显著提高培养液上清中ChM-I的含量,并缓解过量表达的ChM-I前体在细胞中的堆积。结论 PCs中的Furin、PC5A和PC7能将过表达的ChM-I前体酶切加工为成熟ChM-I,提示Furin、PC5A和PC7可能在ChM-I蛋白剪切加工成熟过程中发挥重要作用。
-
蛋白质组学方法鉴定强直性脊柱炎相关蛋白
北京大学第一医院血液科朱平教授课题组的刘静博士,对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)一家系成员的血清蛋白质组学研究发现,结合珠蛋白前体蛋白与强直性脊柱炎发病相关.
-
丙型肝炎病毒非结构蛋白5A结合蛋白37小鼠同源基因的克隆化及结构分析
目的:克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)结合蛋白37(NS5ABP37)的小鼠同源基因,为阐明小鼠NS5ABP37基因的生物学功能奠定基础,探索HCV NS5A蛋白与NS5ABP37蛋白之间的结合在慢性丙型肝炎的发病机制中可能的作用.方法:利用酵母双杂交系统3,以HCV NS5A蛋白作为诱饵,筛选肝细胞cDNA文库,首先获得HCV NS5A结合的人肝细胞蛋白的新的编码基因.利用生物信息学(bioinformatics)技术确定NS5ABP37的小鼠同源基因序列.利用GenBank在线分析软件,对小鼠NS5ABP37蛋白一级结构特点进行分析.结果:通过酵母双杂交技术获得了人NS5ABP37的编码基因.利用生物信息学技术确定了小鼠NS5ABP37的基因序列.利用分子生物学技术获得了小鼠的NS5ABP37的基因克隆,小鼠NS5ABP37基因开放读码框架(ORF)为l 488 nt,编码产物由495 aa组成.计算分子量为54 583.67道尔顿,预测等电点(pI)为4.70.小鼠NS5ABP37与白细胞抗原相关(leukocyte antigen related,LAR)蛋白前体蛋白(LAR protein precursor)同源.小鼠HCV NS5ABP37基因序列被美国核苷酸数据库GenBank收录,收录号为AY234860.结论:成功确定、克隆了小鼠的NS5ABP37基因序列,并证实与白细胞抗原相关蛋白前体蛋白具有一定的同源性.这一结果,为进一步阐明小鼠的NS5ABP37基因的功能,阐明HCV感染的发病机制奠定了坚实的基础.
-
超氧化物歧化酶基因突变子对阿尔茨海默病转基因小鼠β-淀粉样蛋白表达影响的实验研究
β-淀粉样蛋白(Aβ)在阿尔茨海默病(AD)发病过程中起关键作用已被研究证实.本研究应用Aβ在海马神经元表达的转β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP-C100)基因小鼠,转入铜/锌超氧化物歧化酶(G93A SOD1)基因来探讨SOD1基因表达对Aβ代谢的影响.
-
运动引起肌源性IL-6分泌的研究进展
白细胞介素6(IL-6)是一个包含白血病抑制因子,IL-11,纤毛嗜神经因子,制瘤素M(Oncostatin)等的细胞因子家族的成员之一[1].这个家族的相似结构是螺旋状蛋白质和共用的受体亚单位(跨膜糖蛋白130)[2,3].IL-6是一种糖基化蛋白,由于其细胞来源不同,并且转录后修饰的程度也不一样,因此分子量在22~27kD之间变化,在机体内合成为一种含212氨基酸的前体蛋白,带有28个信号序列和184个成熟片段[3].
-
HIV-1前体蛋白早成熟化激活剂筛选模型的建立及应用
HIV-1蛋白酶(PR)活性的严格调控对于病毒的生存至关重要.在病毒蛋白表达及病毒颗粒装配过程中,处于病毒前体蛋白Gag-Pol中的蛋白酶必须以无活性状态存在,避免前体蛋白Gag-Pol和Gag被提前酶切加工(前体蛋白早成熟化).干扰HIV-1蛋白酶活性的调控机制,特异性的激活前体蛋白中的蛋白酶,诱导前体蛋白早成熟化,就可以直接抑制病毒的复制.根据这一设想,运用生物发光共振能量转移技术,建立细胞水平的HIV-1前体蛋白早成熟化激活剂筛选模型,并通过3 000个化合物的试验性筛选对筛选模型进行评价.研究结果表明该筛选方法灵敏可靠,特异性高,重复性好(Z'因子为0.905).
-
β-淀粉样蛋白与老年痴呆症
老年痴呆症即阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种大脑慢性退行性变性疾病.主要病理特征是脑内老年斑、神经纤维缠结及神经元丢失.β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)是老年斑的主要成分,在AD发病中起关键作用.Aβ具有神经毒性作用,能损伤胆碱能神经元,引起神经细胞凋亡,产生过氧化损伤,激发炎症反应等.随着对Aβ研究的不断深入,为AD的有效治疗带来了希望.
-
淀粉样变心肌病
淀粉样变性以细胞外可溶性纤维蛋白沉积为特征,同时伴正常组织结构和功能的破坏.所有的淀粉样纤维在刚果红染色偏振光下呈现苹果绿色的双折射,在电子显微镜下以β-皱褶结构排列[1].已知至少有18种以上的蛋白可以导致淀粉样变[2],包括轻链免疫球蛋白、transthyretin、急性期反应蛋白A、纤维蛋白原Aa、脂蛋白A等[3].由不同前体蛋白导致的淀粉样变其临床表现不同.确定淀粉样变诊断分型, 对于及时治疗各种不同类型淀粉样变疾病的预后很重要[3].
-
血栓前体蛋白在诊断血栓前状态中的临床价值
目的:探讨心、脑血管疾病患者血浆中血栓前体蛋白(TpP) 在早期诊断血栓前状态中的价值.方法:采用ELISA 法测定160 例患者及210 例正常人血浆中凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT) 和血浆纤维蛋白原(Fg)、血管性血友病因子(vWF)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)、组织型纤溶酶原激活物(tPA)、DD-二聚体(DDimer)、血栓前体蛋白(TpP),对各项指标在诊断血栓前状态时的阳性率、准确率和敏感度进行比较.结果:160 例患者血浆中vWF、TAT、TpP、tPA、PAI 均显著高于正常对照(P<0.05) ;PT、APTT 在心、脑血栓形成前后无显著变化(P>0.05) ;TpP 与其他指标相比,具有很高的敏感性与特异性.结论:vWF、tPA、PAI、DDimer、Fg、TpP 均可以作为早期诊断心、脑血管血栓形成前状态的分子标志物,而TpP 灵敏度、特异性高于其他各项,在早期判断血栓前状态时具有较高临床价值.
-
核孔蛋白与白血病
染色体易位常常导致融合蛋白的产生,这种融合蛋白将两个前体蛋白的主要功能包含在同一融合蛋白之中.染色体易位常常累及转录因子和蛋白激酶.近年来发现与核孔蛋白(nucleoporin)Nup98及Nup214(CAN)有关的染色体易位也与白血病的发病有关.
-
GDNF的基因结构、信息传递及神经保护作用
胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)是TGF-β家族的一个新亚族,该亚族还有新发现的三个成员:Neurturin (NTN)、Persephin (PSP)和Artemin (ART),它们均不程度地对多巴胺神经元、脊髓前角运动神经元、背根神经节、颈上神经节以及肾等非神经元细胞都具有生长促进作用。GDNF基因位于5p12-13.1,全长约28~30kb,由三个外显子和两个内含子构成,转录后形成4.6kb的mRNA,其中编码区全长636bp,超始密码子在第二个外显子上,编码的GDNF前体蛋白为211个氨基酸残基(其中信号肽19个氨基酸),酶解后形成134个氨基酸的成熟多肽。GDNF受体系统由膜外糖磷酯酰肌醇(GPI)偶联的直接与GDNF结合的受体GFR(GDNF family receptor)和跨膜的酪氨酸激酶Ret两部分构成。研究表明将GDNF向纹状体、黑质或脑室内直接注射;胚胎中脑组织用GDNF处理后植入脑内;GDNF转基因工程细胞脑内移植;用腺病毒、腺相关病毒介导的GDNF cDNA直接注入脑内等不同方式给予帕金森病模型动物,可以改善这些动物的PD症状。
-
MAPK信号转导通路在阿尔茨海默病中作用的研究进展
阿尔茨海默病(AD)是一种慢性进行性神经元变性疾病.它以不可逆的进行性记忆障碍和认知功能损害为主要临床症状,其主要的病理特征包括老年斑和神经原纤维缠结.老年斑(senile plaques)由类淀粉前体蛋白(APP)断裂后产生的多肽Aβ组成,而神经原纤维缠结(NTFs)是由异常细胞骨架组成的神经元内结构,由细胞内tau蛋白过度磷酸化所致[1].
-
丙型肝炎病毒与肝癌
一、HCV的基因结构及其产生的病毒蛋白HCV基因是由9500碱基构成的单链RNA病毒.该病毒基因组两端附有非翻译区(UTR),依含有5′UTR的内部核糖体进入位点(internal ribosomal entry site,IRES)起动帽非依赖性翻译.本基因组中存在单一的长转录开放读框(ORF),于产生前体蛋白之后,继而通过加工形成不同的蛋白(图1).此包括构成病毒颗粒的蛋白即结构蛋白(核心、E1、E2及p7)和除此之外的非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A及NS5B).