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用白细胞共同抗原45去除白细胞对流式细胞仪测定肿瘤细胞干扰的探讨
流式细胞仪( FCM)是通过荧光抗原抗体技术进行细胞测量的先进仪器.穿刺活检术为肺良恶性肿瘤鉴别诊断和标记物检测提供了安全、准确、微创的途径.越来越多的临床研究关注肿瘤相关基因蛋白在恶性肿瘤发生发展中的作用,而蛋白表达水平在肿瘤细胞和正常细胞间存在差异[1-3],以往的工作多以免疫组化技术为手段,但在定量分析方面受到限制;而FCM快速进行多参数测量,特别是在混合细胞中可通过相应标记对细胞进行分类和定量.
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肿瘤抗原和肿瘤疫苗的研究
提取肿瘤细胞的表面抗原及各种抗原间结构的比较将成为今后研究的热点.理想的肿瘤疫苗很可能包括多个肿瘤特异性抗原和/或多个肿瘤非特异性抗原.对肿瘤抗原的研究不仅对免疫应答的机制和肿瘤免疫逃避机制具有重要的理论意义,而且对肿瘤的发病学、诊断、治疗及疫苗的制备也具有重要的应用意义.寻找肿瘤抗原的方法可分为3类:(1)基因工程制备抗原.经典的技术有基因工程与抗体技术和基因工程与T细胞克隆技术两种.(2)天然抗原的提取与纯化.根据MHC-Ⅰ类分子-肽复合物表达于肿瘤细胞表面这一现象,膜结合蛋白的纯化就显得尤为重要.(3)合成肽抗原的制备.另外,各种肿瘤疫苗均有一定效果,但其抗原性仍不理想.理想的肿瘤疫苗应有多向作用靶点.
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催化抗体与可卡因成瘾的免疫治疗
在常见的依赖性药物中,可卡因成瘾的治疗是成瘾医学中的一个研究难题.传统上可卡因成瘾的药物治疗主要集中在可卡因受体拮抗剂药物或以减轻病人对可卡因渴求并减轻停用可卡因后戒断症状的药物研究上,但目前尚未发现有效的治疗药物.美国哥伦比亚大学Landry领导的一个科研小组根据80年代出现的催化抗体技术,成功地制备出催化可卡因降解的催化抗体[1].这种催化抗体可望用于可卡因成瘾的主动免疫治疗.
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肿瘤抗体治疗与基因抗体治疗的前景
早在1888年,von Behring新发现在白喉或破伤风毒素免疫动物后,其血清中可产生一种中和毒素的物质,从而开始进行抗体研究,他因此获得了第一届诺贝尔奖.但由于这种免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物,特异性不高,容易出现交叉反应,所以其应用受到限制,在随后很长一段时间,抗体技术并没有重大突破.直到1975年,Kohler和Milstein成功研究出杂交瘤技术(获诺贝尔奖),出现单克隆抗体(MAb),这才有了真正意义上的治疗性抗体,为肿瘤的治疗提供了一种新的方法--肿瘤的抗体导向治疗法.
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LIAISON索林全自动化学发光免疫分析仪保养与常见故障排除
0 引言化学发光免疫技术是当前主流的免疫分析技术,该技术集化学发光的高灵敏度与抗体技术的高特异性于一体,提高了实验结果的精确度和准确性,在全自动免疫分析设备上得到广泛应用.LIAISON全自动化学发光免疫分析仪是由德国索林公司所生产的新型仪器,该仪器具有下列优点:(1)检测技术先进.采用先进的化学免疫分析技术.固相使用超顺磁微粒,发光标记物为异鲁米诺酯衍生物.(2)检测速度快,高达180个测试/h.(3)样本处理量大.可一次设定144个样本和15种不同的测试项目,总量高达1 500个测试.(4)独特的集成式试剂盒.所有分组,包括校准品均集成于试剂盒内,方便用户使用.
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单链抗体技术及其在药用植物研究中的应用
抗原刺激动物免疫系统产生抗体,抗体识别抗原的部位在其重链和轻链的可变区(variable region).如果将抗体的可变区(VH和VL)通过弹性多肽接头(peptide linker)稳定地连接在一起,即为单链抗体(single chain fragments variable,scFv).scFv大小仅为完整抗体的1/6,但其完全保持了抗体的抗原特异性及抗原的结合能力,同时由于为单链,在大肠杆菌或植物体内等容易表达,无须组装即能保持活性.在植物研究领域,其可用于植物病理诊断、植物生物活性成分的检测、定量分析与分离精制;而将单链抗体基因转入植物细胞,更可使转基因植物获得诸如增强对病毒、除草剂等的抗性,体内生理活性物质增加,次生代谢产物量提高等新的特性.特别是通过转入单链抗体基因,提高药用植物中具生物活性的次生代谢产物量的技术,可望发展成为一种新的分子育种方法,可以在不需要明了目标成分的生物合成途径的情况下,提高其产量.
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核酸适配子SELEX技术筛选研究进展
指数扩增配体的系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)是20世纪90年代初建立的一项筛选技术.Ellingtong和Tuerk[1,2]首先运用此技术筛选到特异性吸附噬菌体T4 DNA聚合酶和有机染料的RNA结构Gold[3]和Singer[4]等又创造性发挥此技术,并称之为Genomic-Selex,即基因组筛选技术,从单靶物质筛选到多靶物质筛选,对传统的单克隆抗体和多克隆抗体技术是一种挑战,为生物界、生物化学界、医学界提供了高效、快速的检测手段,特别是在小分子靶物质目的基因的结构及功能研究方面,有广泛的应用前景.
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免疫磁珠富集技术进展
免疫磁珠富集技术,是以磁性微球作为固相表面,结合免疫学方法建立起的一门具有重要应用前景的样品富集手段.具有磁性的微颗粒通过结合特定抗体,在液相中能特异性地与相应抗原结合,依靠磁场的作用力快速地使所需样品量得到大大的浓缩.由于免疫磁珠富集法具有快速及特异性强的特点,在三十余年的发展中,已广泛应用于分离及浓缩特定细胞、微生物、蛋白质和核酸片段等肉眼难以观察或样品中含量不高的物质.其应用也随着各个科学领域的发展而日趋全面和深入[1].随着抗体技术的发展,免疫磁珠富集技术已成为细胞分选和蛋白质组学研究的重要技术支持.除此,鉴于免疫磁珠富集法有助于降低原有检测手段的检测限,其应用于食品致病微生物和环境、食品中小分子毒害物的检测将大有发展前景.
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肺炎支原体抗体(MP-Ab)对66例婴幼儿急性呼吸道感染的检测及结果分析
肺炎支原体(MP)多感染5岁以上的儿童,但近年来其婴幼儿感染率有增加的趋势.为了探讨MP对婴幼儿呼吸系统的感染状况,我们自1998-01~2000-02应用肺炎支原体抗体技术对66例急性呼吸道感染的婴幼儿进行MP检测,现将结果报告如下.
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疟疾诊断方法的新进展及其应用
随着疟疾防治工作的深入及抗疟药的广泛使用,疟疾病人原虫血症普遍较低.沿用的传统的镜检方法明显的耗时费力,已越来越不能适应当前疟防工作的需要.发展快速简便、敏感性和特异性高的诊断方法已成为疟疾研究的重要课题.近十年,国内外在这方面做了许多研究,归结起来有以镜检结合荧光染色技术的简便快速检测方法;血清学及利用克隆抗体技术的免疫学方法和以分子生物学为基础的DNA序列分析方法.现将这几方面的进展及应用情况作一简要综述.