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顶空-固相微萃取-气相色谱测定义齿基托树脂中游离丙烯酸酯类
制作义齿基托的主要材料是义齿基托树脂.目前,广泛使用的义齿基托材料是聚甲基丙烯酸甲酯树脂及其改性产品,义齿基托树脂主要分为自凝型与热凝型两类,前者可以直接使用,后者间接使用,自凝型义齿基托材料丙烯酸酯类释放量大,危害相对较严重[1].义齿基托树脂中对人体有害的甲基丙烯酸甲酯游离单体是通过唾液浸出的,其含量很低,普通顶空进样难于检测出来,固相微萃取是一种无溶剂的浓缩富集技术,可以提高挥发性化合物的检测灵敏度.本研究建立了顶空-固相微萃取-气相色谱(HS-SPME-GC)联用测定人工唾液中痕量游离丙烯酸酯的方法.
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智能扩增检测法检测非小细胞肺癌患者血浆及肿瘤组织中表皮生长因子受体突变的研究
近年来,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发病率逐年增高,严重威胁着人类的健康.表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)改变了NSCLC患者的治疗策略.EGFR突变是该类药物的预测因子,在NSCLC的治疗决策中起重要作用[1].对晚期患者而言,获取肿瘤组织检测EGFR突变存在困难,有学者曾尝试在NSCLC患者体液中检测EGFR突变,但标本中肿瘤细胞DNA含量少且不稳定,对检测技术要求高.因此,本研究设计了相应的智能扩增检测(smart amplification process,SMAP)体系,检测晚期NSCLC患者肿瘤组织及外周血浆中EGFR突变,以传统测序及扩增阻滞突变富集技术(amplification refractory mutation system,ARMS)作为对照,并用克隆测序进一步验证结果,探讨SMAP法检测EGFR突变的稳定性和可靠性.
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磁珠法提取乳汁乙型肝炎病毒-DNA在实时荧光定量聚合酶链反应检测中的应用价值
孕妇病毒性肝炎的发病率是非孕妇的6~8倍,以乙型肝炎病毒(HBV)常见。母乳中含有大量营养成分及保护因子,对新生儿成长具有重要作用,但是母乳中的HBV同样会通过喂养导致新生儿感染乙型病毒性肝炎,中国每年约有80万儿童通过乳汁感染而成为HBV携带者,约占中国婴幼儿HBV感染的1/3[1]。乳汁为非均相液体,含有大量脂肪和蛋白质,对HBV核酸的提取有较大影响,因而如何提高乳汁中HBV核酸提取率对乙型病毒性肝炎诊断具有非常重要的意义[2]。目前,国内实验室主要采用恒温加热法,其提取效率较高,但干扰因素较多,对于低浓度标本提取重复性差,容易产生假阴性[3]。磁珠法是一种较新的将分离技术和富集技术有机结合为一体的核酸提取方法,适用范围较广,可从大多数生物标本中提取DNA或RNA。该技术在乳汁HBV-DNA检测中的应用尚少见报道,本研究拟应用磁珠法及加热法检测82份乙型病毒性肝炎产妇母乳HBV-DNA 含量,比较分析两者结果,探讨磁珠法在实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测乳汁HBV-DNA中的应用价值。
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免疫磁珠富集技术进展
免疫磁珠富集技术,是以磁性微球作为固相表面,结合免疫学方法建立起的一门具有重要应用前景的样品富集手段.具有磁性的微颗粒通过结合特定抗体,在液相中能特异性地与相应抗原结合,依靠磁场的作用力快速地使所需样品量得到大大的浓缩.由于免疫磁珠富集法具有快速及特异性强的特点,在三十余年的发展中,已广泛应用于分离及浓缩特定细胞、微生物、蛋白质和核酸片段等肉眼难以观察或样品中含量不高的物质.其应用也随着各个科学领域的发展而日趋全面和深入[1].随着抗体技术的发展,免疫磁珠富集技术已成为细胞分选和蛋白质组学研究的重要技术支持.除此,鉴于免疫磁珠富集法有助于降低原有检测手段的检测限,其应用于食品致病微生物和环境、食品中小分子毒害物的检测将大有发展前景.
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大孔吸附树脂富集参血胶囊中人参皂苷Rb1的工艺研究
目的 研究大孔吸附树脂富集参血胶囊中人参皂苷Rb1的工艺条件.方法 采用HP1100高效液相色谱仪ZORBAXSB-C18柱(4.6 mm×250mm,5 μm),紫外检测波长:203 nm,流动相:乙腈-水(30∶70)对人参皂苷Rb1进行测定.以树脂的比吸附量、比洗脱量及人参皂苷Rbl含量为指标,对树脂类型进行筛选,同时进行洗涤溶剂的选择,及应用L9(34)正交实验进行洗脱条件的研究,从而确定大孔吸附树脂纯化工艺参数.结果 人参皂苷Rb1在0.752~9.4 μg内呈现良好的线性关系,确定洗涤溶剂为0.5 mol·L-1 NaOH溶液,佳洗脱条件:提取液上柱后静置12h,用15倍60%的乙醇溶液,以流速1.0 mL·min-1进行洗脱.在此条件下,所得的人参皂苷Rb1含量较高.结论 该法简便、专属性强,可用于参血胶囊中人参皂苷Rb1的提取.
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浮选富集-原子吸收光谱法同时测定矿泉水中铜和铅
浮选富集是利用一些重金属离子与KI、亚甲基蓝生成络合物M-I-MB体系,络合物浮选于水相和有机相之上,弃去液相,所得的浮选物富集了溶液中的重金属.由于浮选技术和溶剂萃取不同,它与水相和有机相体积关系不大,所以取样量大,富集倍数高,提高了检测灵敏度.过去该技术应用于分光光度法时,需进一步分离各金属,操作复杂[徐其亨,刘绍璞.理化检验化学分册.1984,20(4):48].而将浮选富集技术与原子吸收光谱法结合起来,既有浮选技术富集倍数高,又有原子吸收法选择性好的特点,不需进一步分离,可直接测定,在适当pH时还可同时测定几种元素,操作简便快速.现将应用此新法同时测定矿泉水中铜(Cu)和铅(Pb).报告于下.
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巯基棉富集--端视ICP-OES法测定纯净水中痕量Pb、Cu、Cd
1引言纯净水中Pb、Cu、Cd的国家卫生标准限量低,常规方法灵敏度较低,不能直接进样测定,需通过预富集手段.巯基棉富集是一种常用的富集方法.本文利用巯基棉富集技术,控制溶液酸度在pH5.5左右,使Pb、Cd、Cu富集,然后用10%热盐酸进行洗脱.洗脱液用ICP-OES法进行测定.该法具有灵敏、准确的特点,方法的检出限分别为Pb0.01μg/L、Cu0.6μg/L、Cd0.03μg/L.应用于纯净水中Pb、Cu、Cd的测定,结果满意.
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应用干细胞快速筛选富集技术治疗新鲜骨折骨缺损
目的 介绍利用干细胞快速筛选-富集-复合系统制备活性生物材料的方法,并探讨其治疗新鲜骨折、骨缺损的疗效. 方法 回顾性分析2013年7月至2016年4月期间采用干细胞快速筛选富集技术治疗的22例新鲜骨折、骨缺损患者资料.男16例,女6例;平均年龄为52.2岁(27 ~81岁);骨折类型:胫骨平台骨折15例,跟骨骨折7例.骨缺损体积平均为12.5 mL.术中利用干细胞快速筛选-富集-复合系统制备生物活性β-磷酸三钙,回植.术后联合影像学、膝关节Lysholm评分标准及足部Maryland评分标准评定疗效. 结果 22例患者术后获平均25.7个月(12 ~46个月)随访.骨髓基质干细胞(BMSCs)富集效率平均达82.4%,富集过程对细胞活力无明显影响.胫骨平台骨折患者平均植入13 381.3个BMSCs,骨折愈合时间平均为8.9周(6~15周),术后1年膝关节Lysholm评分平均为93.6分(84 ~ 100分),其中优10例,良4例,可1例;跟骨骨折患者平均植入16 677.7个BMSCs,骨折愈合时间平均为9.4周(8~13周),术后1年足部Maryland评分平均为93.6分(85 ~98分),其中优6例,良1例. 结论 干细胞快速筛选-富集-复合系统制备的活性生物材料对新鲜骨折、骨缺损具有较好的修复效果,是一种较好的骨移植材料.
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孕妇外周血胎儿细胞的富集技术及其在产前诊断中的应用
羊膜穿刺和绒毛吸取是目前常用的产前诊断技术,但其操作具有创伤性,可导致宫内感染、羊膜破裂、流产、胎儿畸形或死亡等[1].建立非创伤性产前诊断方法,降低产前诊断的风险,是产前诊断工作的一项重大课题.