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幽门螺杆菌空泡毒素基因克隆、表达及其重组蛋白免疫学特性的鉴定
已发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)疫苗具有预防和治疗Hp感染的效果[1].大多数Hp菌株均能产生空泡毒素(vacuolating cytotoxin, vacA),其前体蛋白在分泌过程中只有相对分子质量(Mr)约87×103的VacA被转运到细胞外,Mr为4×103氨基末端信号肽和50×103羧基末端多肽分别留于细菌内、外膜中[2].Hp感染者血清中可出现VacA抗体,重组VacA在Hp SS1株小鼠感染模型中有80%的保护率[3].我们构建了vacA原核表达系统,所表达的重组VacA可作为Hp基因工程疫苗的候选抗原.
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利用细菌内重组腺病毒系统构建胃癌MG7-Ag模拟表位疫苗
目的:以复制缺陷的腺病毒为疫苗载体,构建基于胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒疫苗.方法:将编码MG7-Ag模拟表位的互补序列设计到上游引物的5/端.以含有HBcAg全序列的质粒p1.2Ⅱ为模板,通过PCR扩增,获得MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因.经序列测定证实后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5 183中进行同源重组.经抗性筛选及酶切鉴定的重组质粒,再用导入293细胞进行包装,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:序列测定证实,PCR产物为胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片段;酶切鉴定表明胃癌MG7-Ag模拟表位与HBcAg的融合基因片断插入了pAdTrack-CMV穿梭质粒,卡那霉素进行抗性筛选及Pac Ⅰ酶切鉴定证实腺病毒重组质粒构建成功.Pac Ⅰ酶切线性化的重组质粒导入293细胞3 d后见明显的绿色荧光蛋白表达.回收病毒,可重复感染293细胞,证实有感染能力的病毒颗粒包装成功.结论:胃癌MG7-Ag模拟表位的重组腺病毒载体的构建成功,为进一步研究胃癌MG7-Ag模拟表位诱发抗胃癌免疫打下了基础.
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D-丝氨酸在中枢神经系统的研究进展
长期以来,人们普遍认为D型氨基酸在高等生物中没有生理功能,D-丝氨酸仅存在于低等细菌内,而在哺乳动物体内只有L-丝氨酸.但20世纪90年代,研究人员发现D-丝氨酸和丝氨酸消旋酶(serine racemase,SR)均存在于哺乳动物脑中.已有越来越多的研究表明,D-丝氨酸对于中枢神经系统的生理功能至关重要.
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创、烧伤后细菌内/外毒素与脓毒症和多器官损害研究
脓毒症(sepsis)是严重创(烧)伤、感染、大手术患者常见的并发症,进一步发展可导致多器官功能障碍综合征(MODS),是危重患者主要死亡原因之一.
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处理伤口,你选对药水了吗?
酒精酒精分子具有很强的渗透力,能穿过细菌表面的膜,进入细菌内部,使构成细菌生命的蛋白质凝固,将细菌杀死.但是只有浓度为70% ~ 75%的酒精适用于消毒.不要长时间用75%的酒精消毒,因为同种消毒液长时间使用可能会造成菌体的耐抗性,因而减弱甚至失去灭菌的效果.所以,处理伤口时可以与碘酒交替使用.
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促凋亡蛋白Omi/HtrA2与细胞凋亡相关疾病
Omi/HtrA2是一种丝氨酸蛋白酶,定位于线粒体,具有调节凋亡的功能.Omi/HtrA2早是因与凋亡抑制蛋白(IAPs)有结合能力并拮抗IAPs而被分离确定的,与细菌内蛋白酶HtrA2(high-temperature requirement)同源[1].
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动态浊度法测定加替沙星注射液细菌内毒素含量
加替沙星(gatifloxacin)注射液为治疗呼吸道感染和泌尿系统感染安全有效的药物.原热原检查采用家兔法,但干扰因素较多.为探索快速、方便且定量的内毒素测定方法,本研究采用动态浊度法测定加替沙星注射液中内毒素的含量.
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R质粒的紫外线消除试验改进和体会
质粒是细菌内染色体外具有遗传功能的环状双链DNA,在革兰阴性杆菌质粒中含有一种耐药性质粒叫做R质粒[1]。质粒虽然可自宿主细胞内自发消除,但很缓慢,其消除频率为10-2~10-8,而利用理化因素处理,其消除频率可增加100~100 000倍[2]。本试验对细菌带有耐氯霉素(CM)质粒进行紫外线消除做些改进和探索。
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耐药质粒消除的研究概况与展望
质粒是细菌内染色体外具有独立复制能力的对细菌生存非必需的小型共价闭合环状双链DNA分子.耐药质粒上携带着耐药基因,赋予了细菌对某些抗生素耐药.耐药质粒可自宿主细胞内自发消除,但很缓慢,其消除频率为10-2-10-8.