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柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌抑菌作用机理的研究
目的 观察柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其抑菌作用机理.方法 采用纸片法和稀释法进行抑菌试验;采用电泳法和生化检验法观察抑菌作用机理.结果 柠檬提取物原液对临床分离的耐药金黄色葡萄球菌的纸片抑菌实验抑菌环＞30 mm,小抑菌浓度为柠檬提取物1∶6400稀释度.在不同浓度凝胶电泳图谱中,耐药金黄色葡萄球菌经柠檬提取物作用后发生较明显变化的蛋白质条带共有5条,说明有明显的菌体蛋白电泳图谱的改变;没有观察到柠檬提取物作用后细菌酶活性的改变.结论 柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,该提取物作用后的耐药金黄色葡萄球菌菌体蛋白合成量有明显改变.
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柠檬提取物抑菌及抗病毒作用的研究
目的 研究柠檬提取物抗微生物和保鲜作用.方法 采用纸片法和稀释法对其抑菌效果和抗病毒作用进行了实验室观察.结果 将柠檬提取物原液作1:3200稀释液,对金黄色葡萄球菌标准株抑菌环直径为18 mm;1:10稀释液对大肠埃希菌标准株抑菌环直径20 mm,1:12800稀释液,抑菌环直径11 mm.柠檬提取物1:10稀释液对大肠埃希菌耐药株和克雷伯菌耐药株(产β-内酰胺酶)抑菌环直径分别为30 mm和20 mm,对白假丝酵母菌和啤酒酵母菌抑菌环直径分别为17 mm和14 mm.将1:12800稀释度的柠檬提取物与单纯泡疹病毒混合作用,显示出明显的抗病毒效果.结论 柠檬提取物对细菌及真菌有显著抑制作用,对产β-内酰胺酶菌株也有较强抑制作用;1:12800稀释度的该提取物对单纯疱疹病毒Ⅰ型有明显的抗病毒作用.
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3种中药对金黄色葡萄球菌体外抑菌作用的比较
目的:比较3种中药对金黄色葡萄球菌体外抑菌作用.目的:利平皿挖洞灌药法测定了大豆异黄酮、柠檬提取物和甘肃金银花的抑菌活性.结果:大豆异黄酮、柠檬提取物和甘肃金银花对金黄色葡萄球菌均有较为明显的抑制作用.同时随着浓度的增加,中药的抑菌作用也增强,但达到一定浓度后,其抑菌作用不再加强.结论:大豆异黄酮、柠檬提取物和甘肃金银花都对多重耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,提示其在感染性疾病以及生物膜相关性疾病的治疗中将具有广阔的应用前景.
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柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌抑制作用机制的初步研究
目的 观察柠檬提取物对细菌生物膜的消除作用,研究柠檬提取物抑制多重耐药金黄色葡萄球菌的机理. 方法 采用高分子滤膜法制备金黄色葡萄球菌生物膜后,加入柠檬提取物分别作用1、2和3 h,通过细菌菌落计数判定各组细菌存活数;采用SDS-PAGE电泳法,观察在柠檬提取物作用下菌体蛋白质的变化;EcoRⅠ酶切金黄色葡萄球菌DNA,观察酶切图谱的改变;在低渗环境下动态观察柠檬提取物作用不同时间对细菌细胞壁的影响. 结果 柠檬提取物对具生物膜的细菌有杀菌作用,且随作用时间的延长而逐渐增强,柠檬提取物作用15 min时细菌呈现明显的胞壁缺损现象,即细菌个体胀大,呈现大球形;柠檬提取物对细菌蛋白质的组成和表达量均有一定影响,同时细菌DNA 的EcoRⅠ酶切图谱发生改变. 结论 柠檬提取物可能通过破坏细菌细胞壁,改变细菌某些关键的结构或功能蛋白的合成来达到对细菌的抑制作用.
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柠檬提取物对变形链球菌葡糖基转移酶和细胞外多糖的影响
目的:探究天然植物成分(柠檬提取物)对变形链球菌葡糖基转移酶和细胞外多糖合成的影响.方法:采用二倍稀释法,用含2%蔗糖的胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)将柠檬提取物稀释为从1.250 μl/ml到0.039 μl/ml共计6个浓度的溶液,以TSB液体培养基作为阴性对照组.加入变形链球菌菌液,采用Neson-Somogyri法测定培养6、18、24、48h培养物中的还原糖含量,计算出酶活性;同时采用蒽酮法测定培养6、18、24、48 h培养物中的水不溶性多糖和水溶性多糖的含量.结果:随着柠檬提取物溶液浓度的升高,葡糖基转移酶活性和细胞外多糖含量逐渐降低,在各个时间点,从0.078μl/ml组到1.250 μl/ml组,各实验组总体均数间均具有显著性差异(P＜0.01),各实验组与对照组酶活性、水不溶性多糖含量和水溶性多糖含量都有显著性差异(P＜0.01);葡糖基转移酶活性和水不溶性多糖含量之间呈正相关关系(r=0.825～0.963,P＜0.01),葡糖基转移酶活性和水溶性多糖含量之间亦呈正相关关系(r=0.815～0.950,P＜0.01),且葡糖基转移酶活性与水不溶性多糖含量、水溶性多糖含量的相关性具有显著性差异(t=4.37,P＜0.01).结论:柠檬提取物对变形链球菌葡糖基转移酶和细胞外多糖的合成具有显著抑制作用.
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柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌作用
目的:观察柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果,初步探讨柠檬提取物的抑菌机制.方法:采用纸片法、对倍稀释法对不同浓度柠檬提取物进行耐药菌株的抑菌试验;采用SDS-PAGE电泳法,观察柠檬提取物作用下菌体蛋白质电泳图谱的变化;通过测定乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶的活性,观察柠檬提取物作用下酶活性的改变.结果:柠檬提取物对临床分离的耐药金黄色葡萄球菌的纸片抑菌实验抑菌环＞30 mm,小抑菌浓度为1:6 400;在不同凝胶浓度的SDS-PAGE中,柠檬提取物作用的耐药金黄色葡萄球菌有明显的菌体蛋白电泳图谱的改变;柠檬提取物对酶活性无改变.结论:柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,影响了菌体蛋白质的合成.初步揭示了柠檬提取物的作用机制.
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柠檬提取物对新城疫及柯萨奇病毒作用的实验研究
目的:测试并比较柠檬提取物0#及3#在不同的实验方法下对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3的杀灭作用.方法:直接杀灭作用:将新城疫病毒和柯萨奇病毒B3分别与柠檬提取物0#和3#体外作用1 h,然后加入到培养好的Vero细胞中,培养72 h.预防作用:将不同浓度的柠檬提取物0#和3#分别加入培养好的Vero细胞中作用24 h,然后分别加入新城疫病毒和柯萨奇病毒B3与柠檬提取物0#和3#的混合液,培养72 h.治疗作用:将新城疫病毒和柯萨奇病毒B,分别加入培养好的Vero中,作用1 h,然后分别加入0#及3#药品,培养72 h.3种方法与未加柠檬提取物的病毒液对细胞的作用相比较,通过CPE法观察药品对病毒的作用.结果:在柠檬提取物0#对新城疫病毒的直接杀灭作用中,实验组较对照组有显著性差异(P＜0.05);在柠檬提取物3#对柯萨奇病毒B3的预防作用中,实验组较对照组有显著性差异(P＜0.05);在柠檬提取物0#及3#对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3的治疗作用中,实验组较对照组无显著性差异(P＞0.05).结论:柠檬提取物0#对新城疫病毒具有杀灭作用;柠檬提取物3#对柯萨奇病毒具有预防作用;0#及3#对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3均无治疗作用.
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柠檬提取物对耐药的金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验
[目的]研究耐药的金黄色葡萄球菌对柠檬提取物的敏感性,为耐药菌株的治疗寻找新的途径.[方法]采用纸片法、对倍稀释法,用不同浓度柠檬提取物进行耐药菌株的抑菌试验.[结果]柠檬提取物对临床分离的耐药菌的纸片抑菌实验抑菌环直径＞30 mm,小抑菌浓度(MIC)为1/6 400.[结论]显示柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用.
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柠檬提取物抑菌、杀灭病毒作用机制研究
目的 观察柠檬提取物对细菌生物膜的消除作用,对柠檬提取物抑制多重耐药金黄色葡萄球菌的机制进行初步研究,以及对环境中富集的病毒消除作用的研究.方法 采用高分子滤膜法制备金黄色葡萄球菌生物膜后,加入柠檬提取物分别作用1、2和3 h,通过细菌菌落计数判定不同生物膜的细菌存活数;采用SDS-PAGE电泳法,观察在柠檬提取物作用下菌体蛋白质的变化;EcoR I酶切金黄色葡萄球菌DNA,观察酶切图谱的改变;在低渗环境下动态观察柠檬提取物在不同作用时间对细菌细胞壁的影响;通过柠檬提取物对病毒作用后RNA量的变化,说明柠檬提取物具有杀灭病毒的作用.结果 柠檬提取物对生物膜中的细菌具有杀菌作用,且随作用时间的延长而逐渐增强;柠檬提取物对细菌蛋白质的组成和表达量均有一定影响,同时细菌DNA的EcoR I酶切图谱发生改变;柠檬提取物作用15 min时细菌呈现明显的胞壁缺损现象,即细菌个体胀大,呈现大球形;经柠檬提取物作用后,RNA病毒被杀灭.结论 结果显示柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌所形成的生物膜具有明显抑制作用;在柠檬提取物作用下,菌体蛋白合成量发生改变,同时对细菌的DNA和细胞壁有明显的影响.柠檬提取物处理病毒悬液后,病毒RNA量显著减少,说明病毒RNA结构被破坏.
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茶多酚—柠檬提取物混合液对变形链球菌生长与黏附影响的研究
目的 探讨茶多酚与柠檬提取物联合应用对变形链球菌生长、黏附的影响.方法 采用MTT法分别测定茶多酚、柠檬提取物以及两者混合液的小抑菌浓度(MIC)值,通过分级抑制浓度(FIC)指数来判断两者联合使用对变形链球菌生长作用的影响,并通过扫描电镜观察低于MIC浓度的混合液对变形链球菌在玻片上黏附的情况.结果 茶多酚与柠檬提取物单独用药时,其MIC分别为1.56 mg/mL和5.60 mg/mL.联用的MIC为茶多酚0.78 mg/mL和柠檬提取物4.50 mg/mL,FIC为0.75.混合液对变形链球菌的黏附抑制作用随着浓度的降低而明显增强.结论 茶多酚与柠檬提取物联合应用对变形链球菌的体外抗菌活性具有相加作用,影响其在玻片表面的黏附.
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柠檬提取物对口腔致龋菌生长影响的研究
目的:检测柠檬提取物的生物安全性,研究柠檬提取物对主要致龋菌生长的影响,为进一步机制研究提供依据.方法:柠檬提取物ICR小鼠急性毒性试验(LD50试验):实验分两组,实验组柠檬水提浓缩液按0.05 ml/10g· bw灌胃,空白对照组室温、阳光等饲养条件与实验组相同.饲养14 d观察动物反应,第15天处死,解剖检查脏器情况；采用琼脂稀释法研究柠檬提取物对5种主要致龋菌(变异链球菌、血链球菌、内氏放线菌、远缘链球菌、嗜酸乳杆菌)生长的抑制作用,并采用菌落计数法检测柠檬提取物对5种细菌生长的影响.结果:ICR小鼠在14 d观察期中未发现死亡现象,处死后检查各脏器无异常现象.柠檬提取物对变异链球菌、血链球菌、远缘链球菌的小抑菌浓度MIC(minimum inhibitory concentration)为4.5 g/L,对嗜酸乳杆菌和内氏放线菌的MIC为2.25 g/L.5种致龋菌在柠檬提取物作用下,其生长曲线均在第6小时左右出现明显的转折点,实验组与阴性组的细菌菌量均有显著性差异(P＜0.05).结论:柠檬提取物样品LD50大于5000 mg/kg· bw,属于实际无毒物质；柠檬提取物对口腔致龋菌的生长有抑制作用.
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柠檬提取物抗单纯疱疹病毒实验研究
目的:研究柠檬提取物对单纯疱疹病毒感染的抑制作用,探讨天然药物的抗病毒作用,为口腔局部用药提供新的选择.方法:采用MTY方法检验柠檬提取物对HSV-1的灭活作用和抗HSV-1感染细胞的作用.结果:柠檬提取物在1∶800稀释度时仍有灭活HSV-1作用和抗HSV-1感染细胞的作用.结论:柠檬提取物有抗病毒感染的潜力.
