首页 > 文献资料
-
黄芪甲苷对Chang Liver细胞酒精性和非酒精性氧化损伤的保护作用
目的:探讨黄芪甲苷对Chang Liver细胞酒精性和非酒精性氧化损伤的保护作用.方法:以Chang Liver细胞为研究对象,使用乙醇、H2O2分别建立酒精性及非酒精性氧化损伤模型,MTT法测定细胞存活率,微板法、比色法检测转氨酶活力及抗氧化能力,DCF荧光法检测细胞内活性氧,流式细胞术检测细胞周期,DNA ladder法检测细胞凋亡.结果:2种氧化损伤均可导致Chang Liver细胞存活率和抗氧化酶活性下降、以及细胞外液中转氨酶活力和丙二醛含量升高,黄芪甲苷对上述损伤均有显著或极显著的保护效果;同时,乙醇能够显著降低损伤细胞内的活性氧水平,而H2O2能够显著升高损伤细胞内的活性氧水平,黄芪甲苷则能使上述异常的活性氧水平趋于正常.同时缓解乙醇或H2O2对Chang Liver细胞G0/G1期的阻滞现象,并对二者诱导的细胞凋亡均有一定的抑制作用.结论:黄芪甲苷对Chang Liver细胞的酒精性和非酒精性氧化损伤均有保护作用.
关键词： 黄芪甲苷 Chang Liver细胞 酒精 H2O2 氧化损伤 -
黄芪3种成分对Chang Liver细胞氧化应激的抑制作用
本研究主要在于探讨黄芪3种成分(黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素)对H2O2诱导Chang Liver细胞氧化应激的影响.以人正常肝实质细胞Chang Liver细胞为研究对象,同时选取具有明确保肝作用的联苯双酯为阳性对照药物,通过H2O2诱导氧化应激建立损伤模型进行实验.设立空白对照组、氧化应激组、黄芪甲苷组、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组、芒柄花素组、阳性对照组.通过微板法、比色法检测内源性抗氧化体系相关指标,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧水平,分光光度法、Real-timePCR法、Western blot法分别检测细胞肝微粒体CYP2E1的活性及其mRNA和蛋白的表达变化.从实验结果中可以看出,H2O2的诱导使Chang Liver细胞抗氧化能力降低,细胞内活性氧水平及CYP2E1表达的升高,而3种黄芪成分对细胞的预处理均可显著或极显著的改变上述氧化应激状态(与氧化应激组比,P ＜0.05,P＜0.01),总体效果与阳性对照组药物联苯双酯作用相当.由此表明,3种黄芪成分(黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素)对H2O2诱导所致Chang Liver细胞氧化应激均有显著或极显著的抑制作用,细胞的氧化损伤得到明显缓解.
关键词： 黄芪 Chang Liver细胞 H2O2 氧化应激 -
叔丁基对苯二酚对亚砷酸钠致Chang liver细胞毒性的影响
目的 探讨叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)对亚砷酸钠(NaAsO_2)致Chang liver细胞毒性的影响.方法 Chang liver细胞培养48 h后分别以20、40、60和80 μmo/L的NaAsO_2染毒24和48 h,作为NaAsO_2单独作用组.以5和20μmol/L的tBHQ预处理Chang liver细胞24h,以40和60μmol/L的NaAsO_2染毒24和48h,作为tBHQ预处理组;对照组处理同NaAsO_2:单独作用组.每个浓度设3个复孔.用Alamar Blue法检测细胞活力.结果 NaAsO_2单独作用24和48 h组Alamar Blue还原率显著下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);且NaAsO_2单独作用48 h组的Alamar Blue还原率均显著低于24 h组,差异有统计学意义(P＜0.01).5 μmol/L的tBHQ预处理组与对应的60 μmol/L NaAsO_2单独作用24h组相比,显著提高了Alamar Blue还原率(P＜0.01);20 μmol/L的tBHQ预处理组的Alamar Blue还原率均显著高于相对应NaAsO_2单独作用24 h组(P＜0.05).5 μmol/L的tBHQ预处理组的Alaraar Blue还原率均显著高于相对应NaAsO_2单独作用48h组(P＜0.01);20μmol/L的tBHQ预处理组与对应的40μmol/L NaAsO_2单独作用48h组相比,显著提高了Alamar Blue还原率(P<0.01).结论 tBHQ能够降低NaAsO_2致Chang liver细胞的毒性,增强细胞对NaAsO_2毒性的抵抗能力.
关键词： 亚砷酸钠 叔丁基对苯二酚 Chang Liver细胞 -
亚砷酸钠致Chang liver细胞氧化应激作用的研究
目的 研究不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对人肝细胞株Chang liver的氧化应激作用.方法 采用四甲基偶氮唑(MTF)比色法检测NaAsO2(0、0.1、1、5、10、20、30、50、80、100、200 μmol/L)对Chang liver细胞活力的影响,利用2',7'-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)水平,利用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量.结果 与对照组比较,0.1 μmol/LNaAsO2组细胞活力显著增强(P<05);10～200μmol/L NaAsO2浓度范围内,细胞活力随NaAsO2浓度升高而下降(P<0.05).在0～30 μmol/LNaAsO2浓度范围内,随着NaAsO2浓度的增高,细胞内ROS水平升高(P<0.05),SOD活力降低(P<0.001),MDA含量升高(P<0.001).结论 氧化应激可能是NaAsO2对Chang liver细胞毒性作用的机制之一.
关键词： 砷中毒 亚砷酸钠 Chang Liver细胞 氧化应激 -
槲皮素对肝细胞氧化应激损伤的保护作用
目的：探讨槲皮素对氧化应激Chang liver细胞损伤的保护作用及其作用的分子机制。方法培养Chang liver细胞，将细胞随机分为正常对照组、H2O2组及槲皮素低、中、高剂量组。MTT法检测肝细胞的存活率；流式细胞术检测细胞凋亡率。2′,7′-二氯荧光素乙二酯(DCFH-DA)细胞内活性氧（ROS）荧光染色后，荧光显微镜观察照相及流式细胞仪检测细胞内活性氧水平。试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及细胞中丙二醛（MDA）的含量。采用Western blot法检测Nrf2蛋白的表达。结果 H2O2组较正常对照组细胞存活率、SOD、GSH-Px、CAT活性降低(P<0.05)，凋亡率、平均荧光强度（MFI）及MDA升高(P<0.05)。不同剂量槲皮素组细胞存活率及细胞内SOD、GSH-Px、CAT活性高于H2O2组(P<0.05)，MDA、凋亡率、MFI水平低于H2O2组(P<0.05)。槲皮素低、中及高剂量组Nrf2蛋白均高于H2O2组(P<0.05)。结论槲皮素对氧化应激肝细胞损伤具有保护作用，其机制可能与激活Nrf2-ARE通路，进而增强下游抗氧化基因的表达有关。
-
三七总皂苷对细胞色素P450酶CYP3A4和CYP2C9的影响
目的 探讨三七总皂苷对Chang Liver细胞P450酶(CYP450)CYP3A4和CYP2C9表达的影响.方法 采用CCK-8法考察三七总皂苷对Chang Liver细胞活力的影响,确定给药剂量范围;采用定量RT-PCR法考察三七总皂苷在给药后4,8,24,48 h对Chang Liver细胞中CYP3A4和CYP2C9 mRNA表达的影响;通过蛋白质印迹(Western Blot)法考察三七总皂苷在给药后4,8,24,48 h对Chang Liver细胞中CYP3A4和CYP2C9蛋白表达的影响.结果 100μg/mL三七总皂苷干预Chang Liver细胞4,8,24,48 h后,各干预组CYP2C9蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05),各组诱导水平随着作用时间的延长相应增加.8 h组、24 h组、48 h组CYP3A4蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05),各组的相对蛋白表达量呈时间依赖性,8 h组、24 h组、48 h组CYP2C9和CYP3A4的mRNA表达量均明显高于空白对照组(P<0.05),且各组的诱导水平随着作用时间的延长相应增加.结论 三七总皂苷可诱导CYP3A4和CYP2C9的mRNA及蛋白的表达,临床在使用三七总皂苷时,需要关注其与CYP3A4和CYP2C9底物药物之间可能的相互作用.
