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肿瘤抗原和肿瘤疫苗的研究
提取肿瘤细胞的表面抗原及各种抗原间结构的比较将成为今后研究的热点.理想的肿瘤疫苗很可能包括多个肿瘤特异性抗原和/或多个肿瘤非特异性抗原.对肿瘤抗原的研究不仅对免疫应答的机制和肿瘤免疫逃避机制具有重要的理论意义,而且对肿瘤的发病学、诊断、治疗及疫苗的制备也具有重要的应用意义.寻找肿瘤抗原的方法可分为3类:(1)基因工程制备抗原.经典的技术有基因工程与抗体技术和基因工程与T细胞克隆技术两种.(2)天然抗原的提取与纯化.根据MHC-Ⅰ类分子-肽复合物表达于肿瘤细胞表面这一现象,膜结合蛋白的纯化就显得尤为重要.(3)合成肽抗原的制备.另外,各种肿瘤疫苗均有一定效果,但其抗原性仍不理想.理想的肿瘤疫苗应有多向作用靶点.
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视网膜发育中的神经干细胞
视网膜作为脑组织的延伸,存在大量神经干细胞,在内外源性因子机制及各基因调节机制作用下,增殖分化为视网膜各型神经元及神经胶质细胞.应用无血清培养及单细胞克隆技术可分离培养出特异性表达nentin的视网膜干细胞.由于视网膜干细胞具备自我更新能力及多分化潜能,有望用于退行性神经疾病如:视网膜色素变性、老年黄斑变性、晚期青光眼等的细胞替代治疗或药物、基因治疗的载体.
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肿瘤细胞免疫治疗研究的现状与对策
在过去的十几年中,随着抗原递呈机制与T细胞对特异性抗原识别机制的揭示、众多重要的人细胞因子及其功能的发现和分子克隆与细胞克隆技术的发展,使肿瘤抗原的鉴定与应用成为现实,促使体外定向诱导和扩增免疫细胞成为可能,所有这些进步推动肿瘤细胞免疫学研究及其临床应用成为肿瘤治疗研究中开展广泛、深入的领域之一.现将近年有关肿瘤的细胞免疫治疗临床应用研究状况、问题和对策作一综述.
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达克宁在细胞克隆技术中的应用
能否有效地控制分泌特异性单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞的污染,是该项研究中常遇到的问题,由于细菌耐药性的产生,传统应用双抗处理的方法多难于奏效.在杂交瘤细胞融合培养过程中,有时会发生真菌污染的现象.为防止和清除真菌污染,除了严格控制操作,还可采用小鼠腹腔和使用抗真菌药物的方法.目前,国内抗真菌药物如制霉菌素对杂交瘤细胞的毒性较大,抑制真菌效果不理想.我们在实验研究过程中使用达克宁注射液(有效成份为咪康唑)挽救意外污染了真菌的杂交瘤细胞,取得了良好的效果.
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胚胎干细胞及其应用前景
人类正常胚胎发育过程是按严格的时空程序进行一系列细胞之间、核质之间相互作用的结果.从全能或多能胚胎干细胞分化为具有独特功能的体细胞,主要取决于哪些基因被激活和在什么时间与位点被激活.细胞环境中的各种因子的类型和浓度则是基因选择性激活的重要因素.因此,细胞分化是部分基因选择性的被激活或差异性表达,从而控制转移性蛋白质的合成和排布的结果,从20世纪60年代开始,人们一直在致力于寻找一个既能在体外增殖,又具有胚胎细胞全能性或多能性的,并通过适当条件诱导分化为各种类型的分化细胞的实验模型.经过各国科学家40余年不懈的努力,从小鼠胚胎性癌细胞(embryomal carcinoma cell,简称EC细胞)到人胚胎干细胞(embryonic stem cell,简称ES细胞)和胚胎生殖细胞(embryonic germ cell,简称EG细胞)先后建系成功,对哺乳动物发育和细胞分化研究起着巨大的推动作用,特别是为临床细胞治疗和组织工程开辟了良好的前景[1~3].本文对其应用前景综述如下.
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单细胞显微操作法克隆技术
普通和特殊单克隆细胞株(系)的选择与培育日益重要、广泛和普及.探索不用特殊设备、操作简单、高效并适合任意批量单克隆细胞株(系)的选育技术将有利于这一重要而繁重工作的简化和推广.在实验中作者曾试过多种细胞克隆技术[1].为了简化技术模式,争取一次性准确获得欲选育量的可靠单克隆细胞株(系)并节省耗材,提高效率,减轻工作量,作者探索了仅利用细胞培养室常规配置设备进行的单细胞显微操作法克隆技术.
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培养方法对神经干细胞克隆形成的影响
目前,在干细胞培养方面虽然建立了不少培养体系[2],但干细胞的克隆化培养纯化培养方面的研究资料还较少.干细胞克隆化培养的研究是进一步研究干细胞的重要一步.神经干细胞克隆技术为建立干细胞脑组织库奠定了实验基础,为临床治疗神经系统疾病提供了理论和实践依据.