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浅谈法医物证学DNA实验室管理
本文意在完善法医物证学DNA实验室的日常管理,阐述了实验人员要求、实验室管理标准及设施维护,以确保司法理性求真功能的实现.
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经焚化炉焚烧后尸骨的 DNA 检验
尸体经过焚烧后，火焰的高温会使骨骼中的蛋白质发生变性变化，在此过程中 DNA 发生变性和人体焚烧后产生的大量聚合酶链反应（PCR）抑制物均会在法医尸骨检测时影响 DNA 分型检测结果。本研究项目对经焚化炉焚烧后的尸骨 DNA 检验进行相关探讨。
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略论法医物证学DNA实验室质量控制
法医物证学DNA实验室质量控制关系到鉴定结果的准确性,不仅需要遵循技术原则、法律要求及道德标准要求,同时也要遵循一定的标准,比如人员标准、仪器设备标准及分析检验程序标准.为了尽可能地降低错误,制定实验室错误纠正措施、定期进行专业测试与评估及保证物证检材具有重复检测的可能性显得尤为重要.
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神经心理学在法医学中的应用
法医学(forensic medicine)从1985年起已分化为:法医病理学、临床法医学、法医物证学、法医毒物分析、法医生理学、法医神经精神病学等分支学科,其中包括神经心理学.在刑事或民事诉讼中,凡涉及或要解决有关人身伤害、有无生理或精神障碍的案例,司法机关都要求进行司法鉴定,在此类鉴定中运用广泛的是临床法医学,当然也包括神经心理学.今就有关这方面的应用扼要叙述如下.
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PBL教学法在法医物证学实验教学中的运用
法医物证学具有较强实践性，不仅对学生理论知识要求较高，还需要其具备扎实的实践能力。实验教学方法在该学科教学中起到重要作用，随着教学改革步伐的加快，传统的教学方法已无法满足需求。因此对法医物证学实验教学方法进行创新，意义重大。PBL教学法能够培养学生创新思维及创新能力，提高学生解决实际问题的能力，在众多学科中被广泛应用，具有较高价值。
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免疫学方法确证人血痕的研究及应用现状
血痕检验是法医物证检验中常遇到和重要的项目.对血痕种属的鉴别是证据链的重要环节.血痕种属试验方法繁多,主流、使用范围广泛的仍是免疫学方法.本文对常用的免疫学血痕种属试验方法和原理进行了梳理,对其灵敏度、特异性和使用便捷性进行了分析比较,旨在为更好的研究、利用免疫学方法进行人血痕的确证提供参考.
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张家口地区汉族人群3个STR基因座的多态性调查
目的:调查D16S539、D7S820及D13S317三个STR基因座在张家口地区汉族人群的等位基因分布,获得相关群体遗传学参数.方法:用SilverⅢ Multipiex试剂盒复合扩增,聚丙烯凝胶电泳分型,银染显带.结果:108例汉族群体在3个基因座上均各检出7个等位基因,多态性分别为0.7314、0.7371、0.7635;个人识别率依次为0.8912、0.8948、0.9223,累计0.9986.结论:3个STR基因座在本地有较高的遗传多态性,在法医学及人类遗传学方面有较好的应用价值.
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微量接触DNA的浓缩与回收
目的 对纯化后的微量DNA进行进一步浓缩,提高DNA检验成功率.方法 将30 ml(约600pg)纯化后的微量DNA,分别采用Amicon离心超滤管和DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒进行浓缩回收,用Identifiler试剂盒进行PCR扩增及分型检测,比较STR分型图谱的平均峰高、峰面积和等位基因丢失率.检验24枚白纸上的汗潜指纹,比较浓缩前后的检验效果.结果 经过Amicon离心超滤管回收后,STR分型平均峰高85.3RFU,平均峰面积为1 130.8,等位基因丢失率为66.13％.经过DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒回收后,STR分型平均峰高147.5RFU,平均峰面积为1 960.2,等位基因丢失率为35.14％.汗潜指纹的DNA检验通过DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒纯化浓缩,获得有效分型的数量由浓缩前的9枚提高为20枚.结论 DNA Clean & ConcentratorTM-5试剂盒可以明显提高微量DNA检材的检验成功率,效果优于Amicon离心超滤管.对白纸上的指纹,DNA Clean&Concentrator TM-5试剂盒浓缩后检验成功率升高.
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案例教学法在法学专业法医物证学教学中的应用
法医物证学是就涉及法律问题的生物性检材进行检验，解决个人识别和亲权鉴定问题的法医学分支学科，是法医学研究的主要内容之一。由于法医物证学涉及医学、生物学、生物化学、分子生物学、免疫学、物理学、化学等多学科内容，而这些学科所涵盖的知识并不在法学专业学生掌握范围之内，因此在教学中难以提高学生学习的主动性。在传统讲授的基础上采用了案例教学法，发现案例教学法可有效激发学生的学习兴趣，培养思维能力，提高其创新能力、理论联系实际的能力，培养了学生分析问题、解决问题的能力，实现了学与用的结合。
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案例教学设计在法医物证学见习教学中的应用
法医物证学是一门实践性强的交叉学科,涉及应用医学、生物学、生物化学、分子生物学、免疫学、物理学、化学等多学科内容,见习生对此学科所具有的知识结构差异性较大,在教学中难以提高学生学习的主动性,要结合学生的专业特点,设计案例教学,创设良好的启发式与互动式教学环境进行因材施教,激发学生对法医物证学的学习兴趣,提高教学效果.
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浅谈法医物证学实验课教学改革
法医物证学是法医学的主要课程之一,像临床各科一样,是一门实践性较强的专业课.是应用多种学科的理论知识和技术研究并解决涉及法律方面有关的生物性检材的检验与鉴定的一门学科,为司法机关提供科学的证据.法医物证学检验应用的学科有医学、生物学、遗传学、免疫学、血清学、生物化学及分子生物学等,是一门多学科交叉的应用学科.这就使得物证实验教学具有其独创性和特殊性.为此,我们对法医物证学实验课的教学内容进行了改进.
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精斑试纸在水中高腐尸体应用失效1例
人精液(斑)确证试纸条(PSA)是针对男性前列腺上皮细胞分泌的一种特异性单链糖蛋白P30进行的定性检验,由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验.但在实际案件中,有时会出现精斑试纸条检测呈阴性结果,却检测到男性DNA的情况,现遇1例报道如下,旨在为法医学实践提供参考.
关键词： 法医物证学 磁珠法 高腐尸体 精子STR-DNA分型 -
滴落状血迹模拟实验在法医物证学教学中的应用研究
目的:探讨法医物证学教学改革,并观察9种不同介质上,高度、速度对滴落状血迹的形态和大小的影响,并应用于现场勘验.方法:采用抗凝人血,在静态和动态条件下,进行滴落状血迹的内模拟实验,观察血迹的形态,测量其直径,用SPSS12.0统计软件进行分析.结果:在静态条件下,滴落血迹,多呈圆形,其周围有毛刺状突起;7种介质上滴落血迹的大小(直径)与滴落高度呈线性关系,可得出回归方程.在运动条件下,滴落血迹为圆形或椭圆形,沿运动方向的一侧出现突起;高度、速度分别对血迹形态有影响,在水泥路面上两者有交互作用.结论:滴落状血迹模拟实验可以获得满意的检验和教学效果.
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PCR-SSCP技术分析线粒体DNA多态性及其法医学应用
目的 探讨SSCP法在线粒体DNA分析中的应用及其在法医实际检案中的意义.方法 利用PCR方法直接扩增D-LOOP区的HVI16106-16297区域192 bp片段作为目的片段,进行SSCP分型.检验150例随机个体、10例正常组织和5例甲醛固定石蜡包埋的组织.结果 在150例随机个体中,SSCP检测发现9种单倍型,DP值为0.881.在10例正常组织中,各个组织的SSCP带型完全相同.5例包埋组织的SSCP分型与对照组织一致.结论 SSCP技术分析线粒体DNA有较高的鉴别能力,适用于陈旧降解检材的检验.
关键词： 法医物证学 多态性 PCR-SSCP技术 甲醛固定石蜡包埋组织 -
X-STR侧翼序列SNPs在特殊亲缘关系及混合样品鉴定中的意义
目的 通过STR侧翼序列单核苷酸多态性(SNPs)的筛选,构建解决特殊亲缘关系及二人混合样品的个人识别鉴定的新方法.方法 筛选STR侧翼序列中的SNPs,对包含SNPs的片段进行扩增并测序获得其分型结果,设计序列特异性引物进行扩增并测序.结果 获得该STR位点不同来源个体的分型结果.结论 成功构建基于STR侧翼序列SNPs的二人混合样品的检测方法,并可应用于特殊的亲缘关系鉴定中.
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荧光标记LDR-PCR复合扩增方法对高度降解DNA检材的SNPs分型研究
目的 构建一套基于连接酶检测反应(LDR)的荧光标记PCR复合扩增体系,为解决高度降解DNA法医学分析提供新的策略.方法 选择8个单核苷酸多态性(SNPs)位点(rs10802248、rs10516197、rs10488372、rs2278945、rs4757318、rs4887255、rs4889002和rs9304473),设计合成各SNPs位点的LDR探针和连接产物PCR引物,通过LDR将连接产物进行PCR扩增,并将扩增产物进行毛细管凝胶电泳,构建复合扩增SNPs分型体系.结果 使用荧光标记LDR-PCR复合扩增方法,对不同个体的8个SNPs位点进行分型,分型结果与测序结果完全一致;对于甲醛固定石蜡包埋组织(FFPET)检材高度降解的DNA样品,荧光标记LDR-PCR复合扩增体系能够实现8个SNPs位点的准确分型.结论 荧光标记LDR-PCR复合扩增方法能够对8个SNPs位点进行一次性分型,结果准确、可靠,是一种简单、高效并且较为实用的SNPs分型新方法,适用于高度降解检材的检测.
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不同亲子鉴定试剂盒对D7S820基因座稀有等位基因检测结果比较
目的:观察分析用不同亲子鉴定试剂盒对D7S820基因座稀有等位基因检测结果的差异.方法:280名不同个体的血样DNA提取和基因型检测,按中华人民共和国公共安全行业标准GA/T382-2002和GA/T383-2002进行;分别用Identifiler试剂盒(美国AB公司)、PowerPlex(R) 18Dsystem试剂盒(美国普洛麦格公司)、GoldeneyeTM20A试剂盒(北京基点认知技术有限公司),经PCR复合扩增STR基因座,用AB公司DNA序列分析仪电泳分离扩增产物和激光扫描分析.结果:检测到280名不同个体的常用常染色体STR基因座的等位基因.其中六份样本在D7S820基因座上,Identifiler试剂盒检测的基因型与PowerPlex(R) 18D-system和GoldeneyeTM20A试剂盒检测的基因型结果有差异.结论:不同厂家生产的试剂盒检测常用常染色体D7S820基因座的稀有等位基因存在有一定误差.
关键词： 法医物证学 PCR扩增试剂盒 D7S820稀有等位基因 -
9个miniSTR基因座在西藏藏族人群中的遗传多态性
目的:对西藏藏族人群的9个miniSTR基因座(D20S1082、D6S474、D12 ATA 63、D9S1122、D2S1776、D1S1627、D3S4529、D2S441、Amelogenin)进行多态性研究.方法:用Chelex-100法提取西藏藏族人群96份无关个体血液样本DNA,在Mastercylcer(R)pro梯度PCR仪上对9个miniSTR基因座进行扩增,运用3130基因分型仪检测并收集电泳结果,通过GeneMarkerV 2.2.0软件计算扩增产物片段相对大小以及进行样本基因型分型.结果:9个miniSTR基因座(D20S1082、D6S474、D12 ATA 63、D9S1122、D2S1776、D1S1627、D3S4529、D2S441、Amelogenin)检出等位基因分别为5、5、6、7、6、4、5、6、2,均符合Hardy-Weinberg平衡,杂合度在0.531～0.742之间,累计个人识别率为0.999 998,累计非父排除率为0.984 083.结论:该9个miniSTR基因座在西藏藏族人群中的多态性较好,个体识别率高,可应用于个体识别和亲权鉴定.
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甘肃蒙古族人群15个短串联重复序列基因座遗传多态性
目的:调查甘肃蒙古族人群无关个体的15个短串联重复序列(STR)基因座(D8S1179,D21S11,D7S820,CSF1P0,D3S1358,D5S818,D13S317,D16S539,D2S1338,D19S433,vWA,D12S391,D18S51,D6S1043,FGA)的遗传多态性.方法:采用AmpFeSTR Sinofiler荧光标记复合扩增系统对198名甘肃肃北地区蒙古族个体血样DNA进行15个STR基因座的复合扩增,用3130 xl遗传分析仪对扩增产物进行检测.结果:15个STR基因座均符合Hardy-Weinberg平衡,杂合度在0.707 1～0.873 7之间,累积个人识别概率和累积非父排除率分别为0.999 999 3和0.999 999 997.结论:上述15个STR基因座在甘肃蒙古族人群中等位基因分布较好,个体识别率高,适合法医个体识别和亲子鉴定.
关键词： 法医物证学 遗传多态性 短串联重复序列基因座 蒙古族 甘肃 -
肺癌组织中STR基因座变异规律的研究
背景与目的:在DNA水平进行个体同一认定及亲缘鉴定,是目前获得准确结论的直接的方法,而短串联重复序列(short tandem repeat,STR)复合扩增荧光检测技术是目前应用广泛的DNA技术.但已有研究表明STR基因座在肿瘤组织中会发生明显高于正常组织或血液的变异.该研究的目的为探索20个常染色体STR基因座及Amel基因座在人肺癌组织中的变异规律,为肺癌组织的个人识别及亲缘鉴定提供依据.方法:收集75例人肺癌组织和相对应的癌旁正常组织,采用组织DNA提取试剂盒提取DNA,MicroreaderTM 21 Direct ID System试剂盒进行PCR扩增,采用3130序列分析仪进行毛细管电泳,用Gene Mapper ID V3.2基因分析软件进行基因分型.结果:75例癌组织中有24例发生了STR位点的变异(32%),在21个常用STR基因座上共检出55次变异,其中等位基因增加10次,杂合性等位基因完全丢失10次,部分性丢失35次.D2S441、Penta E基因座未检出变异.结合目前实验结果与肺癌患者的临床资料分析,发现STR位点的变异与肺癌的分型、患者性别无联系(P>0.05),与肺癌的分期及患者年龄正相关,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:肺癌组织中STR基因座较常发生变异,并且变异更可能在年龄大、恶性程度高的肺癌中发生;该实验检出D2S441、Penta E基因座无变异,在今后的研究中可加大样本量,进一步验证可否将其纳入稳定的STR基因座,为肿瘤组织等特殊检材的鉴定提供依据.
