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食品安全问题形势下食品检测的发展趋势
随着收入和生活水平的提升,人们对于食品安全的关注程度原来越高,而且近年来发生的重大食品安全事件也在一定程度上提升了消费者对于食品安全的重视程度.本文从我国食品安全问题分析入手,重点研究了免疫学检测、基因芯片检测等先进食品检测技术,对于未来一段时期内食品检测的发展有一定的指导意义.
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国内外李斯特菌检测及其快检技术的发展
本文比较分析了国内外李斯特菌的检测方法、不同标准限量值的差异,并介绍了国内外李斯特菌快速检测技术的应用及存在的问题,对我国微生物快速检测的现状进行了概述,探讨了李斯特菌快速检测技术的未来发展方向,对李斯特菌检验方法探索及快速检测技术的发展具有一定的借鉴意义。
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苏丹红Ⅰ人工抗原的合成
目的 建立苏丹红I(Sudan I)免疫学检测方法,制备具有免疫原性的苏丹红1人工抗原.方法 采用琥珀酸酐法合成苏丹红I的衍生物苏丹红I-半琥珀酸酯(苏丹红I-HS),在此基础上,采用活性酯法将苏丹红I-HS分别与生血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备得到苏丹红I-HS-BSA和苏丹红I-HS-OVA.结果 采用红外光谱、液质联用对苏丹红I-HS进行分析和鉴定表明合成成功,并用紫外光谱法测定苏丹红I与BSA和OVA偶联比分别为11:1和5:1.结论 苏丹红1人工抗原合成成功.
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结核病免疫学诊断进展
结核病细菌学检查虽是结核病诊断的金标准,但是由于涂片阳性率较低,培养又需时太久,因此细菌学检查对结核病的诊断价值有限.免疫学检测简便、快速,又有较高的敏感性和特异性,对结核病的诊断与鉴别具有重要参考价值[1].近年来结核病免疫学诊断研究进展很快,本文就此内容综述如下:
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沙门菌实验室检测技术研究进展
自从1885年分离出沙门菌后,对沙门菌的检验普遍采用传统培养方法,其检验结果需4~7天,该综述描述了沙门菌检测领域的研究进展,从各种免疫学检测方法到各种分子生物学的检测方法的发展过程,直到近几年新出现的环介导等温扩增(LAMP)技术检测沙门菌.反映了人类在检测沙门菌方面进行了不断的创新,一直在追求一种简单、快速的检测方法.
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HBV-DNA荧光定量与血清标志物和GPT检测的相关性探讨
目C区PCR检测HBV-DNA与乙型肝炎病毒血清标志物(两对半)和谷丙转氨酶检测的相关性.方法 用ELISA方法 检测HBV感染者乙肝免疫学检测,用PCR方法 检测HBV-DNA,并对结果 进行分析.结果 大三阳组标本,HBV-DNA阳性率达到97.7%,与文献报道有些出入[1];小三阳组标本,HBV-DNA阳性率为69.4%,与文献报道基本一致[2];HBsAg(+)、HBeAg(+)组标本,HBV-DNA阳性率为90.6%;HBsAg(+)、HBcAb(+)组标本,HBV-DNA阳性率为71.4%;HBsAg(-)、HBeAg(-),HBV-DNA阳性率为4.5%,与文献报道基本一致[3].HBV-DNA阳性患者中,转氨酶异常者占65.5%,HBV-DNA阴性患者中,谷丙转氨酶异常者占26.1%.结论 HBV-DNA荧光定量PCR检测在临床上对乙型肝炎基因诊断,特别是进行抗病毒治疗和治疗监测方面均优于HBV血清学标志物.
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自身抗体的免疫学检测对系统性红斑狼疮的诊断意义
系统性红斑狼疮(SLE)是一个累及多系统多器官,临床表现复杂,病程迁延反复的自身免疫性疾病.由于病人症状多变,早期表现缺乏特异性,较易误诊.近年来,免疫学检测技术逐步发展,对患者自身抗体的检测有助于SLE的早期诊断和治疗.本文对患者进行抗双链DNA(ds-DNA)、抗ENA(主要为抗Sm)和抗核抗体(ANA)等自身抗体的免疫学检测,以探讨对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断意义.
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病毒样颗粒技术的研究进展
病毒样颗粒(Virus-like Particles,VLPs)为不含病毒基因组的空壳或包膜状颗粒结构,与天然病毒颗粒结构相似.VLPs技术在病毒的组装与形态多样性等基础研究中发挥了重要作用.VLPs作为疫苗,可有效诱导机体产生免疫反应.VLPs具有独特的免疫学特性,不但能通过影响抗原递呈细胞发挥佐剂效应,还可以作为其它佐剂、多肽疫苗和核酸疫苗的整合平台设计多种形式的疫苗.在适宜条件下,VLPs可以包裹核酸或其它小分子物质,因此可以作为分子运载工具靶向性地递送基因或药物.VLPs还可以替代天然病毒在免疫学检测中发挥重要作用.
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囊虫病免疫诊断的研究进展
囊虫的诊断除皮肌型患者可采取皮下结节检查确诊外,单纯脑型患者的诊断常根据临床症状、影像学诊断和免疫学检测的结果进行综合判断获得,当临床症状、影像学指标不典型及疾病早期时,诊断往往有一定的困难.免疫学诊断弥补了临床诊断及影像学诊断的不足,具有重要的临床价值.近年来国内外学者对囊虫病的免疫诊断进行了大量的研究工作.诊断试剂的不断更新,免疫检测手段的换代,使得该领域的研究不断推陈出新,在抗原分析与研究方面已日益扩展到了异种抗原、纯化抗原、基因重组抗原等领域;在检测技术上亦从简单的凝集试验涉及到了免疫标记、酶联免疫印渍、杂交瘤制备、DNA重组技术等领域.现将国内外有关研究近况综述如下.
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儿童呼吸道感染者肺炎支原体、肺炎衣原体特异性抗体检测临床意义探讨
目的 对支原体肺炎的病毒感染情况进行分析,进一步探讨临床免疫学检测和免疫检验方法在临床中的价值.方法 取我院在2011年4月-2012年12月收治的429例肺炎患者分别采用被动凝集法和间接酶联法对其支原体进行体外培养,进行病毒病原学检测.结果 检验结果显示阳性率为53.1%,病毒呈阳性患者227例,肺炎支原体检出率达到15%,阳性患者为64例.结论 临床免疫学检测和免疫检验方法能够及时的为临床提供相应资料,为流行病提供可靠的病原学参考依据.
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细胞因子诱导杀伤细胞治疗肿瘤的临床免疫学评价体系
细胞治疗作为抗肿瘤的新型模式已在临床广泛开展.细胞因子诱导杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞具有较强增殖、杀伤和提高机体免疫反应的作用,其治疗技术成为细胞治疗领域的先导.CIK 细胞临床应用研究的进一步深入迫切需要一套综合、系统的临床评价体系.临床免疫学检测对于CIK 细胞治疗技术的改进和完善具有重要的指导意义,也为客观评估这一技术的有效性和安全性以及制定医疗规范标准提供必要的参考依据.恶性肿瘤升为人类第一死亡原因,寻找有效的抗肿瘤疗法是当前临床研究的重要课题.
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严重急性呼吸综合征冠状病毒多肽抗原筛选的研究
严重急性呼吸综合征(SARS)可从SARS病人分泌物中分离出SARS冠状病毒(SARS-CoV).目前检测SARS-CoV方法有三类[1]:分子生物学检测、免疫学检测(抗体检测)和细胞分离培养.本研究用克隆表达的SARS-CoV的各种蛋白,以重组抗原片段检测病人血清中对应抗体,并通过试验筛选出SARS-CoV表面有效性多肽抗原,进行临床研究.
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病毒样颗粒疫苗的研究进展及其在传染病防控中的应用前景
病毒样颗粒( VLPs)是由一种或多种病毒结构蛋白组装成的颗粒,具有与病毒颗粒相似的外部结构和抗原性,但不含病毒基因。可采用酵母、哺乳动物细胞、植物细胞、昆虫细胞和细菌系统表达VLPs抗原。 VLPs作为疫苗,可有效诱导机体产生免疫反应。可以作为其他佐剂、多肽疫苗的整合平台设计嵌合体疫苗。本文就病毒样颗粒国内外研究进展及其在传染病防控中的应用前景进行综述。(中华检验医学杂志,2014,37:739-742)
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人抗鼠抗体效应对临床免疫学检测的影响
人抗动物抗体产生的原因为医源性与非医源性因素.医源性因素包括动物源性蛋白、胸腺肽、靶抗体造影剂、靶抗体药物、被动免疫动物血制品(如破伤风针、胰岛素、凝血因子Ⅷ)等;非医源性因素包括母婴传递、偶然或职业性原因与动物蛋白接触史(如兽医、牧区、食品加工人员、宠物饲养)、选择性IgA缺乏症患者食人牛奶及动物蛋白食品等.
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胶体金法检测妇科肿瘤患者高浓度HCG所致钩状效应的解决方案
钩状效应是影响定性和定免疫学检测准确性的一种现象,常导致检测结果呈假低值和假阴性的错误[1-2].高浓度HCG由于钩状效应易使定量检测结果偏低.我们发现3例滋养层细胞疾病患者的HCG浓度超过200 000 U/L,用化学发光免疫分析时结果严重偏低,现报告如下.
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我国病毒性肝炎病原学诊断的发展和展望
我国是病毒性肝炎的高流行区.自建国以来,我们对病毒性肝炎的诊断、预防和治疗水平有了很大的提高,免疫学检测的发展为之做出了巨大的贡献.在"六五"至"九五"期间,我国根据国内外对病毒性肝炎病原学和检测技术的进展,依靠联合攻关,完成了一系列先进试剂的研制,有些达到了与发达国家同步的水平.
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应用重组抗原诊断弓形虫病的研究进展
随着分子生物学的发展,对弓形虫重组抗原的研究取得了一系列的进展,多种弓形虫抗原基因通过基因工程手段得以表达并应用于弓形虫防治研究,这些抗原包括膜表面抗原(surface antigen,SAGs)、致密颗粒蛋白(dense granule proteins, GRAs)、棒状颗粒蛋白(rhoptry proteins,ROPs)、微线体蛋白(microneme proteins,MICs)以及基质抗原等[1]。重组抗原在弓形虫病诊断方面的研究一直存在两个方面,一方面是针对每一种抗原进行单独研究以确定其免疫特性,是筛选高效诊断抗原的主要途径,同时对于弓形虫感染机制等方面的研究也有重要意义;另一方面是针对复合抗原的研究以期望克服单一抗原在免疫诊断中的不足,优化得到佳的抗原组合,达到佳的诊断结果。当前人们对于弓形虫重组抗原的研究主要集中于两个方向,一是利用抗原性进行弓形虫免疫学检测,二是利用免疫原性用作疫苗进行免疫保护,本文就弓形虫重组抗原在弓形虫免疫诊断中的新研究进展做一综述。
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抗乙型肝炎病毒治疗中病毒载量的动力学特点
病毒载量动力学的检测被越来越广泛地用来预测抗病毒药物的治疗效果,先前的免疫学检测受很多因素的影响,已不能正确反应病毒的复制.而病毒载量定量检测可使人们能够比较清楚地了解病毒在体内的变化情况,弥补了免疫学方面的不足.通过对病毒动力学的研究可以使我们了解病毒在清除过程中的特点,从而用于指导临床来评估药物疗效,以及针对不同的患者设计合理的治疗方案.
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噬菌体表面展示技术筛选HCBP6人源单链可变区抗体
目的:制备丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的肝细胞结合蛋白6(HCBP6)的特异性人源化单链可变区抗体(scFv).方法:采用噬菌体表面展示技术,将生物合成的应用酵母双杂交技术筛选得到的HCV核心蛋白的肝细胞结合蛋白6(HCBP6)16肽固相包被于Nunc板,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮"黏附-洗脱-扩增"筛选过程,随机挑选出48个克隆,利用酶联免疫黏附法(ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验,对其进行免疫学检测,获得与HCBP6结合活性较强的单链可变区抗体片段的阳性克隆,并对HCBP6特异性scFv的编码序列进行序列测定分析.结果:对噬菌体单链可变区抗体库经过5轮"黏附-洗脱-扩增"的筛选后,结合到包被平皿的噬菌体与第一轮相比,富集了162倍.用酶联免疫黏附法测定第5轮筛选后上清液中含有的噬菌体抗体与HCBP6结合活性.其中有30株克隆ELISA的吸光度(A450 nm)值较高(P8 nm 0.77,P240.714,P26 0.728,P29 0.723,P38 0.803,P39 0.762,P43 0.747等).对这些噬菌体抗体进行与牛血清白蛋白(BSA)的交叉反应后,确定其中有7株交叉反应较弱(P80.145,P24 0.119,P26 0.17,P29 0.186,P38 0.118,P39 0.138,P43 0.178),结合2次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果,后确定1株(P24)阳性克隆.提取质粒,SfiI/NotI双酶切后,将片段亚克隆到pCANTAB5E载体,进行DNA序列测定,DNA大小为771 bp,符合人源化单链可变区抗体典型的骨架区(FR)及互补决定区(CDR)的序列结构.结论:用噬菌体抗体库技术能够成功地获得HCBP6的scFv.
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丙型肝炎病毒包膜蛋白E2抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定
目的:制备抗丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E2(E2)的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗-Id scFv),为研制HCV E2的抗-Id scFv疫苗奠定基础.方法:采用噬菌体表面展示技术,将抗HCV E2单克隆抗体固相包被于Nunc板,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮"黏附-洗脱-扩增"筛选过程,随机挑选出53个克隆,利用酶联免疫黏附法、交叉反应和竞争抑制实验,对其进行免疫学检测,获得与HCV E2单克隆抗体结合活性较强的抗独特型抗体单链可变区片段(抗-IdscFv)的阳性克隆,并对HCV E2特异性抗-Id scFv的编码序列进行序列测定分析.结果:对噬菌体单链可变区抗体库经过5轮"黏附-洗脱-扩增"的筛选后,结合到包被平皿的噬菌体与第一轮相比,富集了12倍.用酶联免疫黏附实验(ELISA)方法测定第五轮筛选后上清液中含有的抗-Id scFv与HCV E2单克隆抗体结合活性.其中有18株克隆ELISA的吸光度(A450 nm)值较高(E11 A450 nm 0.928,E14 A450 nm 1.152,E17 A450 nm 1.136,E28 A450 nm 1.163,E53 A450 nm0.965).对这些噬菌体抗体进行与牛血清白蛋白(BSA)的交叉反应后,确定其中有5株交叉反应较弱(E11 A450nm 0.044,E14 A450 nm 0.062,E17 A450 nm 0.166,E28 A450nm 0.012,E53 A450 nm 0.069),结合2次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果,后确定1株(E28)阳性克隆提取质粒,进行DNA序列测定,DNA大小为768bp.结论:用噬菌体抗体库技术能够成功地获得单抗HCV E2的抗-Id scFv,本实验结果为开展用抗-Id scFv防治丙型肝炎的研究创造了条件.