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黄连总生物碱与小檗碱对嗜水气单胞菌细胞膜损伤机制的研究
为探索黄连总生物碱及小檗碱对嗜水气单胞菌的抑菌活性及作用机制,测定了黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌的小抑菌浓度、膜通透性、膜流动性、膜蛋白构象及毒力因子的影响.结果显示,黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌均有抑菌活性,其小抑菌浓度分别为62.5,125 mg·L-1.黄连总生物碱和小檗碱能增加膜脂流动性,改变膜蛋白构象,并使菌体膜通透性分别增加24.52％,19.66％.此外,黄连总生物碱和小檗碱显著性地抑制菌体外毒素的溶血活性及aerA和hlyA mRNA的表达(P＜0.05,P＜0.01),同时降低嗜水气单胞菌内毒素的分泌量和LpxC mRNA的表达(P＜0.05,P＜0.01).结果表明,黄连总生物碱和小檗碱对嗜水气单胞菌的抑菌作用可能与细胞膜损伤有关,通过改变膜脂流动性和膜蛋白构象使菌体膜通透性增加从而抑制了细菌生长;同时降低了细菌的毒力因子的分泌,使得菌体的致病性降低.
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植物源抑真菌剂在中药材养护中的应用前景及展望
中药材在生长、收获、运输、加工、储藏的过程中,易受到各种真菌的浸染而产生真菌毒素,这不仅影响中药材及其加工品的质量安全,而且严重威胁人类的身体健康和生命安全.在中药材养护中,化学养护法是利用化学合成抑菌剂熏蒸药材以达到抑制真菌生长及真菌毒素积累的目的,但由于易造成残留、降解周期长、污染环境等缺点,不利于长期大剂量使用.因此,研发有效的、安全无毒的、纯天然的、对环境友好的植物源抑真菌剂替代化学药剂,对中药材的"绿色"科学养护具有非常重要的意义.该文对真菌毒素及其危害、植物中有效抑菌成分和抑菌机制进行了综述,以期为研发植物源抑真菌剂提供科学参考,并对植物源抑真菌剂在中药材科学养护中的应用前景进行了展望.
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黄芩对肺炎克雷伯菌抑制作用及其机制研究
目的 观察黄芩对肺炎克雷伯菌的抑制作用,分析其抗菌机制,为寻找治疗肺炎克雷伯菌感染新途径提供实验依据. 方法 制备黄芩药液,以多重耐药肺炎克雷伯菌为试验菌株,采用试管法测定黄芩液对细菌的低抑菌浓度(MIC)和小杀菌浓度(MBC);通过细菌生长曲线和生物膜形成情况评价黄芩液对细菌生长的影响.不同浓度黄芩液作用后,取培养液上清进行电导率和碱性磷酸酶活性测定,分析其对细菌细胞膜通透性的影响;采用细菌沉淀荧光法进行核酸DNA和RNA含量及SDS-PAGE蛋白谱带定量分析;提取DNA拓扑异构酶,进行相关生物学活性测定,分析其对细菌合成的影响. 结果 黄芩液对肺炎克雷伯菌的MIC和MBC分别为(32±2.2) mg/ml和(64±3.6)mg/ml.不同浓度黄芩液均可抑制肺炎克雷伯菌生长和细胞生物膜形成,使细胞膜通透性增加.黄芩液作用24 h后肺炎克雷伯菌菌体蛋白、DNA和RNA减少.黄芩能抑制DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ活性,且呈浓度依赖. 结论 黄芩可通过抑制肺炎克雷伯菌生物膜形成抑制其生长,通过增加细胞膜通透性和抑制细菌DNA拓扑异构酶活性,进而抑制细菌核酸和蛋白合成,发挥抑制细菌繁殖和侵袭作用.
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乳酸杆菌小分子抗菌肽产生菌的筛选及鉴定
乳酸链菌肽(Nisin)是由乳酸链球菌通过其核糖体合成产生的小分子抗菌肽,具有抑制细胞生长的作用,可用做食品天然防腐剂.其抑菌机制是小肽作用于细菌的细胞膜,在膜上形成离子通道,引起胞内物质的外漏使细菌失活.本文从酸菜汁中分离筛选出的乳酸杆菌HD1.7也能合成小分子抗菌肽,并且抑菌范围广.本研究扩大了小分子抗菌肽高产菌株的选育范围,有一定的实用意义.
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黄芩素抑菌活性及其机制的初步研究
以金黄色葡萄球菌为供试菌,探讨黄芩素的抑菌活性及其作用机制.通过测定黄芩素对其细胞膜的通透性、呼吸代谢途径、可溶性蛋白质和DNA拓扑异构酶的影响,阐述黄芩素的抑菌作用机制.实验结果显示,黄芩素可抑制金黄色葡萄球菌的生长,其低抑菌浓度为0.04 mmol·L -1；黄芩素作用菌体6h后,电导率比对照组增加了2.48％,DNA和RNA大分子增加了1.8％；黄芩素能抑制三羧酸循环(TCA)中的琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的活性,其抑制率分别为56.2％和57.4％；黄芩素作用20 h后,菌体可溶性蛋白总量比对照组减少了42.83％;此外,黄芩素能抑制DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ的活性,当黄芩素的浓度为0.2 mmol.L-l时,上述两种酶的活性完全被抑制.综上所述,黄芩素对金黄色葡萄球菌有显著抑制作用,其抑菌作用是通过影响细胞膜的通透性,抑制菌体内蛋白质合成,抑制细菌代谢和DNA拓扑异构酶等多靶点来实现的.
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夏枯草提取物对痤疮相关致病菌抑菌活性及机制研究
目的：探讨夏枯草提取物对痤疮相关致病菌抑菌活性及作用机制，并初步锁定物质基础。方法通过测定3种夏枯草提取物对金黄色葡萄球菌（ATCC 29213）、表皮葡萄球菌（CMCC26069）和痤疮丙酸杆菌（ATCC6919）的抑菌活性、抑菌曲线、对金黄色葡萄球菌的细胞壁透性和离子渗漏的影响，阐述夏枯草提取物的抑菌活性及作用机制。结果3种夏枯草提取物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌均有抑制作用，作用强度：水提取物>乙醇提取物>超声提取物。夏枯草提取物通过影响受试菌细胞壁透性，导致胞体K+、Mg2+的渗出而抑制细菌生长。结论夏枯草提取物对3种痤疮致病菌均有显著抑制作用；其抑菌机制与影响细胞壁和细胞膜的通透性有关。
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植物精油抑制真菌及真菌毒素的研究进展
真菌及真菌毒素极易污染食品、果蔬、中药材、农产品等基质使其霉败变质,这不仅造成巨大的资源浪费和经济损失,还会带来潜在的安全隐患,严重威胁人们的身体健康和生命安全,这一问题己引起全球性的广泛关注.研究者们竭力探索科学有效的策略和措施抑制或防止诸多基质的真菌和真菌毒素污染.化学合成抑菌剂备受欢迎,但是同时存在残毒、公害、抗性等问题,已被禁止使用.植物精油因具有抑菌活性强、抑菌谱广、高挥发性、生物降解性良好、在基质中低残留、无毒或低毒对人体相对安全、对环境友好等优点,可作为潜在的新型绿色防霉抑菌剂.针对植物精油的分布、抑制真菌生长及真菌毒素合成的作用、抑菌广谱性、安全性评价、抑菌机制进行综述,以期为研发天然、绿色抗真菌剂提供科学参考.
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柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌作用
目的:观察柠檬提取物对多重耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果,初步探讨柠檬提取物的抑菌机制.方法:采用纸片法、对倍稀释法对不同浓度柠檬提取物进行耐药菌株的抑菌试验;采用SDS-PAGE电泳法,观察柠檬提取物作用下菌体蛋白质电泳图谱的变化;通过测定乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶的活性,观察柠檬提取物作用下酶活性的改变.结果:柠檬提取物对临床分离的耐药金黄色葡萄球菌的纸片抑菌实验抑菌环＞30 mm,小抑菌浓度为1:6 400;在不同凝胶浓度的SDS-PAGE中,柠檬提取物作用的耐药金黄色葡萄球菌有明显的菌体蛋白电泳图谱的改变;柠檬提取物对酶活性无改变.结论:柠檬提取物对耐药金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,影响了菌体蛋白质的合成.初步揭示了柠檬提取物的作用机制.
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盆炎消温敏凝胶对金黄色葡萄球菌抑菌作用的初步研究
目的:观察盆炎消温敏凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌效果,初步探讨盆炎消温敏凝胶的抑菌机制.方法:采用K-B纸片法、液体稀释法检测盆炎消温敏凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌效果及小抑菌浓度(MIC值);采用SDS-PAGE电泳法,观察盆炎消温敏凝胶作用下菌体蛋白质电泳图谱的变化.结果:盆炎消温敏凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为(32.3±2.2)mm,小抑菌浓度(MIC)为1∶64.在SDS-PAGE电泳中,盆炎消温敏凝胶作用后,金黄色葡萄球菌蛋白质图谱有变化.结论:盆炎消温敏凝胶有抑菌作用,并影响菌体蛋白质的合成,初步揭示了对金黄色葡萄球菌的可能作用机制.
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秦皮素对大肠埃希菌作用机制的初步研究
目的 以大肠埃希菌ATCC 25922为供试菌,探讨秦皮素的抑菌活性及其作用机制.方法 利用TTC法测定秦皮素对大肠埃希菌ATCC 25922的低抑菌浓度;通过测定加药前后菌体培养液电导率和大分子的变化及观察扫描电镜和透射电镜电镜结果,分析秦皮素对其细胞膜的影响;通过SDS-PAGE测定秦皮素对供试菌株蛋白含量的影响;采用逐个检出法研究秦皮素对大肠埃希菌ATCC 25922质粒合成的抑制作用.结果 秦皮素可抑制大肠埃希菌ATCC 25922的生长,其低抑菌浓度为40 μg/mL.秦皮素作用菌体5h后,培养液中的电导率比对照组增加1.96％,但DNA和RNA大分子增加的不明显.秦皮素作用大肠埃希菌20 h后,菌体可溶性蛋白总量比对照组降低42％.秦皮素对大肠埃希菌的质粒有消除作用,药物作用48 h后,秦皮素对大肠埃希菌的质粒消除率为60.3％.结论 秦皮素可抑制大肠埃希菌的生长,其抑菌作用机制与抑制菌体内蛋白质合成和消除菌体内的质粒有关,但对大肠埃希菌细胞膜的影响不大.
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银花泌炎灵片乙醇提取物对大肠埃希菌超微结构的影响及其抑菌作用机制
目的:研究银花泌炎灵片95％乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株和临床耐药菌株的体外抑菌活性,阐明其抑菌机制.方法:采用管碟法分别测定银花泌炎灵片95％乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株ATCC25922和18株泌尿系感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌临床分离株的体外抑菌活性,测定其小杀菌浓度(MBC).扫描和透射电子显微镜观察药物作用后菌体超微结构改变.结果:银花泌炎灵片95％乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株ATCC25922和产ESBLs大肠埃希菌的MBC50和MBC90分别为100 g·L-1和150～300 g·L-1.扫描电子显微镜下观察,经银花泌炎灵片95％乙醇提取物作用后大肠埃希菌菌体表面出现塌陷,两端可见凹陷和刺状突起,有的细菌严重变形;负染透射电子显微镜下观察,药物作用后菌体折光性明显变差,菌体变形出现褶皱,且部分细胞壁出现凹陷;超薄切片透射电子显微镜下观察,药物作用后菌体固缩膨大,细胞壁模糊不清甚至缺失,细胞质固缩解体,形成小空泡.结论:银花泌炎灵片95％乙醇提取物对大肠埃希菌标准菌株ATCC25922和产ESBLs大肠埃希菌均有一定程度的抑制作用,其抑菌机制可能是药物干扰或破坏大肠埃希菌细胞壁合成或破坏菌体内大分子量蛋白,以致菌体超微结构出现改变.
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白毛夏枯草对金黄色葡萄球菌的作用规律及抗菌机理
目的 比较白毛夏枯草不同溶剂提取液的抑菌效果,并对其发挥作用的机制进行研究.方法 通过牛津杯法和改良二倍稀释法测定白毛夏枯草的抑菌活性,通过考察金黄色葡萄球菌的生长曲线、细胞形态、细胞壁和细胞膜的完整性的变化探究白毛夏枯草的抑菌机制.结果 水提液的抑菌作用强,能显著抑制金黄色葡萄球菌的生长,MIC为15.63 mg/mL,给药后细菌内碱性磷酸酶和蛋白质大分子外泻,细菌形态改变.结论 白毛夏枯草对金黄色葡萄球菌有抑制作用,通过破坏细胞壁和细胞膜的完整性发挥作用.
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广藿香精油对金黄色葡萄球菌的抑菌活性及机制研究
目的 以金黄色葡萄球菌为供试菌,探讨广藿香精油的抑菌活性及其作用机制.方法 通过测定广藿香精油对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌活性,对金黄色葡萄球菌ATCC 25923的抑菌曲线、超微结构、细胞壁透性和肽聚糖的量、膜蛋白构象和离子渗漏的影响,来阐述广藿香精油的抑菌活性及作用机制.结果 广藿香精油对受试菌的MICs为0.51 mg/mL;能明显延长受试菌生长的延迟期,抑制细菌的生长;破坏细胞的结构完整性,损伤胞膜;影响受试菌细胞壁透性,膜蛋白的构象;导致胞体K+、Mg2的渗出;但在检测时间内对受试菌细胞壁肽聚糖的量无明显影响.结论 广藿香精油对MSSA和MRSA有显著抑制作用,其抑菌机制与破坏细胞的结构完整性和损伤胞膜,影响细胞壁和细胞膜的通透性,改变膜蛋白构象有关.
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枫杨叶提取物抑制金黄色葡萄球菌的机制研究
[目的]研究枫杨叶提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及相关机制.[方法]通过纸片扩散法比较不同溶剂枫杨叶提取物对金黄色葡萄球菌的抑制效果;以微量稀释法测定枫杨叶醇提取物的小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)与小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);以生长曲线法比较不同浓度枫杨叶醇提取物对细菌生长的影响;以扫描电镜观察该提取物对细菌菌体形态的影响;以碘化丙啶(propidium iodide,PI)和SYTO9荧光染料染色观察确定该提取物对菌体细胞膜的影响;以琼脂糖凝胶电泳检测该提取物对细菌基因组DNA的作用.[结果]纸片抑菌与微量稀释实验证实枫杨叶水提取物无抑菌效果,而醇提取物具有明显的抑菌效果,其MIC和MBC分别为125mg·L-1和1600mg·L-1.枫杨叶醇提取物作用后,细菌进入对数生长期的时间延迟,培养至2h时各组OD60值均低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).培养至4h开始,各时点2×MIC枫杨叶醇提取物处理组OD60值均低于1×MIC处理组,4×MIC处理组均低于2×MIC处理组,差异均有统计学意义(P<0.01).培养12h后,不同浓度枫杨叶醇提取物处理组菌量较空白对照组明显减少(P<0.01),且均进入稳定期,而空白对照组菌量在24h时仍呈增长趋势.说明枫杨叶醇提取物可以明显抑制金黄色葡萄球菌的增殖,而且抑制作用存在量效关系.扫描电镜观察发现,枫杨叶醇提取物作用后,金黄色葡萄球菌出现菌体变形、塌陷甚至表面溶解等现象;荧光探针实验进一步说明枫杨叶醇提取物可破坏金黄色葡萄球菌细胞膜与菌体结构的完整性,且效果具有剂量和时间依赖性.琼脂糖凝胶电泳表明枫杨叶醇提取物可使细菌基因组DNA发生损伤.[结论]枫杨叶醇提取物对金黄色葡萄球菌生长具有显著的抑制作用,其机制可能与破坏细胞膜完整性和菌体结构,损伤基因组DNA有关.
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头孢磺啶钠的研究进展
头孢磺啶属于第三代头孢类抗生素,英文名称Cefsulodine,又名磺吡苄头孢菌素钠、达克舒林、头孢磺吡酮、Takesulln、Monaspor、Pseudocfe、CFS 等.头孢磺啶是由日本武田药品公司开发研制的第一个抗绿脓杆菌注射用头孢类抗生素[1].1 头孢磺啶钠的结构及基本特性
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苯吡啶-N4-甲基缩氨基硫脲及其钴离子配合物的抑菌活性
目的:研究苯吡啶-N4-甲基缩氨基硫脲及其钴离子配合物对细菌(包括革兰阳性菌和革兰阴性菌)、霉菌和酵母菌的抑菌活性.方法:采用管碟法对12种常见菌株进行抑菌活性实验,并测定低抑菌浓度,通过测定菌体的生长曲线,对其抑菌机制进行初步研究.结果:2种药物对细菌、酵母菌和霉菌表现出不同的抑菌作用,加药后的菌体不能达到正常对数生长期而直接进入衰亡期.结论:药物的作用机制可能是抑制细胞的分裂增殖,破坏菌体的细胞壁致菌体死亡.
关键词： 苯吡啶-N4-甲基缩氨基硫脲 钴离子配合物 抑茵活性 抑菌机制 -
头花蓼对幽门螺杆菌抗菌作用分析
目的:探讨头花蓼对幽门螺杆菌(Hp)的抗菌机制.方法:采用琼脂稀释法检测头花蓼对幽门螺杆菌国际标准测序株ATCC 700392的低抑菌浓度(MIC);选用三氯醋酸/丙酮沉淀法收集药物作用前后的幽门螺杆菌全菌蛋白,应用双向凝胶电泳技术(2-DE)和Real-time PCR技术检测头花蓼对幽门螺杆菌蛋白及基因表达水平的影响.结果:头花蓼对幽门螺杆菌国际标准测序株ATCC 700392的MIC为4 mg·ml-1;通过质谱技术鉴定出10个差异蛋白点,其中延胡索酸还原酶黄素蛋白亚基、烷基过氧化氢还原酶、粘附-巯基还原酶、非血红素铁蛋白仅在药物作用前的全菌蛋白中表达,乙酰脲利用蛋白A、亮氨酰胺肽酶、过氧化氢酶在头花蓼作用后明显下调,而丙酰胺左旋门冬氨酸酶、延长因子P和NADPH黄素还原酶的蛋白表达则在药物作用后上调;Real-time PCR结果显示头花蓼作用后幽门螺杆菌的过氧化氢酶基因、烷基过氧化氢还原酶基因、粘附-巯基还原酶基因基因mRNA表达量呈减弱趋势,实验组与对照组相比,katA的基因表达水平下调1.52倍,TsaA的基因表达水平下调2.94倍,TagD的基因表达水平下调3.65倍(P＜0.05).结论:头花蓼对Hp具有明显的抑制作用,是通过干扰和抑制Hp蛋白表达水平和mRNA水平的发挥作用.
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黄连等4种中药颗粒剂对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌体外抑菌作用研究
目的:初步探讨黄连、连翘、乌梅、五味子4种中药颗粒剂对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌体外抑菌效果.方法:采用肉汤稀释法测定黄连、连翘、乌梅、五味子4种中药颗粒剂悬液对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的低抑菌浓度(MIC)和小杀菌浓度(MBC).结果:连翘、乌梅、五味子、黄连4种中药颗粒剂悬液对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌具有不同程度的抑菌作用,乌梅抑菌作用强,MIC为8mg/mL,MBC为16mg/mL,五味子次之,黄连和连翘差.结论:连翘、乌梅、五味子、黄连4种中药颗粒剂悬液具有较好的抑菌作用,用于临床对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的治疗具有一定的开发价值和应用前景.
关键词： 中药颗粒剂 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 抑菌机制 -
中药抑菌的研究现状及思考
由于抗菌药物的不合理使用，使得细菌对抗菌药物的耐药性不断升级。中国具有大量宝贵的中药资源，无论在感染控制还是在现代医疗方面都凸显出独特的优势，中药取药天然，起效方式全面，近年来，有大量抑制及杀灭细菌的报道，在此将有关中药的抑菌作用、实验方法、抑菌机制等方面做总结。
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花椒提取物对致痤疮菌的抑菌活性研究及机制初探
目的 研究花椒提取物对致痤疮菌的体外抑菌活性,并初探其抑菌机制.方法 以水蒸气蒸馏法提取花椒精油,热浸提法提取花椒水提物,采用纸片扩散法和96孔板微量肉汤稀释法,分别测定和比较2种花椒提取物对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果.选取抑菌效果好的提取物,以痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌为受试对象,运用化学法探讨其对细菌胞壁通透性的影响.结果 花椒精油对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为5mg/ml、16.7 mg/ml、10mg/ml,花椒水提物对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的MIC均大于100mg/ml,花椒精油对3种致痤疮菌的抑菌效果优于水提物.MIC、2MIC浓度的花椒精油作用于痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌可引起细菌细胞内K+、Mg2、AKP等物质渗漏至胞外,抑制细菌生长.结论 花椒精油对3种致痤疮菌均有明显的抑菌作用,抑菌效果优于花椒水提物,其抑菌机制可能是增加了细菌胞壁通透性,引起胞内物质外漏所致.
