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灭蚊真菌-贵阳腐霉Pythium sp.GY1938菌株cDNA文库的构建及鉴定
目的 构建灭蚊真菌-贵阳腐霉Pythiumsp.GY1938菌株cDNA文库,为进一步筛选和克隆GY1938菌株特异表达基因奠定基础. 方法 以GY1938菌丝体为材料,液氮研磨法制备总RNA并分离纯化mRNA,应用SMAR-Ter技术将LD-PCR法合成并分级纯化的dscDNA连接至pSMART2IFD载体,电穿孔法转化至大肠埃希菌HST08,构建GY1938菌株cDNA文库,进行滴度、重组率和重组片段大小等文库质量检测. 结果 检测GY1938菌株cDNA文库滴度达1.36×106 cfu/ml,重组率为98％,插入片段长度约为300～2 500 bp. 结论 成功构建了较为理想的贵阳腐霉GY1938菌株cDNA文库,该文库可用于新基因的筛选、克隆和功能研究.
