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沈阳地区病毒性脑炎患儿单纯疱疹病毒和柯萨奇B组病毒特异性IgM抗体的检测
近年来病毒性脑炎成为小儿神经系统的常见疾病,多种病毒都可引起本病,单纯疱疹病毒(HSV)和柯萨奇B组(CoxB)病毒引起的该病较多.本文应用酶联免疫吸附方法(ELISA)对我院住院的53例病毒性脑炎患儿的脑脊液(CSF)标本进行了HSV和CoxB特异性IgM抗体检测,报告如下.
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丹参对脑梗死患者急性期血清可溶性细胞间粘附分子影响的研究
目的:观察脑梗死患者急性期血清可溶性细胞间粘附分子(sICAM-1)浓度的变化,探讨丹参对slCAM-1的影响.方法:60例急性脑梗死患者分为丹参治疗组(30例)和常规治疗对照组(30例),采用酶联免疫吸附方法分别检测急性期(起病1、4、7、14天)血清sICAM-1的浓度.结果:脑梗死患者血清slCAM-1水平明显高于正常对照组(p<0.001),入院后第7、14天丹参治疗组病人血清sICAM-1浓度(425.38±83.33/340.89±100.51)明显低于常规治疗对照组血清sICAM-1浓度(550.97±105.74/397.52±78.58),有显著差异(p<0.01).结论:血清中sICAM-1浓度能够较准确的反映脑梗死后炎性反应介导的脑损伤程度和炎性反应的进程.丹参可以抑制急性脑梗死患者s1CAM-1的水平,从而减轻急性期脑组织缺血所致的炎症反应.
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尿铜蓝蛋白检测临床应用评价
目的建立铜蓝蛋白酶联免疫吸附方法,开展临床糖尿病、糖尿病肾病尿铜蓝蛋白检测并评价其意义.方法对本院内科诊断的720名患者按所患疾病分组,分别收集尿样,采用酶联免疫吸附测定方法,检测尿中铜蓝蛋白和微量白蛋白分泌率,对结果进行统计分析比较.结果 (1)糖尿病病人、糖尿病肾病病人的尿铜蓝蛋白分泌率(ceruloplasmin excretion rate CER)和尿微量白蛋白分泌率(albumin excretion rate AER)的变化趋势呈一致性,二者正相关,r=0.8;(2)临床应用结果表明,对糖尿病肾病早期诊断的真阳性率为:CER达84%,AER达71%;假阴性率CER 16%,AER 29%.(3)糖尿病组、糖尿病肾病组、高血压组CER均值分别为(262±104)ng/min、(549±149)ng/min、(188±70)ng/min.结论 (1)尿铜蓝蛋白检测是糖尿病肾病早期诊断的敏感指标;(2)尿铜蓝蛋白与微量白蛋白呈正相关性;(3)尿铜蓝蛋白检测有助于提高糖尿病肾病早期诊断的真阳性率并降低其早期诊断的假阴性率.
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双单抗夹心ELISA方法检测血浆及组织中金葡菌肠毒素B
目的:细菌学研究表明,可溶性外毒素的产生是革兰阳性菌(G+菌)感染的重要标志之一,在G+菌感染性疾病的发生、发展中具有重要意义.其中金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)肠毒素和中毒性休克毒素-1(TSST-1)因其"超抗原"特性,以及它们在脓毒症和中毒性休克综合征中的特殊意义而倍受关注.本文建立了一种敏感、快速的酶免疫测定方法,用于定量检测动物体液及组织中金葡菌肠毒素B(SEB).方法:采用生物素-链亲素系统放大的双抗体夹心酶联免疫吸附方法,以SEB单抗1D2为包被抗体、生物素标记的另一种SEB单抗2D1为标记抗体进行测定.结果:在0.039~10.000μg/L浓度范围内将SEB标准品进行倍比稀释,平行测定4次.当SEB标准品浓度为0.039μg/L时,测得的平均A值仍明显高于阴性对照(分别为0.193和0.108).若以样品A值/阴性对照A值大于2(P/N>2)作为阳性判断标准,则低检出限为0.078μg/L(A=0.220).在0.078~10.000μg/L的浓度范围内,SEB标准品浓度与吸光度值线性关系良好,相关系数为r=0.9906,平均变异系数为5.32%.为了考察方法的精确度,在标准曲线适用的范围内选择3个SEB浓度(10.000μg/L、5.000μg/L和2.500μg/L),每个浓度重复测定4次,变异系数分别为6.82%、5.25%、和3.90%,平均变异系数为5.32%.回收实验显示,正常大鼠、家兔和人血浆中的平均回收率分别为96.43%、97.34%和19.99%,正常人尿液中平均回收率为91.53%.上述结果表明该方法准确性较高,可用于定性及定量检测动物血浆及人尿液中的SEB.结论:本法灵敏度高、准确性好、稳定性强,而且简便、快速,适用于动物血浆及组织中微量SEB的定量测定,并有一定的临床应用前景.
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卵巢上皮性癌患者血清可溶性细胞间粘附分子-1检测的临床意义
近年来,人们注意到卵巢癌与粘附分子之间的关系.细胞间粘附分子-1 (ICAM-1)表达上调,可出现于肿瘤、自身免疫和内分泌等多种疾病[1].ICAM-1除可表达于细胞表面外,还可以循环形式存在于机体血清和其他体液中,即可溶性ICAM-1(sICAM-1).我们采用酶联免疫吸附方法,检测卵巢上皮性癌、卵巢良性肿瘤和正常妇女血清中sICAM-1的水平,并结合检测血清CA125的水平,探讨血清中sICAM-1在卵巢癌诊断中的价值.
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血清多肽SPG01、SPG03、SPG04检测鼻咽癌放疗敏感性的初步研究
应用血清多肽SPGO1、SPG03、SPG04的多抗(PcAb)酶联免疫吸附方法(ELISA),用于鼻咽癌放疗敏感性的检测.以碳二亚胺偶联法制备多肽免疫抗原,免疫动物制备兔血清多抗,用Protein A亲和层析法纯化多抗,选择3种多抗的工作滴度,应用多抗ELISA法检测63份鼻咽癌血清样本.紫外(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)联合监测表明多肽偶联到BSA(牛血清白蛋白)上;动物免疫获得3种兔血清多克隆抗体各40 mL;纯化后的多抗纯度在90%以上,效价均在1:100 000以上;3种多抗的检测滴度分别为1:20000,1:100000,1:10 000;间接ELISA低检测限为0.03 μg/mL,相对标准偏差(RSD)为5.6%.t检验分析3种多肽区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,均呈显著差异(P <0.000 1).ROC曲线表明,3种多肽检测鼻咽癌放疗敏感性的特异性在90%以上,灵敏度为73%~93%.3种多肽标志物均能显著区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,所应用的多抗ELISA方法检测鼻咽癌放疗敏感性特异性好,灵敏度高,可用于鼻咽癌个体化治疗的放疗敏感性辅助诊断.
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大肠癌患者血清中可溶性CD44v6定量表达的意义
我们于2000年8月~2002年8月应用定量酶联免疫吸附方法检测大肠癌患者及健康对照组血清中CD44v6含量,探讨CD44v6表达与大肠癌患者临床病理之间的可能参数及相关意义.
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急性肺损伤患者凝血及纤溶相关指标的临床意义
目的 了解急性肺损伤(acute lung injury,ALI)患者早期的凝血、纤溶相关指标的变化规律,评价并筛选具有临床指导价值的指标.方法 采用酶联免疫吸附方法测量实验组和对照组静脉血浆PC值、TM值、Pal-1值,用发色沉淀物方法检查PC活性,比较组间各指标的差异.分析凝血、纤溶相关指标与慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)和MODS的相关性.结果 ALI组中的PC活性抗原的物质富含度明显低于健康组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);TM和Pal-1抗原物质富含度高于健康组,其中Pal-1的抗原的含量与健康组比较差异有显著性(P<0.05);单纯呼吸衰竭亚组的PC活跃度高于MODS,两组比较差异显著(P<0.05),两组PC、TM、Pal-1含量比较无统计学的差异(P>0.05).ALI中PC活性、Pal-1含量与APACHEⅡ跟MODS呈负相关、正相关.结论 ALI患者凝血及纤溶系统发生变化,促凝血活性增大或纤溶活性不强,与病情轻重相关.
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肺癌治疗前后呼出气冷凝液和血浆中CEA、ET-1水平研究
目的 研究肺癌治疗前后呼出气冷凝液和血浆中CEA、ET-1水平变化在肺癌诊治中的临床意义.方法 采用放射免疫分析法和双抗体夹心生物素-亲和素酶联免疫吸附方法,分别在治疗前、治疗后2月、治疗后4月和治疗后6月对36例肺癌患者进行血液和EBC中CEA、ET-1水平的检测.结果 ①肺癌患者治疗前血清和EBC中CEA水平为42.37±27.52 ng/L和27.31±13.21 ng/L,与治疗后2月、治疗后4月和治疗后6月比较,差异有显著意义(P<0.05).②肺癌患者治疗前血清和EBC中ET-1水平为125.78±48.28 ng/L和20.52±11.18 ng/L,与治疗后2月、治疗后4月和治疗后6月比较,差异有显著意义(P<0.05).结论 EBC中CEA、ET-1检测对肺癌的诊断有一定意义,在病情监测、评价治疗效果和预后等方面也有一定的作用.癌胚抗原(CEA)、内皮素-1(ET-1)是肺癌早期诊断和治疗效果评价较常用的肿瘤标记物,呼出气冷凝液(exhaled breath condensate,EBC)检测是一种新方法,具有无创性,重复性好等优点,通过EBC检测肺癌患者的CEA、ET-1,是进行肺癌早期诊断的新途径.本科通过检测36例肺癌患者治疗前后的血清和EBC的CEA、ET-1水平,并观察治疗前后的变化,进行对照研究,以评价EBC检测CEA及ET-1在肺癌的疗效评价中的作用.
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ELISA法快速检测慢性肝病患者血清中TIMP-1
目的应用酶联免疫吸附方法(ELISA)快速检测慢性肝病患者血清中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1),了解TIMP-1血清学检测与肝纤维化病程进展程度.方法以抗人TIMP-1单克隆抗体为包被抗体,15%小牛血清为封闭液,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗人IgG作为酶结合物建立检测人血清TIMP-1 ELISA法,用于临床检测399例肝病患者血清和健康人血清105例.结果临床检测表明肝硬化患者TIMP-1检出阳性率为76.9%,明显高于慢性肝炎(40.7%)和急性肝炎(19.4%)(P<0.005),并随着纤维化程度加重而升高(P<0.01).结论血清中TIMP-1的变化可作为肝纤维化较为有用的诊断指标.ELISA法具有较高的敏感性、特异性和快速性,试剂用量少,且不需复杂的仪器设备,加之实验程序简单,甚适于医院及基层医疗单位应用.
关键词: 慢性肝病 金属蛋白酶组织抑制因子-1 酶联免疫吸附方法 -
子宫内膜异位症中趋化性细胞因子ENA-78、IL-8的表达及意义
目的:探讨趋化性细胞因子ENA-78、IL-8在子宫内膜异位症(EM)发病机制中的作用.方法:应用酶联免疫吸附法测定50例EM患者及20例非EM患者(对照组)腹腔液中ENA-78和IL-8水平.结果:EM组患者腹腔液ENA-78、IL-8的水平 (326.25±231.35pg/ml、3.58±1.98 ng/ml)均显著高于对照组 (123.85±61.42pg/ml、1.25±0.78ng/ml)(P<0.05);EM组Ⅲ~Ⅳ期患者腹腔液中ENA-78、IL-8水平(504.65±256.14pg/ml、4.87±1.59ng/ml)均显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者腹腔液ENA-78、IL-8水平(210.12±102.23pg/ml、2.06±1.55 ng/ml,P<0.05);EM组及对照组增生期和分泌期腹腔液中ENA-78、IL-8差异无统计学意义;腹腔液中ENA-78、IL-8的水平无明显相关性(P>0.05).结论:EM患者腹腔液中ENA-78、IL-8水平增高,与期别相关,可能为子宫内膜异位症的发病因素之一.
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非小细胞肺癌患者血清TGF-β1检测水平的临床研究
目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在非小细胞肺癌患者血清中的检测水平及临床意义.方法:采用ELISA酶免疫分析技术检测53例非小细胞肺癌、31例肺良性疾病、38例正常对照者血清TGF-β1的水平.结果:化疗前NSCLC组患者血清TGF-β1水平明显高于正常对照组及肺良性疾病组,差异显著(P<0.01),肺良性疾病组与正常对照组比较差异不明显(P>0.05),NSCLC肿瘤转移组血清TGF-β1水平明显高于无转移组(P<0.05),化疗前后NSCLC组差异显著(P<0.05).结论:TGF-β1与NSCLC发病有关,血清TGF-β1水平可作为NSCLC患者辅助诊断和疾病观察重要肿瘤标志物之一.
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子宫内膜异位症中趋化性细胞因子ENA-78、IL-8的表达及意义
目的:探讨趋化性细胞因子ENA-78、IL-8在子宫内膜异位症(EM)发生发展中的病理生理意义.方法:应用酶联免疫吸附法测定40例EM患者及38例非EM患者(对照组)腹腔液中ENA-78和IL-8水平.结果:EM组患者腹腔液ENA-78、IL8的水平[(129.48±123.35)ng/L、(75.81±65.92)ng/L]均显著高于对照组[(50.19±18.31)ng/L、(30.58±19.94)ng/L,(P<0.05)];EM组Ⅲ~Ⅳ期患者腹腔液中ENA-78、IL-8水平[(200.02±130.17)ng/L、(117.41±87.92)ng/L]均显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者腹腔液ENA-78、IL-8水平[(51.46±12.42)ng/L、(48.02±19.11)ng/L,(P<0.05)];EM组及对照组增生期和分泌期腹腔液中ENA-78、IL-8差异无统计学意义;腹腔液中ENA-78、IL-8的水平无明显相关性.结论:EM患者腹腔液中ENA-78、IL-8水平增高,且与期别相关,提示趋化性细胞因子在子宫内膜异位症的发生发展中有一定意义.