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缺氧缺血性脑病对凝血功能影响分析
目的:分析新生儿围产期缺氧缺血性脑病对凝血功能的影响.方法 本组抽取我院于2011年7月至2013年7月收治的缺氧性缺血脑病患者68例和未出现缺氧缺血性脑病患者34例,两组患者分别为观察组和对照组,两组患者均采用磁珠法和五分类法对患者的凝血功能进行检测,观察患者的血浆凝血酶时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)以及血小板的数量.结果 经临床检验,观察组患者的PT、APTT均明显高于对照组,且观察组患者的FIB明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05),TT、血小板等无显著变化.结论 凝血功能受到PT、APTT、FIB的影响,且新生儿缺氧缺血性脑病损伤程度越高,PT、APTT、FIB降低越显著,凝血功能越高.
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STA COMPACT 凝血仪的工作原理及典型故障处理
STACOMPACT凝血仪工作原理:STA COMPACT凝血仪是一种采用生物方法即凝固法中的黏度法(也称为磁珠法)的全自动血凝分析仪器.
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全自动血凝仪控温系统故障维修
科学技术的发展和基础医学研究的进步,使得血栓与止血的检测从传统的手工方法发展为全自动血凝仪.STA COMPACT血凝仪是法国STARGO公司生产的,技术性能比较先进的全自动血凝仪.它可以通过磁珠法、发色法、比浊法等方法,检测血栓与止血方面的多种参数,并且在先进的计算机系统控制下,自动完成:加样、预温、检测、报告结果输出等工作.
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利用磁珠法结合MALDI-TOF MS进行慢性心衰气阴虚证血液蛋白质组学研究的方法学探讨
目的:建立磁珠法结合MALDI-TOF MS进行慢性心衰气阴虚证血液蛋白质组学研究的实验方法.方法:采用MALDI-TOF-MS技术检测不同磁珠分离的患者血液蛋白质谱,从采集、蛋白提取、反复冻融、重复性、基质样品比例等方面分析其影响.结果:血清质谱峰均多于血浆,弱阳离磁珠出峰数量优于铜整合磁珠,气阴虚证患者与健康组比较蛋白表达有明显差异.结论:该方法作为一种高通量、快速分离、制备和鉴定的蛋白质组学技术,整个实验体系稳定、可靠、重复性好,适用于中医证候蛋白质组学的研究.
关键词： 慢性心衰气阴虚证 MALDI-TOF-MS 磁珠法 -
大容量抗体库高通量筛选方法的研究进展
随着蛋白质组学研究的发展,抗体在疾病的诊断、治疗和基础研究上的作用越来越大,迫切要求发展高通量的抗体筛选方法.本文研究整理了近几年在噬菌体抗体高通量筛选方法上的研究进展,对磁珠法、基于自动化工作站的普通ELISA法、膜法、微阵列芯片法和液相悬浮芯片法等高通量筛选方法进行了综述.
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探讨外置环境对PRECLL C2000-4检测结果的影响
目的：探讨不良的置放条件对PRECLL C2000-4四通道血凝分析仪等小型的检验仪器检测结果的影响。方法：将PRECLL C2000-4四通道血凝分析仪和超速离心机置于同一试验台，比较微震荡状态下（A组）和相对静止状态（B组）的结果，A组将离心机模拟至日常工作模式：处于反复启动、停止的使用状态，并非一直运转。这样在离心机启动加速时及停止减速时会对实验室台面及相邻的PRECLL C2000-4四通道血凝分析仪造成一定的震荡。结果：2组之间PT、TT和APTT结果并无显著差异（P>0.05），但A组的PT、TT和APTT结果分别有15、11、17份结果与B组的结果有显著差异，误差比例分别为10.0%、7.3%、11.3%，对这些误差加大的标本进行重复检验，发现大多检测结果与B组结果相近，与A组相差较大，验证了A组结果的不稳定性。其结果误差的发生概率无规律可循，但随着测试时间的延长相对会加大随机误差出现的概率。结论：离心机工作时，特别是在离心机开始运转和结束运转时的震荡，会直接干扰PRECLL C2000-4四通道血凝分析仪的磁珠正常的震动幅度从而产生一定的随机误差，进而影响PT、TT、APTT的检测结果。因此各种小型检验仪器与离心机置于同一试验台这一做法并不科学，不仅会造成检测结果的随机误差，而且也会因震荡而影响分析仪的灵敏度、精密度和稳定性，造成仪器性能的下降和使用寿命的缩短，各实验室应严格规范中、小型检验仪器的放置。
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磁珠法检测抗酸杆菌的方法建立与临床应用
目的 运用磁珠法检测痰液标本中的抗酸杆菌,探讨该技术在抗酸杆菌诊断中的临床应用价值.方法 采用磁珠法检测102份痰液标本中的抗酸杆菌,并与离心沉淀法平行检测结果相比较.结果 同一份标本经磁珠法处理后镜下视野更清晰,抗酸杆菌和背景对比更鲜明,102份痰液标本中离心沉淀法检测的阳性率为47.1％,磁珠法检测的阳性率为51.0％,54份离心沉淀法检测阴性的标本用磁珠法检测有4份阳性,平行检测同一份标本,磁珠法检测出的阳性等级更高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 磁珠检测方法操作简便、快速,其阳性率高,浓缩效果明显,适合结核病检测实验室的推广.
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两种HCV RNA荧光定量试剂盒检测丙型肝炎病毒的比较分析
目的 比较分析两种丙型肝炎病毒(HCV)核酸定量检测试剂盒的临床性能.方法 随机抽取63例临床血清样本进行平行检测,分别采用HCV磁珠法试剂和对照试剂检测血清中RNA水平.结果 对照试剂检测63例临床样本中有22例阳性,41例阴性;磁珠法试剂检测63例样本中有27例阳性,36例阴性,两种试剂的阳性样本具较好的一致性(P=0.000),磁珠法试剂与对照试剂的定量检测结果具有线性相关性(r=0.935,P＜0.05).结论 两种试剂都可以应用于HCV临床检测,磁珠法试剂具有更高的灵敏度,是一种比较理想的HCV RNA定量检测试剂.
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磁珠核酸提取方法在血浆EBV-DNA实时荧光定量PCR检测中应用的性能评价
目的 评价磁珠核酸提取方法在血浆EB病毒DNA(EBV-DNA)实时荧光定量PCR检测中应用的性能.方法 采用自动化磁珠法提取核酸,并结合实时荧光定量PCR测定EBV-DNA,利用第三方定值参考物质评价该方法的检测性能.同时选取100例鼻咽癌患者,分别用磁珠法与煮沸法定量检测其血浆EBV-DNA,比较分析两种方法的相关性.结果 基于自动化磁珠法的实时荧光定量PCR系统检测EBV-DNA,其低、中、高水平的重复性精密度均＜3/5 TEa(TEa=靶值±0.4 lg),中间精密度＜4/5 TEa;在5.4×101～5.4×105 U/mL范围内具有良好的线性;低检测限约为3.334×101 U/mL;样本中Hb干扰物浓度低于8.667 g/L,对磁珠法检测结果无明显影响.磁珠法与煮沸法的检测结果呈线性相关,阴阳性符合率为83％.结论 采用自动化磁珠核酸提取方法结合实时荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA,具备良好的检测性能.
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RackRotor血凝仪的维护和修理
血凝仪是基于凝固法对血液凝固过程进行测量.RackRotor全自动血凝仪采用磁珠法测量,测试原理如下:测试杯中放有磁珠.测试时,测试杯下面的永久磁铁旋转,带动杯中磁珠沿杯壁旋转.测试杯的侧壁外安装有红外反射式光电器件,用来监视磁珠运动变化.
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三种核酸提取方法检测丙肝HCV-RNA定量的比较
目的：比较及评价3种不同核酸提取方法检测HCV-RNA结果的差异。方法依照美国临床实验室标准化协会( CLSI) EP9-A2文件规定，收集40个新鲜血清标本，分别使用磁珠法、柱提法、手工法丙肝试剂以及Roche试剂进行平行检测，记录测定结果，计算线性方程及相关系数，并对其进行偏倚评估。结果磁珠法和柱提法试剂与Roche试剂方法间的相关性良好(r>0.975)，而手工法与Roche试剂方法检测结果间差异超出预设允许误差范围。结论各方法学的试剂与Roche试剂检测结果大致相关性尚可，其中磁珠法结果较好。
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精斑试纸在水中高腐尸体应用失效1例
人精液(斑)确证试纸条(PSA)是针对男性前列腺上皮细胞分泌的一种特异性单链糖蛋白P30进行的定性检验,由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验.但在实际案件中,有时会出现精斑试纸条检测呈阴性结果,却检测到男性DNA的情况,现遇1例报道如下,旨在为法医学实践提供参考.
关键词： 法医物证学 磁珠法 高腐尸体 精子STR-DNA分型 -
磁珠法提取乳汁乙型肝炎病毒-DNA在实时荧光定量聚合酶链反应检测中的应用价值
孕妇病毒性肝炎的发病率是非孕妇的6～8倍，以乙型肝炎病毒（HBV）常见。母乳中含有大量营养成分及保护因子，对新生儿成长具有重要作用，但是母乳中的HBV同样会通过喂养导致新生儿感染乙型病毒性肝炎，中国每年约有80万儿童通过乳汁感染而成为HBV携带者，约占中国婴幼儿HBV感染的1/3[1]。乳汁为非均相液体，含有大量脂肪和蛋白质，对HBV核酸的提取有较大影响，因而如何提高乳汁中HBV核酸提取率对乙型病毒性肝炎诊断具有非常重要的意义[2]。目前，国内实验室主要采用恒温加热法，其提取效率较高，但干扰因素较多，对于低浓度标本提取重复性差，容易产生假阴性[3]。磁珠法是一种较新的将分离技术和富集技术有机结合为一体的核酸提取方法，适用范围较广，可从大多数生物标本中提取DNA或RNA。该技术在乳汁HBV-DNA检测中的应用尚少见报道，本研究拟应用磁珠法及加热法检测82份乙型病毒性肝炎产妇母乳HBV-DNA 含量，比较分析两者结果，探讨磁珠法在实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测乳汁HBV-DNA中的应用价值。
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基于磁珠法的荧光定量PCR检测HBV-DNA临床应用评价
目的 评价基于磁珠法的荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床应用.方法 选用磁珠法定量检测试剂和煮沸法定量检测试剂,对一系列临床患者血清标本进行检测,比较两种试剂检出率的差异;通过浓度为1×108的样本的梯度稀释结果考察两者的灵敏度和线性范围.结果 68例临床样本中,磁珠法试剂检测的阳性率为69.12％,煮沸法试剂检测的阳性率为32.35％ (P＜0.05);两种试剂对103 IU/mL阳性样本检测结果:y =0.913x-0.261,r=0.919;磁珠法线性范围3.9×(101 ～108),灵敏度39 IU/mL,煮沸法线性范围2.4×(102 ～107),灵敏度240 IU/mL.结论 磁珠法核酸提取试剂线性范围宽,灵敏度高,临床检出率明显高于煮沸法,对于高浓度和低浓度样本都能准确的定值,适合于乙肝治疗后监测与体检筛查.
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两种提取孕妇血浆游离胎儿DNA方法的比较
目的 分别应用两种方法进行血浆游离胎儿DNA的提取,判定及筛选佳的血浆游离胎儿DNA的提取方法,为后续试验提取游离胎儿DNA的方法提供参考依据.方法 收集30例健康妊娠孕妇血浆,用离心柱法和磁珠法进行血浆游离DNA的提取,经甲基化敏感限制性内切酶BstUI酶切后使用微量紫外分光光度计测量所提取的游离胎儿DNA的含量及纯度,再使用实时荧光定量PCR扩增方法测定扩增效率,进行统计学分析.结果 离心柱法所提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(43.27±21.01)ng/μl;纯度A260/A280 (0.999 7±0.084 42);扩增效率为94％;而磁珠法提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(31.74±12.25) ng/μl:纯度A260/A280 (0.878 3±0.052 66);扩增效率为87％.两组方法提取游离DNA的浓度、纯度比较,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 离心柱法比磁珠法操作更简便、快捷.经测定提取的DNA的浓度及纯度,扩增效率后可判断离心柱法所提取的游离胎儿DNA的浓度、纯度及扩增效率都远远优于磁珠法;离心柱法比磁珠法更适用于后续无创产前诊断研究试验.
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磁珠法在抗酸杆菌快速检测中可行性的研究
目的 通过与BD960快速液体培养法、离心沉淀法的比较来评价磁珠法这一检测手段的优缺点和可行性.方法 采用磁珠法检测108例痰液标本,并与BD960快速液体培养法和离心沉淀法的平行检测结果相比较.结果 1)磁珠法和离心沉淀法仅需1天就可以得出结果,BD960快速液体培养法的阳性报告时间需要10.72±4.49天.2)磁珠法阳性占BD960快速液体培养法的88.8％(71/80).3)离心沉淀法阴性的43例标本中磁珠法有6例标本为阳性,占离心沉淀法阴性标本的14.0％(6/43),且磁珠法的浓集效果更好.结论 磁珠法不仅操作简便、快速,其阳性率高,与BD960快速液体培养法有很高的可比性,适合结核诊断实验室的开展.
关键词： 磁珠法 BD960快速液体培养法 离心沉淀法 结核分枝杆菌 -
不同类型试剂盒提取血液基因组DNA效果的比较
目的 比较溶液沉淀法、离心柱法和磁珠法试剂盒提取血液基因组DNA的效果.方法 采集高血压患者的血液样本90份,随机分为3组,分别采用溶液沉淀法、离心柱法和磁珠法试剂盒提取血液样本基因组DNA.通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测及PCR扩增法对血液样本基因组DNA的提取效果进行比较.结果 溶液沉淀法提取的DNA浓度显著高于离心柱法和磁珠法(P＜0.05),离心柱法与磁珠法提取的DNA浓度差异无统计学意义(P＞0.05),3种方法提取血液样本基因组DNA的A260/A280值及A260/A230值的差异均无统计学意义(P＞0.05);3种方法提取的血液样本基因组DNA的大小基本相同,离心柱法提取的DNA点样孔处较干净,电泳条带单一,无拖尾;3种方法提取血液样本基因组DNA的PCR产物均可见单一且明亮的目的条带.结论 3种类型提取试剂盒各有优缺点,使用时应根据实际情况进行选择.
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8种不同检材提取DNA的结果分析
果有实际指导意义,在后分析阶段也有不同的效果.
关键词： Chelex-100法 磁珠法 DNA -
磁珠法结合定量PCR检测肠道病毒71型灭活疫苗中宿主细胞DNA残留量的验证及应用
目的 对磁珠法结合定量PCR(quantitative PCR,qPCR)检测肠道病毒71型灭活疫苗(Vero细胞)(EV71疫苗)中宿主DNA残留量进行适用性验证及应用.方法 利用微磁珠与蛋白溶液中DNA的特异性结合,来提取样品中残留的宿主细胞DNA.将已知浓度的细胞DNA对照系列稀释后,作为标准品DNA与提取的DNA同时进行qPCR扩增.根据标准品DNA的循环阈值与浓度之间的线性关系,对未知样品中残留DNA进行定量分析.结果 标准品检测范围在0.03～3 000.00 pg/反应.该方法的标准曲线决定系数≥0.980,扩增效率为90.0％～110.0％.质控样品回收率为50％～150％,相对标准偏差均小于30％.实验结果的各项参数均在要求范围内.结论 磁珠法可解决残留DNA检测中样品前处理的技术难点,qPCR能够简便、快速、准确地对EV71疫苗生产过程中的DNA残留量进行定量测定.该法适用于EV71疫苗中DNA残留量的检测及疫苗生产过程和其成品的质量控制,对其他采用同样细胞基质的病毒性疫苗质量控制具有借鉴意义.
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磁珠法测定纤维蛋白原的局限性探讨
纤维蛋白原(FIB)测定是术前止血功能评估、溶栓监测必做的项目之一.目前FIB测定方法颇多,其中以凝固法为原理的血凝仪应用较为广泛,血凝仪使用的凝固法大致可分为2类：磁珠法和光学浊度法（包括透射和散射比浊法）.磁珠法以电磁感应为原理,通过检测血浆凝固过程粘度变化导致钢珠振幅的变化来确定凝固终点,避免了血浆和试剂等因素的干扰,是凝固法中较先进的检测方法.磁珠法是临床常用的FIB测定方法之一.但在实际工作中,我们发现磁珠法测定FIB仍有它的缺点和局限性.
