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Tyrosol和Farnesol对白念珠菌生物被膜形成作用的基因表达谱研究
目的 研究Tyrosol和Farnesol对不同时相白念珠菌生物被膜形成的调控机制.方法 研究对象为白念珠菌标准株SC5314.设立Tyrosol处理组、Farnesol处理组、Tyrosol和Farnesol联合处理组、对照组.生物被膜6h和24h收集细胞,提取RNA,反转录cDNA.cDNA与白念珠菌全基因组8K表达谱芯片杂交.采用LuxScan双通道激光扫描仪进行扫描.LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行分析.借助KEGG基因库对芯片数据进行生物信息学分析.结果 不同生物被膜时相,Tyrosol和Farnesol对白念珠菌基因表达调控作用不同.Tyrosol和Farnesol调控生物被膜形成相关基因、菌丝相基因和酵母相基因.Tyrosol是生物被膜基因表达的正向调控效应因子.Farnesol是负向调控效应因子.Tyrosol和Farnesol主要调控的基因包括生物学过程、分子功能及细胞成分相关基因,这些基因主要通过参与物质代谢通路调控白念珠菌生物学特点及生物被膜形成.结论 Tyrosol和Farnesol通过调控白念珠菌生物被膜形成相关基因调控生物被膜形成.
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白念珠菌的菌体密度与生物被膜形成及tyrosol分泌
目的 观察不同接种浓度条件下白念珠菌生被物膜的形成,研究菌体密度在白念珠菌生物被膜形成及密度感应分子tyrosol产生中的作用.方法 白念珠菌标准株SC5314和临床株通过YPD增菌,细胞计数和梯度稀释将白念珠菌细胞悬液调配至5×10~6个/ml、5×10~5个/ml、5×10~4个/ml、5 ×10~3个/ml不同浓度,随后将不同浓度的白念珠菌接种到培养皿中,形成自念珠菌生物被膜.1.5、3、4.5、24、36 h高效液相色谱检测白念珠菌tyrosol产生情况,在同样的时间点对生物被膜取样进行扫描电镜观察.结果 菌体密度对白念珠菌生物被膜tyrosol产生存在作用;接种浓度低的白念珠菌分泌tyrosol少,接种浓度高的白念珠菌分泌tyrosol较多.生物被膜形成24 h产生tyrosol多,随后减低.菌体密度影响白念珠菌早期生物被膜的形成;扫描电镜观察到接种浓度低的白念珠菌细胞出芽少,分裂繁殖少;而接种浓度高的白念珠菌出芽较多,分裂繁殖更多;随着时间的延长,接种浓度高的情况下更早形成成熟生物被膜.结论 菌体密度与白念珠菌生物被膜形成及tyrosol的产生之间存在相关性.
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Tyrosol和Farnesol对白念珠菌生物被膜形成作用初探
目的 研究密度感应分子(quorum sensing molecule)tyrosol(对羟基苯乙醇)和farnesol(法呢醇)对白念珠菌生物被膜形成的调控作用.方法 在tyrosol和farnesol干预下构建白念珠菌临床株和标准株生物被膜,在倒置显微镜下观察细胞形态,应用RT-PCR技术检测密度感应分子对白念珠菌HTA1和EFG1基因表达的调控作用,并采用MTT法观察密度感应分子对细胞活性的影响.结果 tyrosol对白念珠菌生物被膜的菌丝发生和细胞活性无明显促进作用,也无法中和farnesol对菌丝发生和细胞活性的抑制作用.tyrosol使白念珠菌生物被膜内细胞HTA1的表达增强,对EFG1的表达并无明显影响;tyrosol不能改变famesol对HTA1和EFG1表达的抑制作用.结论 tyrosol能在一定程度恢复口腔白念珠菌生物被膜内细胞的活跃状态,但当tyrosol与famesol同时存在时,tyrosol的作用被后者的抑制效应所掩盖,细胞对farnesol更敏感.
