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聚合酶链反应与生物化学反应方法鉴定单核细胞增多性李斯特菌的比较
李斯特菌病是一种波及中枢神经系统的新发食源性疾病,以病死率高、传播迅速、波及范围广、能引起大流行为特征,单核细胞增多性李斯特菌是引起李斯特菌病的病原菌.
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外周血细胞黏附分子CD11c、CD18的表达 与急性缺血性脑卒中预后的相关性分析
目的:探索外周血细胞黏附分子CD11c、CD18的表达在急性缺血性脑卒中(AIS)中的变化及其相关性.方法:采用回顾性分析方法,收集2017年6月至2018年6月本中心收治的AIS患者120例(病例组),出院后随访90d,根据改良Rankin评分(mRS)分为预后良好组(mRS≤2分)和预后不良组(mRS≥3).另选取同期招募的健康体检者120例(健康对照组).对不同分组受检者的外周血中性粒细胞(PMN)和单核细胞(MNL)表面的CD11c、CD18进行测定,随后对比各组受检者各项数值的差异和相关性.结果:病例组MNL和PMN表面CD11c、CD18的表达量显著高于健康对照组(P<0.05).病例组入院第1、3、7、14天各时间段PMN和MNL表面CD11c、CD18的表达量均显著高于健康对照组(P<0.05).病例组PMN表面CD11c、CD18的表达量第1～3天逐渐升高,第3天达到高峰,第7天逐渐下降,但第14天仍高于健康对照组(P<0.05);MNL表面CD11c、CD18的表达量第1～7天逐渐升高,第7天达到高峰,第14天逐渐下降,但仍高于健康对照组(P<0.05).预后不良组MNL和PMN表面CD11c、CD18的表达量高于预后良好组(P<0.05).MRS评分与MNL和PMN表面CD18表达量呈正相关性(P<0.05);且与MNL和PMN表面CD11c表达量也呈正相关性(P<0.05).结论:MNL和PMN表面CD11c、CD18表达量与AIS预后密切相关,是AIS患者潜在的预后评估标记物.
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子宫内膜异位症患者在位内膜分泌RANTES及对单核细胞的趋化活性
目的 了解子宫内膜异位症(Em)患者的在位内膜在分泌RANTES及对单核细胞的趋化活性是否有别于非Em患者子宫内膜. 方法 白细胞介素(IL)-1β刺激培养Em与非Em患者子宫内膜基质细胞,分别在刺激培养后12、24、36、48、60、72、84和96 h取上清酶联免疫吸附试验(ELISA)检测RANTES水平;Boyden小室趋化实验分析刺激培养上清液对单核细胞的趋化活性及RANTES趋化单核细胞的能力. 结果 Em在位内膜从刺激培养60 h始,RANTES分泌量及趋化单核细胞的能力显著高于非Em在位内膜;Em在位内膜基质细胞刺激培养60 h上清所趋化的单核细胞中有55%是由RAN-TES趋化而来. 结论 在相似的培养条件下,Em患者的在位内膜基质细胞RANTES的表达模式和趋化单核细胞的活性不同于非Em患者子宫内膜.
关键词： 在位内膜RANTES 单核细胞 子宫内膜异位症 -
EPA、DHA对人单核细胞NO的产生、iNOSmRNA表达及NFκB活性的影响
目的 探讨n-3多不饱和脂肪酸(Eicosapentaenoic acid EPA,Docosahexenoic acid DHA)对人单核细胞炎症因子--一氧化氮(NO)的分泌和诱导型NO合酶(iNOS mRNA)表达的影响,以及EPA、DHA对核转录因子(NFκB)与DNA结合活性的影响.方法 硝酸还原酶法测定NO的含量,RT-PCR技术分析iNOSmRNA表达水平,凝胶电泳迁移实验检测NFKB与DNA的结合活性.结果 EPA、DHA在10～20tμg/ml浓度范围内能够降低体外培养的人外周血单核细胞NO的分泌和iNOS mRNA的表达并降低NFκB的DNA结合活性.结论 EPA,DHA能够抑制单核细胞炎症因子NO的产生,减少iNOS mRNA的表达,并通过抑制信号转导途径中NFκB与DNA的结合活性这一通路来抑制炎症因子分泌,产生抑制炎症作用.
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维生素A和锌联合在体外诱导人外周血单核细胞DNA损伤的研究
目的通过碱性单细胞电泳凝胶技术和流式细胞术,研究维生素A和锌联合在体外诱导人的外周血单核细胞(PBMC)DNA的损伤.方法分离健康人PBMC在体外培养,分别加入不同剂量的维生素A和锌改变培养基环境,通过单细胞电泳凝胶技术和流式细胞术,分别检测各个剂量组PBMC的细胞凋亡率与DNA断裂情况.结果体外培养时补充适量的锌和维生素A尚未使PBMC凋亡率增加,没有加重DNA损伤,但同时补充过量的锌和维生素A就会引起PBMC的广泛凋亡和严重的DNA损伤(P<0.05),且比由于维生素A或锌单独过量引起的损伤更严重.当维生素A过量时,补充适量锌对已损伤的细胞有一定的修复作用,但可能会扩大受损的细胞范围;当锌过量时,补充适量维生素A对正常细胞有一定的保护作用,但可能会加剧已受损细胞的损伤程度.结论在体外试验中,过量的补充维生素A和锌可能会造成人的PBMC的DNA单链严重损伤,具体机理尚须进一步研究.
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78件熟肉制品单核细胞增生性李斯特氏菌污染情况调查
为了解北京市石景山区熟肉制品被单核细胞增生性李斯特氏菌(以下简称单增李斯特氏菌)的污染情况,1999年对采自市场和加工企业委托检验的78件熟肉制品进行了单核增生性李斯特氏菌污染情况调查.
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下肢动脉硬化闭塞症患者外周血单核细胞围术期变化研究
目的 探讨下肢动脉粥样硬化闭塞症(ASO)患者围术期外周血单核细胞计数变化及其临床意义.方法 回顾性分析2014年5月至2017年5月北京石景山医院76例成功行腔内治疗的ASO患者的临床资料,按Fontaine分期分为对照组(FontaineⅡ期)44例和严重肢体缺血(CLI)组(Fontaine分期Ⅲ、Ⅳ期)32例,对比两组患者性别、年龄、吸烟指数、合并糖尿病、合并高血压、围术期单核细胞计数情况.结果 与对照组相比,CLI组入院时单核细胞计数显著升高[(0.850±0.183) ×109/L比(0.478±0.091)×l09/L,P＜0.001],且合并糖尿病比例较对照组明显升高(P=0.009);二组患者血运重建术后单核细胞计数均较术前显著下降(P＜0.001),在年龄、吸烟指数、合并高血压等方面比较,差异无统计学意义.多因素回归分析表明外周血单核细胞计数是ASO患者肢体缺血严重程度的唯一独立预测因子(P＜0.001).结论 CLI患者外周血单核细胞计数显著升高,行腔内治疗后缺血改善,单核细胞计数下降;外周血单核细胞在ASO患者的临床诊断与治疗具有重要意义,术后单核细胞的次级动员“二级波”可能是血管修复与重建的关键.
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SE-9000血球计数仪的维护保养
SE-9000血球计数仪是日本希森美康(SYSMEX)公司生产的高档五分群血球计数仪,每小时分析多达120个标本,可以分析血液的23项参数.用直流阻抗法对白细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞进行计数;用鞘流直流阻抗法对红细胞、血小板进行计数:用SLS血红蛋白法测定血红蛋白浓度;用RBC累积脉冲高度检测红细胞压积;用射频/直流阻抗法对淋巴细胞、单核细胞进行计数;其余14项血液参数由机器通过计算得出.SE-9000可用手动模式、末梢血模式、进样器模式进行血液分析,以满足不同的需要.该机标准配置主要由主机、进样器单元、数据管理系统(DMS)、压缩机、电源供应单元五部分组成.本文就该机的各组成部分及维护保养方法作一介绍.
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结核分枝杆菌抗原对人单核细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白12表达的影响
目的 研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原对人单核细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白12(NLRP12)表达的影响,为深入研究NLRP12在结核病中的作用奠定实验基础.方法 采集15例活动性肺结核患者和15名健康人的抗凝血,分离外周血中单核细胞,用Mtb抗原H37Rv全菌裂解液、早期分泌靶抗原6 (EAST-6)和培养分泌蛋白10(CFP-10)的抗原多肽刺激,提取单核细胞的总RNA,采用荧光定量PCR方法检测NLRP12 mRNA的表达,采用配对t检验分析刺激前后单核细胞NLRP12的表达差异.以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 全菌裂解液、EAST-6和CFP-10抗原多肽刺激后的活动性肺结核患者单核细胞与未刺激前的单核细胞相比,其NLRP12 mRNA的表达显著下调,由未刺激前的(1.8±1.26)×10-2分别下降到(1.09±0.78)×10-2(t=3.826,P＜0.01)和(1.14±0.87)×10-2(t=3.695,P＜0.01).全菌裂解液、EAST-6和CFP-10抗原多肽刺激后,健康人单核细胞中NLRP12 mRNA的表达与未刺激前相比也降低,由未刺激前的(1.65±0.99)×10-2分别降至(1.2±0.87)×10-2(t=1.909,P＞0.05)和(1.38±1.02)×10-2(t=1.151,P＞0.05),差异无统计学意义.结论 Mtb抗原体外刺激能够抑制活动性肺结核患者单核细胞NLRP12的表达.
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佛波酯诱导THP-1细胞分化条件的优化及自噬模型的建立
目的 探讨佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导THP-1细胞(人类单核/巨噬细胞)分化的优条件,建立相关自噬模型,为基于细胞自噬模型的研究奠定实验基础.方法 采用PMA诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞;用表达融合蛋白pcDNA3.1-YFP-LC3质粒转染THP-1细胞,YFP为黄绿色荧光蛋白,以示踪自噬体的形成.采用倒置显微镜观察不同浓度(0、10、20、50、100、200 ng/ml)、不同时间(0、24、48、60 h)PMA分化细胞形态学变化;采用荧光显微镜示踪不同条件下LC3点聚集的增强;实时荧光定量聚合酶链式反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测自噬相关基因mRNA的表达.采用SPSS17.0软件进行统计分析.mRNA相对含量2-△△Ct用“(x)±s”表示.经比较Ct值法分析基因表达差异.Earle's balanced salts solution(EBSS,又称饥饿培养基),诱导细胞自噬相关基因mRNA表达量变化的比较采用t检验分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 PMA浓度为100 ng/ml、诱导时间为24～48 h时,THP-1细胞分化成巨噬细胞的形态学状态较理想.饥饿培养基EBSS处理分化的THP-1细胞,能增加自噬体YFP LC3点聚集,其自噬相关基因LC3、Atg5、Atg7、Beclin1的mRNA表达水平显著增加(2-△△Ct均值分别为1.35±0.16、1.18±0.39、1.44±0.12、1.08±0.09,t值分别为4.00、2.90、5.16、3.57,P值均＜0.05).结论 PMA在浓度为100 ng/ml、24～48 h时诱导THP-1分化为巨噬细胞状态较理想;成功构建了THP-1源性细胞自噬模型.
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结核分枝杆菌早期分泌抗原靶-6(ESAT-6)对人THP-1单核细胞IL-12产生的影响
目的 研究结核分枝杆菌早期分泌抗原靶-6(ESAT-6)对人THP-1单核细胞IL-12产生的影响及其作用的细胞信号传导机制.方法 应用亲和层析方法纯化大肠埃希菌表达重组的结核分枝杆菌ESAT-6抗原,采用ELISA法检测不同浓度ESAT-6刺激人THP-1单核细胞IL-12产生的影响,以及对LPS刺激的反应,应用各种细胞信号传导通路抑制剂来探讨ESAT-6诱导单核细胞IL-12产生相关可能的信号通路.结果 结核分枝杆菌ESAT-6分泌抗原在2.5～10 g/ml浓度范围能依赖性地刺激人THP-1单核细胞产生IL-12(p70及其亚单位p40).细胞信号传导通路JNK-MAPK的选择性抑制剂SP600125能促进ESAT-6刺激单核细胞IL-12p40产生,而信号通路PKR抑制剂2-AP有显著性抑制其作用.结论 ESAT-6抗原诱导人THP-1单核细胞IL-12产生,JNKMAPK及PKR信号通路可能参与了此过程的调控.
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肺结核患者血清MMP-9和VEGF水平检测的临床研究
肺结核病是一种肉芽肿疾病,其疾病过程与肺单核细胞和巨噬细胞有关,且其损伤主要是血管源性的[1].MMP-9、VEGF为人体内重要的促血管生长因子,并与多种炎性疾病等有关,且二者均可由肺单核/巨噬细胞分泌产生[2-3].
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利福平致血小板减少二例
例 1 女,19岁,学生.因“咳嗽、咯痰15d,痰血1次”,于2009年7月21日就诊于我所.患者否认药物过敏史和家族遗传性疾病史.查体:皮肤黏膜无黄染及瘀点瘀斑,左下肺闻及少许湿啰音,心腹检查无异常.血常规:白细胞(WBC)5.1×109/L,红细胞(RBC)3.69×1012/L,血红蛋白(Hb)116 g/L,血小板(PLT)120×109/L,淋巴细胞(LYM)0.314,中值细胞(嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及单核细胞之和)(MXD)0.082,中性粒细胞(NEUT)0.604.
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治疗肺结核合并Gilbert综合征一例
患者,男,50岁.2009年4月8日因“肺结核化疗1个月,恶心、厌食、乏力1周余”住院.患者1个月前因咳嗽、略痰15d,就诊于孝感市中心医院.胸部CT示右肺上叶后段、下叶背段及中叶斑片状、结节状高密度影.血常规:WBC 4.2×109/L,RBC 3.84×1012/L,血红蛋白(Hb) 127 g/L,血小板(platelet,PLT)110×109/L,淋巴细胞比率0.292,单核细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞比率之和0.080,中性粒细胞比率0.628.肝功能:丙氨酸转移酶( alanine transaminase,ALT) 23 U/L,总胆红素(serum total bilirubin,STB) 44.7μmol/L,结合胆红素(conjugated bilirubin,CB)5.7 μmol/L,非结合胆红素(unconjugated bilirubin,UCB) 39.0 μmol/L.肾功能正常,乙肝表面抗原和表面抗体、e抗原和e抗体、核心抗体均阴性,丙肝抗体IgM和IgG、甲肝抗体IgM、戊肝抗体IgM均阴性,肝胆脾及双肾B超均无异常.诊断为黄疸并肺结核可能.
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利福平诱发抗中性粒细胞胞质抗体阳性小血管炎2例
抗中性粒细胞胞质抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody ANCA)是一组以中性粒细胞、单核细胞胞质为靶抗原的抗体谱,可作为某些原发性小血管炎的标志抗体[1].
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半套式PCR检测牛奶中单核细胞增生性李斯特氏菌
单核细胞增生性李斯特氏菌(Listeria monocytogenes, LM)对牛奶等食品均有不同程度的污染,[1]低温冷藏时仍可存活并繁殖使人致病甚至死亡,[2]是食品中的重要病原菌,被列为九十年代食品中4大病原菌之一.
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脓毒血症病人外周血单核细胞CD14、HLA-DR表面表达的临床意义
目的通过研究脓毒血症病人单核细胞CD14、HLA-DR的表面表达来评价其免疫状况和预后,并据此来寻找对脓毒血症病人进行免疫调节治疗时机和方法.方法在病人被确诊为脓毒血症后的第1、3、5、7、14、21、28天测定外周血单核细胞CD14、HLA-DR的表面表达量及它们的平均荧光强度(MFI),一旦病人脓毒血症消失,上述检测自动停止.并在抽血的当天对病人进行APACHE-Ⅱ和SOFA评分.病人被诊为脓毒血症后的第1次测量为初次测量,后一次测量为末次测量.结果31例脓毒血症病人中,10例死亡,21例存活.死亡组%CD14、MFI(CD14)均明显低于存活组,APACHE-Ⅱ评分、SOFA评分均明显高于存活组;HLA-DR、MFI(HLA-DR)分别与存活组比较均无明显差异.存活组初次%CD14、MFI(CD14)、HLA-DR、MFI(HLA-DR)分别与死亡组比较,均无明显差异(P＞0.05);存活组末次CD14、HLA-DR均明显高于初次CD14、HLA-DR(P＜0.05),死亡组无明显差异(P＞0.05).结论脓毒血症病人外周血单核细胞CD14、MFI(CD14)、HLA-DR、MFI(HLA-DR)表面表达量的初次测定值与预后无关;%CD14或HLA-DR值呈下降趋势而APACHE-Ⅱ或SOFA评分升高者,提示病人处于免疫抑制状态,预后较差,此时可能是采用rINF-γ进行免疫调节治疗的佳时机.
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肝硬化患者外周血单核细胞绝对值检测的临床意义
目的:探讨肝硬化患者外周血单核细胞绝对值检测的临床意义.方法:分别检测216例健康体检者和5058例肝硬化患者的外周血单核细胞绝对值,分析外周血单核细胞绝对值变化与肝硬化患者的预后、肝功能损害程度以及并发症的关系.结果:观察组外周血单核细胞绝对值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).肝硬化死亡组外周血单核细胞绝对值高于肝硬化存活组,差异有统计学意义(P<0.01).外周血单核细胞绝对值与肝功能分级的相关系数0.35.结论:肝硬化患者外周血单核细胞绝对值明显升高,并与肝硬化患者的预后、肝功能损害程度、是否并发肝性脑病及上消化道出血等因素有密切关系.
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心房颤动心肌单核细胞的浸润水平
目的:探讨炎症与房颤发展与维持的关系.方法:将40例风湿性心脏病接受换瓣手术患者,按病史及心电图表明的心律情况分为两组,窦性心律组22例,慢性房颤组18例.以免疫组织化学方法测定单核细胞分布.结果:与窦性心律组比较,慢性房颤组心房组织中单核细胞数量明显增加(P＜0.01).结论:慢性房颤患者心房组织中单核细胞数量明显增加是房颤时炎症参与的证据之一.
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巨细胞病毒感染引起肾病综合征1例报告
肾病综合征(NS)是一组由免疫炎症反应参与的肾脏损害性疾病,而巨细胞病毒(CMV)可感染人T细胞、B细胞和大单核细胞,对人体的免疫功能有严重影响,二者之间有一定的相关性,现将治疗CMV感染引起NS
