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中药现代化与制药新技术的研究
新技术的推广应用对加快中药的新药研发和中药现代化起着至关重要的作用;本文重点介绍了高通量药物筛选(HTS)技术、超临界流体萃取(SFE-CO2)技术、大孔吸附树脂、膜分离技术等现代制药新技术的主要特点及其发展和应用前景.
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白川降压胶囊HPLC指纹图谱定性与定量分析方法研究
白川降压胶囊是在经典中药方剂"都梁丸"[1,2]的基础上,应用细胞膜色谱筛选技术[3-5]结合现代药理学实验研究,由白芷和川芎有效提取物组成的现代复方中药,用于治疗高血压病.本研究建立了白川降压胶囊的RP-HPLC指纹图谱定性分析方法,并结合有效成分[6]定量分析方法,通过对10个不同批次的白川降压胶囊进行分析检测,表明本方法有较好的准确性和重复性,可以较全面地控制本品的质量.
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Aptamer核酸药物的研究进展
Aptamer指的是能结合蛋白或其他小分子物质的单链或双链寡核苷酸[1].体外筛选技术的发展和PCR技术的应用,使得Aptamer的研究近年来有了长足的进步,筛选到了一大批能与各种蛋白或小分子特异紧密结合的核酸分子(Aptamer).这些Aptamer包含了RNA、双链DNA、单链DNA等多种形式的寡核苷酸,其配体的性质各异.体外筛选Aptamer不仅增强了人们对核酸-蛋白相互作用的认识,也为寻找新药提供了一条途径.Aptamer核酸药物的研究近年来也取得了一些可喜成果.我们拟就该方面的进展及相关问题作一综述.
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核糖体展示技术的原理与应用
通过构建分子文库(cDNA文库、随机肽库、抗体库及其它蛋白文库),采用合适的筛选技术可以非常方便、有效、快速地筛选生物活性物质.目前分子文库技术已经广泛应用于抗原表位分析、功能小肽分子(如肽类拮抗剂和激动剂)或功能蛋白分子(如抗体)的筛选和改造等领域.筛选技术主要有两类:1. 体内筛选技术,如噬菌体展示技术[1]、选择性感染噬菌体技术[2]等.
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抗肺孢子虫药物的研究进展
肺孢子虫(Pneumocystis)是一种机会性致病真菌,能引起免疫力低下宿主严重的肺孢子虫肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP).近年来,随着艾滋病、器官移植、放/化疗肿瘤患者等高危人群的增加,PEP发病呈明显上升趋势.开发新药物或老药新用以治疗、预防PCP成为研究热点.本文对近年来抗肺孢子虫药物及其筛选技术的研究进展进行综述.
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药物共晶筛选技术的研究进展
近年来,药物共晶筛选技术成为改善药物溶解度、稳定性等性质的研究热点。该技术不改变药物分子结构,只是通过分子间作用力改变药物的理化性质,为难溶性药物的研发提供了新途径。共晶是具有新特性的药物组合,可获得知识产权。本文综述了药物共晶筛选技术,为药物共晶的深入研发提供参考。
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放线菌筛选方法研究进展
放线菌因产生多种多样的有活性的次生代谢产物而一直被认为是医药工业中的重要资源和生物药物的主要产生者.放线菌的筛选方法是发现新菌种及活性次生代谢产物的重要途径.本文就近年来放线菌的筛选方法进行简要综述.
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肝细胞癌肿瘤抗原分子生物学辨认与应用研究
肝细胞癌(HCC)是病死率很高的一种恶性肿瘤,目前,HCC的诊断与治疗技术亟待改善.特异性肝癌抗原的辨认及其与宿主的关系的探讨对特异性的肝癌的诊断及免疫治疗有极其重要的意义.广西是肝细胞癌(HCC)高发区,对肝癌抗原的识别辨认具有更加重大的现实意义.SEREX技术是Sahin等于1995年创立的一种新的肿瘤抗原筛选技术.它是以肿瘤患者能对其自身肿瘤抗原产生体液免疫反应为基础,利用肿瘤患者自体血清来筛选肿瘤细胞cDNA表达文库,从而获得肿瘤特异性抗原或肿瘤相关抗原的方法.相对于传统方法来说,SEREX技术相对省时节支,而且操作起来也较为简单,很快得到了广泛的应用.
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核酸适配子SELEX技术筛选研究进展
指数扩增配体的系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)是20世纪90年代初建立的一项筛选技术.Ellingtong和Tuerk[1,2]首先运用此技术筛选到特异性吸附噬菌体T4 DNA聚合酶和有机染料的RNA结构Gold[3]和Singer[4]等又创造性发挥此技术,并称之为Genomic-Selex,即基因组筛选技术,从单靶物质筛选到多靶物质筛选,对传统的单克隆抗体和多克隆抗体技术是一种挑战,为生物界、生物化学界、医学界提供了高效、快速的检测手段,特别是在小分子靶物质目的基因的结构及功能研究方面,有广泛的应用前景.
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乳腺癌相关基因的研究进展
从20世纪70年代起,原为乳腺癌低发区的亚洲国家发病率逐年升高,在我国特别是北京、上海等发达城区已成为危害妇女健康主要恶性肿瘤.乳腺癌病因尚不十分清楚,发病机理非常复杂,影响乳腺癌发病因素较多.随着分子生物学的飞速发展与各种高新生物技术不断涌现,近年来尤为瞩目的基因组学、蛋白质组学、生物信息学、组合化学、生物芯片技术和自动化筛选技术的发展与广泛应用,人类基因组计划的初步完成,对恶性肿瘤发生、演进机理有了较深入的了解,防治水平不断提高.而DNA重组、基因打靶、转基因动物等众多新技术在肿瘤研究中的应用,使人们越来越深刻地认识到肿瘤是一种基因的疾病.本文就目前研究较多的HER2、BRCA1从基因定位、结构、执行功能的分子机制及在乳腺癌中的作用等方面进行了总结,以便使我们更全面地认识这些基因及其表达产物的生理、病理生理作用,为肿瘤防治提供更为全面、准确的信息.
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新的肝脏特异性自身抗原的筛选、克隆、表达的研究
自身抗体特别是肝脏特异性自身抗体是自身免疫性肝病的主要特点,也是自身免疫性肝病的诊断和分型的主要标志.我们在2例高度怀疑自身免疫性肝病的患者血清中检测到一新的不明肝特异性自身抗体,应用表达性噬菌体文库筛选技术对未知自身抗原进行筛选鉴定,以期建立更为完善的自身抗体检测体系,进一步明确自身抗原在自身免疫性肝病发病机制中所起的作用.
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噬菌体抗体库筛选技术
在过去的20年中,噬菌体抗体库筛选技术被广泛的应用于抗体筛选、疾病治疗,临床诊断以及基础研究之中.在该技术的应用过程中,快速有效的筛选出适合的单克隆抗体并进行可靠和高效的数据管理和分析是十分重要的.文中总结了近年来噬菌体抗体库的高通量筛选方法并且对数据管理做了简要介绍.
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体外SELEX法筛选淋病奈瑟菌适体方法的建立
淋病奈瑟菌的实验室检测包括直接涂片、培养、免疫抗原检测,基因诊断等方法.本研究旨在以SELEX筛选技术为基础,筛选对淋病奈瑟菌敏感、特异性高、结合力强而且不易受外界环境影响的的寡核苷酸分子,为建立相关的荧光标记适体(aptamer)技术奠定基础.
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5毫升血可预测乳腺癌发生几率
相关统计表明,乳腺癌高居我国女性恶性肿瘤发病率首位,且呈不断增长趋势.日前,天津市肿瘤医院肿瘤分子诊断中心主任于津浦向记者透露,“乳腺癌高危人群基因筛选技术”正式在国家肿瘤临床医学研究中心分子诊断平台投入使用,只需5毫升血液就可预测乳腺癌发生几率.
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人碳酸酐酶Ⅱ(hCA Ⅱ)抑制剂筛选技术及应用
目的 建立人碳酸酐酶Ⅱ(hCA Ⅱ)抑制剂筛选技术,并用于评价新hCA Ⅱ抑制剂.方法 以大肠杆菌表达的hCA Ⅱ作为酶源,按照酶反应体系构建原则,在pH 7.6和25℃的条件下,以碳酸酐酶分解对硝基酚乙酸酯引起348 nm处光吸收增加来计算酶活力.在确定碳酸酐酶抑制剂筛选条件后,对35个靶向碳酸酐酶的新化合物进行了hCA Ⅱ的抑酶活性评价.结果 采用大肠杆菌表达的hCA Ⅱ为酶源,成功建立了hCA Ⅱ抑制剂筛选技术,该技术具有可靠、快速、简便的优点,发现10个新化合物对hCA Ⅱ的抑制率大于醋氮酰胺,9个新化合物对hCA Ⅱ的抑制率与醋氮酰胺相当.结论 hCA Ⅱ抑制剂筛选技术可用于hCA Ⅱ抑制剂的大规模筛选,为发现高效、高亚型选择性的碳酸酐酶靶向性药物奠定基础.进一步深入研究这19个化合物有望获得高效、低副作用的急性高原病防治药物.
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高通量活性筛选技术在中药研究中的应用
高通量筛选(HTS)技术是以药物和靶点之间的相互作用为检测指标,高通量地筛选与特定靶点具有亲和力样品的技术.与传统方法相比,HTS具有快速、高效、灵敏、经济的特点,近年来在中药研发领域得到较好的应用,有效推动了中药现代化的进程.HTS包含初筛、复筛、深入筛选、确证筛选四个过程.其模型类别包括分子水平模型、细胞水平模型和动物水平模型.HTS常用的技术包括报告基因系统、荧光影像技术、荧光标记检测、离子流检测和微量化技术.
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关注乳腺癌早期诊断和治疗的进展
乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,近年来其发病率不断上升.根据美国2010年发布的数据,2009年全美女性新发乳腺癌病例以207090例高居榜首,大大超过第2位消化系统肿瘤125 790例,死亡共39 840例;而男性也有1970例新发病例.随着工业化发展,我国乳腺癌发病率、死亡率在不断上升,并呈现出年轻化的趋势.另一方面,随着乳腺癌早期诊断和治疗实验研究的进一步发展,以基因工程、蛋白质组学、生物芯片技术为代表的高通量、自动化筛选技术的发展与广泛应用,人们对恶性肿瘤的认识逐步深入;各种细胞周期调控因子、信号传导通路、肿瘤相关基因的发现与功能鉴定,使阐明细胞恶性转化机制成为可能.目前围绕乳腺癌的实验研究的热点主要有以下几个方面.
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宫颈癌基因筛选方法及其临床价值
宫颈癌为一种常见妇科肿瘤,对妇女们的身心健康有着极其严重的影响,宫颈癌的生病过程一般都要经历癌前病变到宫颈癌的过程,这个过程通常来讲是比较缓慢的,所以可以在较早的时候发现并进行恰当的治疗.现在对于宫颈癌基因的筛选有很多临床方法,本文对几种方法进行了简单的阐述,并分析了其临床价值.
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适体技术的特征与临床应用
1990年,TUERK等[1]分别独立研制了一种新型的体外筛选技术,即指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX),用于研究小分子核酸与靶物质相结合的部位、序列及空间构像.
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基因差异表达筛选技术在神经干细胞研究中的应用
神经干细胞(neural stem cells,NSCs)具有自我更新、自我增殖和多向分化潜能,它的发现为人们深入研究中枢神经系统的发育、分化以及探索治疗神经系统疾病的新途径开辟了新的思路[1].研究证实,哺乳动物的胚胎和成体内均存在NSCs.在胚胎时期,神经干细胞存在于大脑皮质、纹状体、海马、嗅球、小脑、脊髓等区域;在成体NSCs存在于脑室带、脑室下区、纹状体、海马、嗅球、大脑白质、脊髓等处.NSCs的基因组成是相同的,但是,同一NSCs处于不同分化阶段或受到不同的外界刺激时,以及不同来源的NSCs,相关基因的表达是不同的.因此,研究处于不同分化阶段、接受不同外界刺激以及不同来源的NSCs在基因表达上的不同,分离并克隆这些特异性表达的基因,将有助于了解神经发育分化过程的分子机制,为在基因水平上调控神经干细胞的增殖、迁移和分化提供理论依据.