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重组结核抗原痘苗病毒免疫次数和免疫途径对免疫原性的影响
卡介苗(BCG)是目前用于预防结核病的惟一疫苗,但其对成年人结核病的预防效果不理想.本研究前期工作已构建了5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组痘苗病毒,其免疫小鼠2次后均可激发针对结核杆菌抗原的特异性细胞免疫.然而,重组安卡拉痘苗病毒(MVA)是一活的病毒载体[1],此重组病毒是否能多次免疫动物以及多次免疫动物后能否产生更有效的免疫反应尚不清楚.
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HIV-2 gp105重组鸡痘病毒引起小鼠细胞和体液免疫应答
人免疫缺陷病毒Ⅱ型(human immunodeficiencyvirus type 2,HIV-2)于1986年在几内亚-比绍被发现.起初HIV-2仅在西非呈区域性流行,随后在欧洲、美洲和亚洲也出现了感染者和发病者.我国的首例HIV-2感染者于1998年在福建省发现[1],并检测出HIV-1与HIV-2的共感染患者[2].因此,研究有效的HIV-2疫苗势在必行.HIV-2 env基因编码前体蛋白gp140,后者裂解后生成外膜蛋白gp105和跨膜蛋白gp36.gp105是病毒的主要抗原,其表面具有大量的Ab表位、TH表位和CTL表位,能诱导机体产生强烈而广泛的中和抗体和细胞毒(CTL)反应,因此是基因工程疫苗研究的重要靶点.本研究将已构建的HIV-2 gp105重组鸡痘病毒大量制备后免疫BALB/c小鼠,观察其在小鼠体内的免疫原性,以获得第一手的实验资料.
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肿瘤坏死因子α基因转导的疫苗对小鼠肝癌移植瘤的影响
应用我院已构建的肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为免疫原,进行小鼠免疫接种,观察接种后小鼠对移植的肿瘤细胞的免疫排斥作用,探索其能否作为一种肝癌疫苗.
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乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染
目的:构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株.方法:用PCR法扩增HBV X基因序列,将其添A后连至PUCmT载体上,用EcolI和HindⅢ双酶切PUCmT-X和PcDNA3载体,连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重组质粒PcDNA3-X.用脂质体转染法将PcDNA3-X及空质粒PcDNA3导入肝细胞HL-7702中,G418选择培养,RT-PCR鉴定其稳定表达.结果:已构建的PcDNA3-X经序列测定含有完整的HBV X基因片段,转入HL-7702细胞后经RT-PCR证实该细胞有稳定表达X蛋白.结论:成功构建了表达HBV X基因的肝细胞株,为进一步探讨HBV X基因在肝炎与肝癌发生中的作用提供了理想的实验模型.
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不同引物在血液PCR筛选HBV转基因小鼠中效果评价
本研究是利用本公司已构建的HBV adr亚型转基因小鼠,针对HBV S1、S和C抗原编码区基因的不同特点分别设计三对引物,通过对比其血清PCR结果,以探究快速、有效筛选该HBV adr亚型转基因小鼠的方法.
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马鞍山市贵都社区糖尿病患者现状调查与分析
糖尿病是由胰岛素抵抗和(或)胰岛素分泌缺乏所致的一组以高血糖为特征的慢性疾病。糖尿病已成为全球第3位威胁人类健康的慢性非传染性疾病[1]。近年来我国糖尿病患病率明显增高,已成为全球糖尿病患病率增长快的国家之一。防治糖尿病已成为社区慢病管理的重要内容。贵都社区卫生服务站已构建社区健康管理平台,我作为一名社区基层医生,对贵都社区121例糖尿病患者进行了深入的调查分析,为进一步研究社区糖尿病防治工作提供参考,现总结报告如下。
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上海市打击无证行医执法联动机制探讨
无证行医严重危害患者的身体健康和生命安全,扰乱医疗服务市场秩序。近年来,卫生部门先后开展了一系列大规模打击无证行医专项执法活动,查处了一大批无证行医案件,无证行医猖獗行为在一定程度上得到遏制。然而,无证行医仍屡禁不止,致死、致残数仍然居高不下。为遏制无证行医蔓延,自2007年起,卫生部门就积极探索构建打击无证行医执法联动工作机制。自2008年起,上海市政府每年均将打击无证行医工作列入上海平安建设实事项目。2009年,宝山、闸北、嘉定、杨浦、虹口区共同探索实践上海东北5区执法联动模式,通过组建联合队伍,加强信息沟通和协调,解决以往执法过程中信息不畅,效率不高,边界不清,力量单薄等问题[1]。至2012年,经过6年努力,已构建打击无证行医执法联动机制,现将成效报道如下。
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慢病毒介导的血管内皮生长因子干扰对瘢痕成纤维细胞及内皮细胞的影响
增生性瘢痕是创面愈合过程中的病理现象,严重影响患者的容貌、外观,有的甚至引发功能障碍.在临床上,瘢痕进展的过程中皮肤颜色的变化提示瘢痕的形成和成熟与组织中血管的作用有关.抗血管生成可能能够治疗增生性瘢痕.本实验室前期已构建了针对人血管内皮生长因子(VEGF)的干扰慢病毒,本研究拟在体外瘢痕成纤维细胞培养模型上探讨稳定的干扰VEGF对成纤维细胞的影响和内皮细胞的影响.
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Ad-IL-24诱导U87-MG人脑胶质瘤细胞凋亡的研究
脑胶质瘤是中枢神经系统常见的恶性肿瘤,约占所有脑肿瘤的50%,目前多采用手术、放疗及化疗等常规疗法,但大部分患者预后不佳[1].我们利用已构建的腺病毒介导白细胞介素-24(IL-24)基因表达载体(Ad-IL-24),观察其对U87-MG人脑胶质瘤细胞的生长抑制和凋亡作用,并探讨其分子机制.
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血管生成抑制因子Arresten基因对裸鼠移植瘤的研究
Arresten是新发现的一种强有效血管生成抑制因子,是Ⅳ型胶原α1链的羧基末端NC1结构域多肽片段;它能有效抑制新生血管形成及肿瘤的生长和转移[1].近,我们采用RT-PCR方法和基因重组技术,已成功地完成了人arresten基因的分子克隆与序列测定[2].并已构建arresten基因的原核表达载体,且在大肠杆菌中进行了表达,在此基础上,我们拟构建arresten基因的真核表达载体,并观察体内转染质粒DNA-脂质体复合物的方法对裸鼠移植瘤的影响.
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上海市新生儿听力筛查工作
上海市从2002年开展新生儿普遍听力筛查以来,4年间已构建了较为完整的新生儿听力筛查干预体系,本文对上海近几年实施新生儿听力筛查的宏观管理及实施效果进行回顾.