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血吸虫、绦虫抗原的研究进展
血吸虫、绦虫是重要的寄生蠕虫,呈全球性分布.此类寄生虫宿主繁多,分布广泛,且抗原成分复杂,交叉反应多,给诊断、预防带来了很大的困难.随着免疫学的发展及基因重组技术和噬菌体肽呈现技术的出现,人们期望通过血清学诊断和研制疫苗解决寄生蠕虫病的诊断和预防问题,并取得了很大的进展.蠕虫抗原按其来源或制备途径分为:天然抗原、基因重组抗原、噬菌体肽库技术模拟抗原.现对血吸虫和绦虫抗原的研究进展综述如下.
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囊虫病免疫诊断的研究进展
囊虫的诊断除皮肌型患者可采取皮下结节检查确诊外,单纯脑型患者的诊断常根据临床症状、影像学诊断和免疫学检测的结果进行综合判断获得,当临床症状、影像学指标不典型及疾病早期时,诊断往往有一定的困难.免疫学诊断弥补了临床诊断及影像学诊断的不足,具有重要的临床价值.近年来国内外学者对囊虫病的免疫诊断进行了大量的研究工作.诊断试剂的不断更新,免疫检测手段的换代,使得该领域的研究不断推陈出新,在抗原分析与研究方面已日益扩展到了异种抗原、纯化抗原、基因重组抗原等领域;在检测技术上亦从简单的凝集试验涉及到了免疫标记、酶联免疫印渍、杂交瘤制备、DNA重组技术等领域.现将国内外有关研究近况综述如下.
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幽门螺杆菌粘附素基因babA2的克隆及免疫应答的初步研究
目前,幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)疫苗的研制仍处在抗原的筛选阶段,已经评价的基因重组抗原基本上是着眼于阻断Hp的毒力因素,而与Hp定植密切相关的粘附素评价较少.babA是迄今为止唯一明确受体的Hp粘附素,研究表明babA基因存在两个等位基因:babA1和babA2,其中只有babA2具备与Leb结合的功能[1].本实验对babA2基因进行了克隆和表达并研究了其免疫反应.
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梅毒螺旋体基因重组抗原酶联免疫吸附实验的探讨
梅毒是由苍白螺旋体(T.pallidum)感染引起的一种严重危害人类健康的性传染性疾病.血清学非特异性试验是目前诊断梅毒的主要方法,例如快速血浆反应素实验(RPR),不加热血清反应素实验(USR);应用梅毒螺旋体抗原检测梅毒患者体内的特异性抗体,已被用于确诊梅毒感染,例如荧光螺旋体抗体吸收试验(FAT-ABS),梅毒螺旋体血凝实验(TPHA)等,但使用的均为全抗原,由于可能存在的非特异性交叉反应,使上述方法受到一定的限制.
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不同梅毒螺旋体基因重组抗原酶联免疫试验比较
目的对单一梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp17及联合应用3种基因重组抗原(Tp47、Tp42和Tp17)酶联免疫试验(enzyme immunoassay,EIA)进行比较.方法分别用3种单一Tp基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp17EIA法,检测11份梅毒血凝试验Tp抗体阳性和28份阴性血清,并与联合应用3种基因重组抗原(Tp47、Tp42和Tp17)EIA法比较.结果单一基因重组抗原Tp47、Tp42或Tp17 EIA法的灵敏度分别为100%(11/11)、100%(11/11)和90.9%(10/11),特异度分别为96.4%(27/28)、100%(28/28)和96.4%(27/28);联合应用3种基因重组抗原EIA法的灵敏度和特异度分别为100%(11/11)和100%(28/28).结论单一Tp基因重组抗原EIA法用于梅毒诊断存在一定的假阳性和假阴性反应,联合应用3种基因重组抗原(Tp47、Tp42和Tp17)EIA法的灵敏度高于单一Tp基因重组抗原EIA法.
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重组血吸虫诊断抗原研究进展
免疫学方法为诊断血吸虫病的重要手段,目前,用于血吸虫病免疫诊断的常用的抗原是成虫抗原和虫卵抗原.成虫抗原和虫卵抗原成分复杂,针对两种抗原的血清抗体在宿主体内长期存在,不能区别早期感染和既往感染,不能考核疗效,并且这两种抗原不易大量获得.现代生物技术的发展为解决上述问题提供了机遇.基因克隆技术能够帮助寻找刺激宿主产生短程抗体的某些抗原表位,通过检测短程抗体来评价治疗效果.同时依靠基因重组技术可以生产出相应的重组抗原分子,为现场推广应用所需大量的抗原材料提供了保证.本文主要就国内外研制基因重组抗原及其在血吸虫病诊断中的应用加以综述.
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旋毛虫重组抗原的体外表达及其影响因素
旋毛形线虫(Trichinella spiralis)简称旋毛虫,成虫和幼虫分别寄生于同一宿主的小肠和肌肉内.由旋毛虫引起的旋毛虫病(trichinellosis)是一种人兽共患寄生虫病,目前在我国及其他国家仍有爆发流行.由于旋毛虫病的病原学诊断比较困难,免疫诊断则显得尤为重要.但旋毛虫虫体抗原成份复杂,用于免疫诊断时常和其它寄生虫病发生交叉反应而出现假阳性.随着分子生物学技术的发展,基因重组抗原具有可大量制备,特异性好等优点而越来越受到了人们的重视[1-3].然而,表达载体的种类、目的基因的长度及诱导剂等诸多因素均可影响重组抗原的表达.
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基因重组抗原在旋毛虫病免疫诊断及免疫预防方面的研究
旋毛虫病是一种严重的人兽共患寄生虫病.若不及时诊断和治疗,患者死亡率可高达3%~30%,但本病目前尚无满意的诊断和预防方法.由于目前用于旋毛虫病免疫诊断的抗原多为虫体粗抗原,因其抗原成份复杂,常和其它寄生虫病发生交叉反应而出现假阳性;旋毛虫不能在体外完成完整的生活史,一般采用人工感染动物的方法获得虫体,然后制备抗原,这种经典方法大的弊端在于实验条件难以统一,制备抗原难以标准化,从而导致不同实验室、不同批次的抗原质量不同.