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QuEChERS方法结合固相萃取-液质联用/气质法检测茶叶中的农药残留
方法概述加入10mL去离子水进行混匀,然后加入乙腈(LC)或正己烷/丙酮(GC)进行萃取.对LC加入Welchrom QuEChERS盐析包,进行猛烈摇震,再离心使其发生相分离.将部分有机相溶液通过Welchrom净化管反相固相萃取进行净化,后的提取液直接分析.对GC通过Welchrom Carb SPE柱进行净化,收集洗脱液,吹干,加入乙腈进行分析.由内标校正进行定量,其内标在第一次加入乙腈后进行添加.
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不同洗脱液对环氧乙烷生物指示剂活菌洗脱效果及抗力测定影响
目的 研究不同洗脱液对环氧乙烷生物指示剂的菌量及抗力测定结果的影响.方法 通过细菌定量检测方法,比较不同洗脱液对生物指示剂上活菌洗脱效果及其对生物指示剂抗力的影响.结果 6种洗脱液与5种稀释液对同一批次的生物指示剂载体上细菌洗脱后,细菌回收效果好的是用5 000 mg/L吐温-80的营养肉汤洗脱后,用浓度为5 000 mg/L吐温-80的PBS,回收菌数为7.03×106cfu/片.回收效果差的是无菌生理盐水,平均回收菌数为3.78×106cfu/片.回收菌数数值越大D值越小,ST值相应变大和KT值变小.结论 洗脱效果好的洗脱液和相应稀释液是吐温-80营养肉汤与吐温-80 PBS,生物指示剂回收菌数越高,其D值更接近真值.
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肇庆市端州区2002年医院消毒质量监测报告
于2002年对区属医疗单位消毒质量进行了监测.1 方法和评价标准取经灭菌的医疗器械以无菌操作方法用洗脱液反复洗脱5次后放入需氧-厌氧培养基和霉菌培养基中培养后检测医疗器械灭菌效果,以无菌生长为合格.对使用中的消毒液取其1 ml样液加入9 ml相应中和剂中,检测细菌总数,以菌落数≤100 cfu/ml为合格.
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一次性医疗卫生用品的监测情况
从1997年~2001年间,对本市医院内购入的一次性使用注射器、输液器随机抽样进行细菌和真菌污染检测.每批样品随机抽取5个样.注射器直接抽取无菌洗脱液(生理盐水),约占管内容积2/3,将芯杆抽至刻度,振摇5次,洗下管壁附着的细菌.首先取洗液1 ml接种平皿,一式二份,倾注普通营养琼脂,于37℃培养48 h,记录细菌总数;然后再取洗液分别接种需-厌氧菌培养管5管与真菌管2管(对注射器容积为1、2、5~10和20~50 ml的接种量分别为0.5、1.0、2.0和5 ml).输液器则取5个样,分别以无菌注射器吸取10 ml无菌洗脱液注入输液器内往返摇荡5次,洗下管壁上的细菌,将洗液移入无菌磨口瓶中混匀,取洗液1 ml接种需-厌氧菌培养管5管与真菌管2管;
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不同方法洗消处理的床上卧具细菌污染调查
1998年6~9月,对济宁市城区36家旅店经不同方法洗消后铺于床上的卧具进行了细菌污染调查.检测时,以蘸有无菌生理盐水的棉拭涂抹采样,将棉拭头剪入装有10 ml无菌生理盐水的试管内.敲打试管以洗脱棉拭上菌.取洗脱液作活菌计数,以细菌总数≥8 cfucm2为超标.
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84消毒液对医院门把手的擦拭消毒效果
对医院门把手,用含250mg/L有效氯的84消毒液(主要杀菌成分为次氯酸钠)擦拭4遍消毒.于消毒前、后,用浸以采样液(0.5%硫代硫酸钠溶液)的无菌棉拭,分别对门把手的一半往返涂抹4次采样.将采样后棉拭头置于采样液中,洗脱棉拭上的菌.取洗脱液作活菌计数.检查真菌时,取洗脱液接种沙堡培养基平板,涂匀.
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管道类医疗用品无菌检查试验方法的改进
按<消毒技术规范>现用洗脱法检查管道类医疗用品灭菌是否彻底,常因操作台小,输液器长,注入洗脱液来回洗脱不方便,费时较长,亦易由操作污染出现假阳性结果.为此,参照注射针的浸泡法,将输液(血)器针头、滴管、过滤网、空气管和调节器直接用无菌剪刀剪入装有40ml培养基的培养管内.
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住院病人使用的菜票细菌污染与消毒效果检测
对本医院住院病人使用中的菜票,抽取180张,随机分为3组,每组60张.第1组不消毒,检测细菌污染;第2组加热蒸发40%甲醛溶液(25 ml/L)熏蒸12 h;第3组用1:200稀释的"84"消毒液(含有效氯250 mg/L)浸泡30 min.检测第2、3组消毒效果.检测时,以沾有采样液的无菌棉拭在菜票正反面分别来回涂抹10次采样.然后,将第1组棉拭头剪入装有10 ml无菌生理盐水的试管内,第2组者为含0.5%亚硫酸钠(中和剂)生理盐水的试管内,第3组者为含0.2%硫代硫酸钠(中和剂)生理盐水的试管内.振荡试管约1 min,以洗脱棉拭上菌.取洗脱液或其稀释液1 ml接种平皿,倾注普通营养琼脂并混匀.置37℃温箱内培养24 h,计数菌落数,计算细菌总数.
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不同消毒剂对医务人员手消毒效果的比较
将150名医务人员随机分为3组,每组50人.均经肥皂搓洗手30 s,流水冲洗1 min崐.然后,第1组浸泡于0.1%苯扎溴铵(新洁尔灭)溶液中,第2组浸泡在含0.5%氯己定(洗必泰)的75%乙醇溶液中,第3组为0.2%过氧乙酸溶液,均浸泡1 min.于消毒前后,分别用浸有采样液(含相应中和剂)的棉拭采样.采样时,五指并拢,用棉拭在双手指曲面分别从指根到指端来回涂擦5次,将棉拭头剪入盛有10 ml采样液的试管中.振荡1 min洗脱棉拭上菌.取1 ml洗脱液或其稀释液作活菌计数,以细菌总数≤10 cfu/cm2为合格.
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成都市金牛区托幼机构消毒工作现状调查
1997年11月,对金牛区机关、工矿企业、个体等12所托幼机构消毒工作现状进行了调查.检测物体表面细菌污染时,用浸有无菌生理盐水的棉拭借助5cm×5cm规格板涂抹采样.对手则直接涂抹采样.采样后,将棉拭头置10ml采样液中洗下细菌并混匀.取洗脱液1ml作活菌计数.以物体表面细菌总数≤15cfu/cm2,手表面细菌总数≤300cfu/手,并未检出致病微生物者为合格.
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大连市幼儿园细菌污染检测
2001年4~10月,对大连市22所幼儿园的空气、幼儿手、物体表面等细菌污染情崐况进行了检测.室内空气采用9 cm普通营养琼脂平板沉降5 min采样,物体表面及幼儿手等用浸有无菌洗脱液棉拭涂抹采样,物体表面采样4×25 cm2],不足100 cm2]采全部面积.检测细菌总数及大肠菌群.结果判定,以室内空气细菌总数≤2 500 cfu/m3];物体表面、幼儿手≤8 cfu/cm2];口杯、餐具、水龙头≤5 cfu/cm2],并不得检出大肠菌群为合格.
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用蒸馏水冲洗去除注射器针头微粒的效果
对用自来水冲洗后加用蒸馏水冲洗与否的不锈钢注射器针头中微粒含量进行了比较.将使用后回收的针头浸于1%新三效热原灭活剂溶液中泡30 min,取出用自来水冲净,再逐个在针头清洗机用自来水冲洗针座、针梗内部,经烤箱烘干,磨修(未带钩者不磨修)、别垫、装盒,以压力蒸汽灭菌.检测微粒含量采样前,一组每只针头均先以10 ml无菌蒸馏水冲洗1次,另一组则不再用无菌蒸馏水冲洗.采样时,每只针头用10 ml无菌生理菌水反复抽吸5次,将10只针头的洗脱液共100 ml收集于无微粒容器中为一份样本.用DWJ-1型输液微粒计数器检测洗脱液中的微粒数.
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中纺AB抗菌防臭纤维布抑菌作用试验观察
中纺AB抗菌防臭纤维为聚丙烯晴的一种改性纤维,是在聚丙烯晴高分子链上接以2个带正电荷的抗菌基团而成.该抗菌基团将带负电荷的细菌包围而起到抑菌作用.检测其抑菌效果时,将大肠杆菌(ATCC25922)或金黄色葡萄球菌(ATCC 1844)悬液100μl滴加在置于平皿中该抗菌纤维布片(1.0 cm×3.0 cm,对照为不含抗菌基团的同类布片)上.作用一定时间,用磷酸盐缓冲液5 ml洗脱布片上的菌.取洗脱液作活菌计数,计算抑菌率.
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微机键盘微生物污染调查
1997年9~10月,对我部医院与气象室微机键盘进行了微生物污染调查.采样时,用沾无菌生理盐水棉拭在采样板框内往返涂抹3次.将棉拭放入装有10 m l无菌生理盐水的试管内,振摇洗下微生物.取洗脱液,在普通营养琼脂平板上划线接种,检测细菌总数.另以乳糖管发酵法检测大肠菌群,用反向被动血凝法检测HBsAg.同时,对用含2 500 mg/L有效氯的84消毒液(含次氯酸钠)或0.5%过氧乙酸溶液擦拭3遍并作用60 min的键盘,或以紫外线在50 cm处照射60 min者,作采样检测.
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医院电话机细菌污染及其消毒效果检测
对本医院各科室30部工作人员公用电话机细菌污染进行了检测.随后,12部用有效氯250 mg/L的含氯消毒剂溶液消毒,11部用75%乙醇溶液消毒,7部以清水代替消毒液作对照.均擦拭2遍后作用5 min.检测时,用蘸有采样液(清水组为无菌生理盐水,乙醇与含氯消毒剂组分别为营养肉汤和0.1%硫代硫酸钠溶液)的无菌棉拭分别在电话机手柄、话筒及拨号键涂抹10次采样.将棉拭头剪入装有采样液的试管中,洗脱棉拭上细菌.取洗脱液进行活菌计数,对污染菌作分离鉴定.
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三种洗脱液进行载体活菌计数结果比较
洗脱液对载体定量杀菌试验中的活菌计数的准确性有明显影响,为比较3种洗脱液对染菌载体活菌计数的准确性,采用纸片作染菌载体进行了试验观察.现报告结果如下.
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麻醉机螺纹管与面罩内壁细菌污染及消毒方法
为了解麻醉机螺纹管与面罩内壁细菌污染状况,用蘸生理盐水的无菌棉拭涂抹采样相当于25 cm2,放人10 ml无菌生理盐水中洗脱棉拭上菌。取洗脱液检测,无菌合格率仅为20%(4/20)。检出多为霉菌,也有革兰阴性杆菌。其后,采取如下措施:①每次使用后,将螺纹管用1:200"84"消毒液(含有效氯250 mg/L)浸泡0.5 h,再挂钩晾干备用;②一人一消毒;③每周将所有的螺纹管及面罩用甲醛熏蒸24 h灭菌。再次检测,合格率达95%(19/20)。
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从厚叶软珊瑚中分离的西松烷二萜及其抗炎活性
作者从厚叶软珊瑚中分离得到9种西松烷二萜,其中包含4种新的化合物crassumols D-G(1-4),并评估了其抗炎活性。
冷冻干燥的厚叶软珊瑚体(1.0 kg)粉碎,用热甲醇提取3次,所得溶液经过滤、混合、浓缩,得到褐色粘稠状残留物提取物(75.0 g)。将提取物悬浮于水中,用正己烷、二氯甲烷分配层析,合并正己烷提取液,浓缩,得到正己烷提取物(36.2 g)。正己烷提取物经硅胶柱色谱分离,用乙酸乙酯/正己烷梯度洗脱,得到6个部分(H-1-H-6)。部分H-2(1.5 g)经硅胶柱色谱分离,用正己烷/乙酸乙酯洗脱,得到3个部分(H-2.1-H-2.3)。部分H-2.1(0.3 g)经硅胶柱色谱分离,用正己烷/丙酮洗脱,洗脱液经YMC RP-18硅胶柱色谱分离,用甲醇/丙酮/水洗脱,得到化合物7(6.8 mg)。部分 H-2.3(0.8 g)经硅胶柱色谱分离,用正己烷/乙酸乙酯洗脱,得到化合物8(8.2 mg)。部分H-4(2.5 g)经YMC RP-18硅胶柱色谱分离,用甲醇/丙酮/水洗脱得到4个部分(H-4.1-H-4.4)。部分H-4.1(0.8 g)经YMC RP-18柱色谱分离,用甲醇/水洗脱,得到化合物9(9.8 mg)。部分H-4.2(0.5 g)经YMC RP-18柱色谱分离,用丙酮/水洗脱,得到4个部分(H-4.2a-H-4.2d)。部分H-4.2a(0.17 g)经硅胶柱色谱分离,用二氯甲烷/丙酮洗脱,得到化合物5(9.8 mg)和6(10.4 mg),部分H-4.2b (0.16 g)经硅胶柱色谱分离,用二氯甲烷/丙酮洗脱后,再经YMC RP-18硅胶柱色谱分离,用甲醇/水洗脱,得到化合物4。部分H-4.2c(0.1 g)经硅胶柱色谱分离,用二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱后,再经YMC RP-18柱色谱分离,用丙酮/水洗脱,得到化合物1(5.6 mg),2(4.8 mg),3(6.3 mg)。 -
从Miconia prasina中分离得到的黄烷酮类化合物
作者从Miconia prasina中分离得到1种新的黄酮苷和5种已知的黄烷酮化合物,并评价了化合物1~3与大麻素受体(CB1和CB2)的亲和力。
取M. prasina干燥粉碎茎(140 g),用甲醇提取,除去溶剂,得到浓缩物(7.5 g),浓缩物经硅胶减压柱液相色谱分离,用己烷、乙酸乙酯、甲醇梯度洗脱,得到9个部分。将己烷/乙酸乙酯洗脱液(1:1)和己烷/乙酸乙酯洗脱液(1:3)合并,再经固相萃取,用己烷、乙酸乙酯、甲醇梯度洗脱。其中60%乙酸乙酯/己烷洗脱液,经Sephadex LH-20柱色谱分离,用甲醇洗脱,得到化合物4(8 mg)和化合物6(6 mg)。100%乙酸乙酯洗脱液经半制备HPLC分离,用30%~70%甲醇/水洗脱,得到化合物5(11 mg)。将乙酸乙酯洗脱液及乙酸乙酯/甲醇(3:1)洗脱液合并,再经固相萃取,先用己烷/乙酸乙酯(3:1)洗脱,再用甲醇梯度洗脱,得到8个部分。乙酸乙酯/甲醇(3:1)洗脱液经半制备 HPLC 分离,用15%~85%甲醇/水洗脱,得到化合物1(3 mg)和3(5 mg)。乙酸乙酯/甲醇(2:2)洗脱液经Sephadex LH-20柱色谱分离分离,用二氯甲烷/甲醇(1:1)洗脱,得到化合物2(8 mg)。 -
双夏汤不同洗脱液镇静催眠作用研究
目的:研究双夏汤不同洗脱液的镇静催眠作用。方法:通过测定小鼠自主活动和对戊巴比妥钠阈下剂量诱导睡眠的作用,观察双夏汤水煎液、水洗液、20%、70%和95%醇洗液的镇静催眠作用。结果:双夏汤水煎液、20%和95%醇洗液显著降低小鼠的站立次数,分别为78.5%,78.3%和62.5%;双夏汤水洗液和70%醇洗液能显著降低小鼠自主活动次数(P<0.01)、站立次数(P<0.01)和修饰时间(P<0.05)。双夏汤水煎液能明显缩短小鼠睡眠的潜伏期(P<0.05),延长小鼠睡眠时间(P<0.05),增加小鼠的入睡率。双夏汤水洗液能显著缩短小鼠睡眠潜伏期(P<0.05),增加小鼠的入睡率。结论:双夏汤水煎液和水洗液的镇静催眠作用优于醇洗液。