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化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用分析
目的 通过对比,探讨了化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值.方法 选取2013年5月至2015年5月在我院的疑似乙型肝炎患者80例,抽取空腹血液样本后都分别进行乙肝病毒以及核心抗体的化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测,并对其检测结果进行分析.结果 化学发光酶免疫分析法检出乙型肝炎病毒阳性78例,检出率为97.5％;而ELISA检出乙型肝炎病毒阳性76例,检出率为95.0％,两种方法的检出率对比差异无统计学意义(P＞0.05).化学发光酶免疫分析法对于乙肝病毒核心抗体IgM与IgG的检测阳性率分别为80.0％和70.0％,而ELISA法检测两种抗体的阳性率则分别为18.8％和20.0％,化学发光酶免疫分析法对乙肝核心抗体IgM与IgG的检测阳性率明显高于ELISA法(P＜0.05).ELISA法检出HBc-IgM的低限为0.135 IU/ml,检出HBc-IgM低限为0.143 IU/ml;化学发光酶免疫分析法检出HBc-IgM低限为0.032 IU/ml,检出HBc-IgG低限为0.038 IU/ml.结论 化学发光酶免疫分析法在乙型肝炎检测中具有高的检出率,尤其对乙肝病毒的核心抗体的检测敏感度较高,值得在临床推广应用.
关键词： 化学发光酶免疫分析法 酶联免疫吸附试验 乙型肝炎病毒 IgM抗体 IgG抗体 -
流行性乙型脑炎病毒IgG抗体捕获酶联免疫吸附试验检测方法的建立
目的 利用流行性乙型脑炎(乙脑)病毒特异性单克隆抗体建立检测人血清中乙脑病毒IgG抗体的捕获ELISA方法.方法 将乙脑病毒特异性单克隆抗体包被在固相载体上,加入灭活并经过纯化的乙脑病毒抗原,再加入待测血清,经洗涤、显色等判定终检测结果.采用免疫荧光法作为对照.结果 与免疫荧光法相比较,本方法的灵敏度为5.6%,特异度为85.7%,一致性为91.3%;本方法的灵敏度和特异度高于市售的两种检测试剂.结论 本研究所建立的乙脑病毒IgG抗体捕获ELISA方法具有良好的检测性能,可以应用于正常人群血清中乙脑病毒IgG抗体的筛查.
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东盟来华人员登革热IgG抗体水平调查
[目的]了解东盟来华人员登革热(Dengue Fever,DF)IgG抗体水平,为口岸登革热预防控制提供依据.[方法]采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测DF IgG抗体,并对检测结果进行统计分析.[结果]多数东盟国家来华人员的DF IgG阳性率都较高;东盟来华人员的DFIgG总阳性率(44.00%)与中国广西人员的阳性率(14.29%)进行比较,差异具有极显著性(χ2=15.2381,P＜0.01).[结论]东盟来华人员DF感染率较高,必须加强对他们的DF监测,防止传染病传入.
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西尼罗热抗体多片段蛋白芯片试剂盒的研制
[目的] 研制西尼罗病毒(WNV)多片段蛋白芯片IgG抗体检测试剂盒.[方法] 构建基于WNV的E蛋白、M蛋白及prM蛋白检测的蛋白芯片,并对芯片的抗原点样浓度、芯片检测的特异性、芯片检测的灵敏度以及芯片检测的可靠性进行测定.并利用ELISA法对研制芯片的检测结果进行对比验证.[结果] 研制芯片的抗原点样适浓度为E蛋白0.05mg/ml、prM蛋白0.04mg/ml、M蛋白0.2mg/ml;其对M蛋白的检测灵敏度达1.5ng/ml.批内重复检测的CV值≤2%;检测结果的准确性和特异性与ELISA法相比基本一致.[结论] 本研究建立的西尼罗病毒多片段蛋白芯片的检测法具有较高的敏感性、特异性和可靠性,可用于西尼罗病毒IgG抗体的检测.
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杭州口岸出入境留学人员麻疹抗体监测结果分析
目的 了解出入境留学人员麻疹免疫状况,为加强口岸麻疹监管提供依据.方法 收集2011年杭州口岸出入境留学人员健康体检资料,采用ELISA法检测了部分人员的麻疹IgG抗体水平,并对监测结果进行流行病学分析.结果 受检出境和入境留学人员麻疹IgG抗体GMC分别为432.89 IU/L、569.63 IU/L,抗体阳性率为90.4％、88.0％,抗体保护率为13.6％、35.4％.各年龄组GMC和抗体保护率均为入境＞出境,19～岁和23～岁组间差异有统计学意义(P＜0.05)；抗体阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).来自非洲地区留学人员抗体阳性率和保护率均明显低于其他区域.结论 出入境留学人员主要集中在高中和大学年龄段,对麻疹的免疫率低于WHO建议水平,属麻疹易感人群,应加强监管.
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珠海禽类养殖场从业人员SARS冠状病毒IgG抗体检测分析
[目的]了解SARS冠状病毒在禽类养殖人员中的隐性感染情况,以探讨SARS冠状病毒的传播与家禽类动物的关系.[方法]采用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法测定禽类养殖场从业人员血清样本中的SARS冠状病毒IgG抗体.[结果]270份血清标本的OD值均小于临界值,表明在禽类养殖从业人员中未检出SARS冠状病毒IgG抗体阳性指标.[结论]本次研究结果显示,在禽类养殖场从业人员中不存在SARS冠状病毒的隐性感染,说明SARS病毒的传播可能与家禽动物没有直接关系.
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南京地区出入境留学人员麻疹抗体的监测结果分析
目的 了解南京地区出入境留学人员麻疹的免疫状况,为加强口岸麻疹监管提供依据.方法 随机抽取南京地区出入境留学人员476名,采用ELISA法对其进行麻疹血清IgG抗体水平的监测.结果 (1)入境留学人员麻疹抗体的几何平均浓度(GMC)显著高于出境留学人员(P＜0.05),其中20～29岁和男性的入境留学人员GMC均显著高于同类出境留学人群(P＜0.05);东地中海地区的留学人群GMC高,西太平洋地区的留学人群GMC低.(2)男性、20～29岁境外留学人员抗体阳性率与同类境内留学人员的差异有统计学意义(P＜0.05).(3)入境留学人员的总体保护率明显高于出境留学人员,其中男性、20～29岁和不同区域的出入境人员之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 出入境留学人员的麻疹IgG抗体水平存在一定的差异,应做好出境留学人员麻疹预防接种史的转录和预防接种工作;有针性地加强入境留学人员的麻疹抗体监测.
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2008年深圳口岸外籍人员血清登革病毒抗体水平监测结果分析
[目的]了解深圳口岸外籍人员中登革病毒(Dengue Virus,DV)感染状况,为我国口岸登革热防控措施提供依据.[方法]用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2008年8-9月入境体检的外籍人员进行血清DV IgM、IgG抗体检测,ELISA可疑结果采用登革热IgG/IgM联合快速检测卡进行复检以终判定结果.[结果]共对440名外籍人员进行了血清DV IgM、IgG抗体检测,IgM抗体阳性率为2.27%(10/440),IgG抗体阳性率为1.14%(5/440).未检出IgM、ISG抗体均阳性者.东南亚地区人员的DV IgM、IgG抗体阳性率分别为7.59%(6/79)和3.80%(3/79);拉丁美洲人员的DV IgM和IgG抗体阳性率均为6.67%(1/15);北美地区人员的DV IgM抗体阳性率为0.99%(1/101)且未检出DV IgG抗体阳性者;欧洲地区人员的DV IgG抗体阳性率为1.59%(1/63)且未检出DV IgM抗体阳性者;非洲和大洋洲人员均未检测出DV抗体阳性者.[结论]与其他地区相比,东南亚和拉丁美洲入境人员携带DV的可能性较大.随着全球人口流动的日益频繁,应进一步加大对口岸传染病的防控力度.
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巨细胞病毒特异性抗体IgG检测方法的建立
目的:建立一种以0.4U/ml为临界值的巨细胞病毒(CMV)特异性抗体IsG的检测方法.方法:用美国食品与药品监督局(FDA)认证的标准品标定临界值标准,以常规间接酶联免疫测定方法(ELISA)进行检测,对检测方法的各个环节进行比较研究,确定检测方法的佳工艺流程;对179份育龄妇女血清进行检测,并经过FDA认证的ELISA方法为金标准与之进行比较.结果:灵敏度、特异性和准确性分别为100%(160/160)、94.7%(18/19)、99.4%(178/179);批内、批间变异系数分别为6.3%～10.5%.9.3%～14.8%,基本符合ELISA方法的标准(10%～15%).结论:本研究建立的CMV-Igc检测方法灵敏度高、特异性好、重复性好,可用于育龄妇女CMV-IgG水平的检测.
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山西省介休市风疹筛查及相关知识态度行为调查
目的:检测育龄妇女和儿童风疹的自然感染率,调查育龄妇女对风疹认知、态度、行为,为山西省实施风疹的疫苗干预提供参考依据.方法:采集2008年1月～6月在介休市计划生育妇幼保健中心进行健康检查,未接种过风疹疫苗的育龄妇女和学龄前儿童的血清,进行IgM与IgG抗体检测,对来该中心接受优生知识培训的育龄妇女进行风疹知识、态度、行为调查.结果:育龄妇女IgG阳性率为69.1%,IgM阳性率为0.34%;儿童IgG阳性率为72.3%,IgM阳性率为0.99%.问卷调查显示,受访对象中96.3%认为孕妇感染风疹会对胎儿造成危害,86.2%认为孕妇不能接种疫苗,愿意免费接种风疹疫苗的占76.4%,若感染了风疹会采纳医生建议引产的占86.5%,产前接受过风疹感染相关检查的占1.6%,接种过风疹疫苗的占5.7%.妇女的教育水平、经济收入都会对风疹的认知、态度、行为产生一定的影响.结论:育龄妇女经过宣传教育,对有关风疹的认知、态度上取得了一定的成效,但在行为上还存在不足,应加强行为方面的宣传教育和有针对性的专题培训.
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7 种检测风疹IgG抗体的试剂盒的比较
目的:比较7种检测风疹IgG抗体试剂盒的效果.方法:7种试剂盒中2种为本室自制,其余5种为国外市售.取262例育龄妇女血清标本按照试剂盒说明书用酶联免疫吸附法完成测定.结果:7种试剂盒Kappa值和方法的可用度分别为0.21～1和24.1%～100%,检测世界卫生组织提供的风疹抗体标准品时,曲线有很好的相关性(γ>0.85);试剂盒检测血清样本时诊断敏感性和特异性范围分别为57.3%～93.3%,53.1%～96.1%.结论:7种试剂盒检测血清标本时有较大的差异,急需进行试剂盒的标准化研究,进一步提高检测的敏感性和特异性.
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风疹病毒IgG抗体检测方法的研究及应用
目的:建立一个以低保护力的抗体水平(15IU/ml)为临界值的风疹病毒特异性IgG抗体的检测方法.方法:用优选的抗原和具有变色功能的标本稀释液,用世界卫生组织提供的标准品标定标准曲线,以常规间接ELISA方法进行检测.结果:对检测方法的各个环节进行了比较研究,确定了检测方法的佳工艺流程.对1005例育龄妇女血清标本进行检测,并与意大利Sorin公司的试剂检测结果进行比较,两种方法呈高度相关(Kappa值为0.85).结论:本文建立的方法具有敏感、特异、简便、快速、可重复性好等特点,适用于育龄妇女风疹病毒抗体水平的筛查.
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新生儿溶血病血清学分析
目的:分析新生儿高胆红素血症患者的血清学检测结果及临床新生儿溶血病(HDN)的检出率.方法:应用微柱凝胶技术对120例疑为HDN的黄疸患儿做"溶血三项试验",即:①直接抗人球蛋白试验;②抗体放散试验;③血清游离抗体试验.结果:ABO血型系统母婴血型不合HDN 83例,检出率为69.17%.检出Rh血型系统母婴血型不合HDN 1例.ABO HDN中,A型检出率与B型检出率无统计学意义.结论:HDN检出率较高,ABO HDN A型与B型血样检出率无显著差别.
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孕妇血型IgG抗体效价与新生儿ABO溶血病的关系
目的 探讨O型血孕妇血清IgG抗A(B)效价与新生儿ABO溶血病(ABO-HDN)的关系. 方法 对母婴ABO血型不合的689例O型血孕妇行IgG抗A(B)抗体检测,新生儿做溶血三项试验及血清胆红素检测. 结果 ABO-HDN发生率为24.1％.O-A组和O-B组ABO-HDN发生率为28.5％和19.0％,差异有统计学意义.随着孕妇血清IgG抗A(B)抗体效价(≤32、64、128、256、≥512)的依次递增,ABO-HDN的发生率逐渐增加,当抗体效价≥256时,ABO-HDN发病率明显增加,不同抗体效价组间ABO-HDN发生率差异均有统计学意义. 结论 ABO-HDN的发生率随孕妇血清IgG抗体效价增高而增加;且新生儿A型血较B型血ABO-HDN发生率高.产前监测O型血孕母IgG抗体效价及新生儿生后即取脐血做血型及HDN检测,有助于ABO-HDN的早发现、早治疗,对优生优育有重要的指导意义.
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巨细胞病毒特异性IgG抗体检测方法的建立及应用
目的 为了建立一种快速、简便、实用的可用于育龄妇女血清中巨细胞病毒(CMV)-IgG抗体的筛查方法,并初步探索其应用价值. 方法 建立重组CMV(pp150+52)抗原;以国家人口和计划生育委员会科学技术研究所(简称本所)建立的重组CMV(pp150+52)抗原作为包被抗原,700 IU/L作为临界值,用间接ELISA方法,对深圳宝安区1 024例血清标本进行CMV-IgG抗体的检测. 结果 该方法 灵敏度为13 IU/L,批内变异系数4.7%～7.0%,批间变异系数7.6%～14.4%,并与SORIN公司生产的试剂盒进行了比较,2种方法 呈度相关,Kappa值为0.82;深圳宝安区1 024例血清标本CMV-IgG抗体阳性率为93.3%(955/1 024),阴性率为6.7%(69/1 024). 结论 本所建立的ELISA方法 快速、简便和实用,可用于育龄妇女CMV-IgG抗体的筛查.
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巨细胞病毒原发感染与非原发感染的鉴别诊断方法
目的 建立一种快速、简便和实用的测定巨细胞病毒IgG抗体亲和指数的方法,作为有效的诊断工具,用于区分孕妇巨细胞病毒近期原发与非原发感染(继发、再感染及持续感染). 方法 用标准的间接ELISA技术测定巨细胞病毒IgG抗体亲和指数(CMV-IgG AJ),以35 mmol/L浓度的二乙胺(温和蛋白变性剂)作为洗脱液. 结果 通过比较4种温和蛋白变性剂对检测方法各个环节的影响,确定了检测方法的佳工艺流程;对127份血清标本进行了检测,其中84例为既往感染标本、17例继发感染标本、15例可疑原发感染和11例原发感染标本,以CMV-IgG AI＜40.0%作为诊断CMV原发感染的临界值,其方法的灵敏度为72.7%,特异性为98.8%,方法的可用度为73.5%. 结论 用35.0 mmol/L浓度的二乙胺洗脱1次,10 min的方法适用于CMV-IgG AJ的测定,目前认为该测定联合CMV-IgM检测是区分原发与非原发CMV感染的佳血清学方法之一.
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测定巨细胞病毒特异性抗体亲和指数的诊断价值
目的 以快速、简便的人巨细胞病毒特异性抗体亲和指数(CMV-IgG AI)检测方法作为有效的诊断工具,用于区分孕妇CMV原发感染与非原发感染. 方法以标准的间接ELISA方法,8.0 mol/L尿素作为温和蛋白变性剂,用标准曲线方法定量测定标本中的CMV-IgG含量. 结果共检测218例标本,其中187例为CMV既往感染标本,31例为继发或再感染、可疑原发感染和原发感染标本.以抗体亲和指数<35.0%作为阳性判断标准,此时方法的灵敏度为75.0%,特异度为91.4%,可用度为67.2%.既往感染、继发或再感染、可疑原发感染、原发感染4组的平均AI值分别是(61.42±25.69)%,(70.38±21.88)%,(66.73±23.62)%,(29.78±25.93)%,原发感染组与其它3组非原发感染比较.差异有统计学意义(P<0.01)). 结论以8.0 mol/L尿素作为温和蛋白变性剂,用标准曲线方法定量测定标本中CMV-IgG含量适用于检测巨细胞病毒IgG抗体亲和指数(CMV-IgG AI),认为CMV-IgM联合CMV-IgG AI检测是区分原发与非原发感染的血清学方法之一.
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O型血孕妇血清中抗-A和抗-B IgG抗体检测方法改进
目的探讨检测O型血孕妇血清中抗-A和抗-B IgG抗体的佳实验条件,为新生儿ABO血型免疫溶血性疾病的早期诊断和预防提供依据.方法用2-巯基乙醇处理血清中IgM抗体后,分别用木瓜酶法、抗人球蛋白法及Biovue法测定其IgG抗体.结果血清倍比稀释后,2-巯基乙醇对抗-A和抗-B的IgM破坏率分别为93.33%(42/45)和97.78%(44/45),与2-巯基乙醇对原血清IgM的破坏率8.89%(4/45)和17.78%(8/45)比较,差异有显著性(P＜0.005).温浴20 min,2-巯基乙醇对抗-A和抗-B的IgM破坏率分别是93.33%(42/45)和95.56%(43/45);与温浴15 min的破坏率80.00%(36/45)和88.89%(40/49)比较,差异有显著性(P＜0.005);与温浴25 min的破坏率95.56%(43/45)和97.78%(44/45)比较,差异无显著性(P＞0.05).用木瓜酶法、抗人球蛋白法、Biovue法测定IgG抗体,其结果差异有显著性(P＜0.005).结论先将血清作倍比稀释,加等量2-巯基乙醇,在37℃温浴20 min后,用木瓜酶法检测IgG抗体为佳方法.
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宜宾市南溪区2011年健康人群麻疹抗体水平监测分析
目的 了解宜宾市南溪区健康人群麻疹抗体水平,评价麻疹疫苗接种效果和人群免疫状况,为制定免疫规划策略和防治措施提供依据.方法 按照分层随机抽样的原则抽取健康人群6222人,采用酶联免疫(ELlSA)法检测麻疹IgG抗体.结果 共检测6222份血清标本,麻疹IgG抗体阳性率为92.51％,各年龄组间抗体阳性率有显著性差异,14～16岁年龄组阳性率低.结论 通过接种麻疹疫苗预防麻疹是既经济又有效的预防手段,提高麻疹疫苗的接种质量和接种率,提高麻疹监测系统的灵敏性、准确性和及时性,消除免疫空白,是为进一步控制乃至消除麻疹的坚实基础.
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蛋白印迹法检测梅毒IgG抗体
目的 探讨蛋白印迹法(Western Blot,WB)检测梅毒IgG抗体的意义.方法 采用蛋白印迹法检测梅毒孕妇新生儿血清标本24例,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体被动明胶颗粒凝集试验(TPPA)结果相比较.结果 24例梅毒孕妇新生儿血清标本TRUST18例阳性,TPPA和WB24例均为阳性,WB24例均检测出针对15Kda(千道尔顿)、17Kda、45Kda和47Kda多肽抗原抗体.结论 蛋白印迹法是一种理想的梅毒确认实验,适用于临床广泛开展.
