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补肾壮骨颗粒对兔膝骨性关节炎白介素-1和肿瘤坏死因子的影响
目的 观察补肾壮骨颗粒对兔膝骨性关节炎中自介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF)表达水平的影响,探讨其治疗骨性关节炎的机制.方法 将50只兔随机分为4组,即补肾壮骨颗粒组20只、塞来昔布组20只、空白对照组5只、正常组5只,采用Hulth法造成骨关节炎的病理模型,以补肾壮骨颗粒浓缩液喂食饲养,于治疗后3、6周分别抽取关节液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),分别测定兔膝关节液中IL-1及TNF表达水平.结果 治疗后3周,膝关节液中印可明显检测到IL-1及TNF的表达,各治疗组数值与对照组比较均见下降,3、6周时下降差异有统计学意义.结论 补肾壮骨颗粒能降低骨性关节炎中IL-1及TNF的表达水平.补肾壮骨颗粒可能通过影响IL-1及TNF等细胞因子面对骨性关节炎起到治疗作用.
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补肾壮骨颗粒对去势骨质疏松大鼠血脂代谢指标的影响
目的 探讨补肾壮骨颗粒对去势骨质疏松大鼠血脂代谢指标的影响.方法 30只7月龄SD雌性大鼠随机分成对照组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组、福善美组.治疗8周后,分别收集左侧股骨和血清的骨矿含量、骨密度和血脂代谢指标检测.结果 模型组的骨矿含量和骨密度低于对照组(P＜0.05);对照组、中药高剂量组与福善美组骨密度高于模型组和中药低剂量组(P＜0.05),而对照组、中药高剂量组与福善美组之间比较差异无统计学意义.模型组甘油三酯(TG)、胆固醇(CH)高于对照组(P＜0.05),高密度脂蛋白(HDL)低于对照组(P＜0.05).中药高剂量组甘油三酯低于模型组(P＜0.05),而模型组、中药低剂量组与福善美组之间比较差异无统计学意义.中药高剂量组高密度脂蛋白高于模型组、中药低剂量组与福善美组(P＜0.05).结论 去势大鼠存在血脂代谢异常,补肾壮骨颗粒可改善血脂代谢异常状态,有一定的预防作用,提高骨矿含量和骨密度.
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补肾壮骨颗粒对骨质疏松大鼠骨组织计量学的影响
目的 观察补肾壮骨颗粒对骨质疏松症雄性与雌性大鼠的骨组织计量学的影响,探讨该药对不同性别大鼠骨质疏松症疗效差异的机制.方法 雄性大鼠54只,雌性大鼠58只,各设假手术组、模型组、阳性药组及补肾壮骨颗粒高、低剂量组.采用去势方法造成大鼠骨质疏松模型.给药13周,观察不同性别各组大鼠骨组织计量学指标的变化.结果 与模型组比较,补肾壮骨颗粒高剂量组雌性大鼠骨小梁面积百分比有增加趋势(P＞0.05),骨小梁数目明显增加(P＜0.05),分离度明显减少(P＜0.05);而高剂量组雄性大鼠各指标均未见明显改变(P＞0.05).结论 补肾壮骨颗粒可改善去势造成的骨质疏松雌性大鼠模型的骨组织计量学指标,对雄性大鼠则无明显作用.
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在有氧运动的基础上服用补肾壮骨颗粒对改善去势大鼠骨质疏松症病情的协同效果
目的 探讨有氧运动与补肾壮骨颗粒综合疗法治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的疗效及机理,为有效防治PMOP提供理论依据.方法 采用去势大鼠模型,分为假手术组(n=10)、模型组(n=10)、阳性组(n=10)、有氧运动组(n=10)、补肾壮骨颗粒组(n=10)和联合组(n=10),去势后2 w运用有氧运动、补肾壮骨颗粒以及二者联合等干预方法防治大鼠发生的骨质疏松.连续12 w检测各组大鼠骨组织生物力学,同时采用实时荧光定量PCR技术检测骨代谢相关指标表达.结果 与假手术组相比,模型组大鼠的左股骨大负荷、左胫骨大负荷和第四腰椎结构强度均显著降低(P＜0.05).与模型组相比,阳性组、有氧运动组、补肾壮骨颗粒组和联合组的左股骨大负荷、左胫骨大负荷和第四腰椎结构强度均显著提高(P＜0.05).荧光定量PCR结果显示,与模型组相比,阳性组、有氧运动组、补肾壮骨颗粒组和联合组的RANKL和OPG均显著提高(P＜0.05),而RANKL/OPG显著降低(P＜0.05).与阳性组相比,联合干预组的RANKL和OPG均显著提高(P＜0.05),而RANKL/OPG显著降低(P＜0.05).结论 补肾壮骨颗粒和运动的综合性治疗策略能通过降低骨组织中OPG/RANKL比值,进而抑制破骨细胞的活性来改善去势大鼠骨质疏松症病情,其疗效要优于单纯运动及补肾壮骨颗粒.
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补肾壮骨颗粒对SAMP6小鼠股骨宏观结构及生物力学的影响
目的 研究中药复方补肾壮骨颗粒对SAMP6小鼠股骨结构及生物力学性能的影响,并探讨是否有可能替代生长激素对老年男性骨质疏松进行治疗.方法 将30只3月龄SAMP6小鼠随机均分为模型组、生长激素组和中药组,选取10只正常老化小鼠(SAMR1)作为同源对照组.正常饲养1周后,生长激素组和中药组小鼠开始给药,每周称重1次,调整给药剂量,正常组和模型组给予等量的生理盐水.3个月后每组随机选取5只小鼠去眼球取血处死,取其左侧股骨,进行测定股骨的骨量、几何尺寸、骨截面力学几何量和生物力学性能实验,6个月后采取同样的方法处理剩余的小鼠.结果 与模型组比较,3个月后用药组骨量均降低(P＞0.05),6个月后均升高(P＞0.05),且中药组均比同期生长激素组骨量高(P＞0.05);3个月后中药组SAMP6小鼠皮质骨厚度、截面积增大(P＜0.05),骨髓腔直径、横截面积减小(P＜0.05),骨截面力学几何量增加(P＞0.05),骨结构力学各参数均显著性提高(P＜0.01),大应力、弹性应力显著性提高(P＜0.01),刚性系数增大(P＜0.05),弹性模量增加(P＞Q.05);6个月后中药组SAMP6小鼠皮质骨厚度、横截面积增大(P＜0.01),骨髓腔直径、横截面积减小(P＜0.05),骨的截面力学几何量均显著性提高(P＜0.01),大载荷、弹性载荷提高(P＜0.05),大绕度、大弯矩、能量吸收提高(P＞0.05),弹性应力、刚性系数增加(P＞0.05),弹性模量降低(P＞0.05);与生长激素组比较,3个月后中药组SAMP6小鼠各检测指标结果无明显差异(P＞0.05),6个月后中药组SAMP6小鼠皮质骨厚度、横截面积显著性增大(P＜0.01),骨截面力学几何量增加(P＞0.05),骨生物力学性能参数结果减小,但无统计学意义(P＞0.05).结论 补肾壮骨颗粒可以调节SAMP6小鼠骨宏观几何结构的力学应答机能,改善骨的生物力学性能,增加骨质韧性,增强骨强度,提高抵抗外力变形和骨折的能力;长期用药可提高SAMP6小鼠骨量,以上结果与生长激素治疗SAMP6小鼠骨质疏松的疗效相当,故补肾壮骨颗粒有可能替代价格昂贵且副作用较多的生长激素来治疗老年男性骨质疏松.
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补肾壮骨颗粒质量标准的研究
目的 初步建立补肾壮骨颗粒的质量控制标准.方法 采用TLC法对方中山茱萸、骨碎补进行定性鉴别;采用HPLC法测定方中淫羊藿中的淫羊藿苷,以乙腈-水(30:70)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长270nm,测定了3批补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量.结果 在TLC色谱中可检出山茱萸、骨碎补;在HPLC色谱中,淫羊藿苷可与其他成分分离,且在0.096 2～0.673 4μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r2=0.999 6,样品平均回收率为94.4%,RSD为1.8%(n=6).结论 所建立的方法对方中的3味药材可准确、快速的进行定性、定量检测,可用于补肾壮骨颗粒的质量控制.
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补肾壮骨颗粒对维甲酸致骨质疏松大鼠骨组织计量学的影响
目的 研究补肾壮骨颗粒对维甲酸致骨质疏松大鼠骨组织计量学的影响,探讨补肾壮骨颗粒防治骨质疏松症的机制.方法 实验选用3月龄SD大鼠,按体重随机分为5组:正常对照组、骨质疏松模型组、补肾壮骨颗粒高低剂量组、仙灵骨葆阳性对照组.各组大鼠上午均灌胃给予维甲酸2周,造模同时下午按上述剂量灌胃给予受试药3周,末次给药后晚上禁食,次日以10%水合氯醛腹腔注射麻醉动物,腹主动脉放血处死动物后取左右胫骨,并去掉附着的软组织,放人10%福尔马林中固定,移入10%EDTA溶液中脱钙,再转入酒精内脱水,石蜡包埋,切片并行H-E染色.在光镜10×10倍视野下应用高清晰度彩色病理图文分析系统对胫骨上段松质骨的骨组织作静态测量并计算骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量和骨小梁分离度(取切片中心部的五个视野测量并取其平均数),观察胫骨上段病理形态学变化.结果 与正常对照组相比,模型对照组大鼠的胫骨近端骨松质骨小梁面积百分数及厚度减少,骨小梁数量及分离度增加,有统计学意义(P<0.01),说明造模成功;与模型对照组相比,补肾壮骨颗粒组胫骨近端骨松质的骨小梁面积百分数及厚度增加,骨小梁数量及分离度减少,有统计学意义(P<0.01).结论 补肾壮骨颗粒能减少维甲酸通过激活破骨细胞所引起的骨丢失,改善骨小梁的形态,起到防治骨质疏松症的作用.
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补肾壮骨颗粒干预维甲酸致骨质疏松大鼠的骨生物力学变化
背景:以中药复合成分制成的补肾壮骨颗粒应用于临床治疗骨质疏松症已十余年.目的:验证补肾壮骨颗粒对维甲酸致骨质疏松大鼠骨生物力学的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/06广州医药工业研究所完成.材料:3月龄SD大鼠60只,雌雄各半,体质量227～369 g.按体质量随机分为5组:正常对照组、骨质疏松模型组、补肾壮骨颗粒治疗高、低剂量组、仙灵骨葆阳性对照组,每组12只.补肾壮骨颗粒主要由鹿角胶、龟胶、山药、水蛭等药物组成;仙灵骨葆胶囊由贵州同济堂制药有限公司提供;维甲酸由武汉远城科技发展有限公司提供.方法;各组大鼠上午均灌胃给予维甲酸2周,造模同时下午按指定剂量灌胃给予相应药物:补肾壮骨颗粒低剂量组2.5g/kg,高剂量组5.0 g/kg;仙灵骨葆阳性对照组1.1 g/kg;正常对照组以及骨质疏松模型组给予等量的蒸馏水,1次/d,连用3周.麻醉后处死动物进行大鼠左侧股骨3点弯曲试验、左侧胫骨3点弯曲试验、第4腰椎骨压碎试验.主要观察指标:各组大鼠左侧股骨大荷载、第4腰椎骨骨结构强度及左侧胫骨骨结构强度.结果:模型组大鼠的股骨大荷载、椎骨结构强度均显著低于正常,表明给大鼠灌胃维甲酸,可导致大鼠骨生物力学性能的降低;与模型组相比,各给药组的左侧股骨大荷载、第4腰椎结构强度、左侧胫骨弯曲试验的大荷载结果差异均无显著性意义,但均有增加趋势,其中补肾壮骨颗粒低剂量组的左股骨弯曲试验的大荷载、左胫骨弯曲试验的大荷载、第4腰椎压碎试验的结构强度分别增加了16.2%,17.7%,15.4%.结论:补肾壮骨颗粒能增加小梁骨的骨强度,以低剂量组效果佳,起到防治骨质疏松症的作用.
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HPLC法同时测定补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷及柚皮苷含量
目的:建立HPLC同时测定补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷及柚皮苷含量的方法.方法:Inertsil C18柱(4.6 mm×250mm,5 μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长285 nm.结果:淫羊藿苷0.060 6～6.06 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),加样回收率95.80%,RSD 0.97%;柚皮苷在0.087 4～8.74μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),加样回收率为99.37%,RSD为2.21%.结论:本法操作简便,准确稳定,重现性好,可为全面评价补肾壮骨颗粒的质量提供依据.
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HPLC测定补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量
目的:补肾壮骨颗粒为我院院内制剂,淫羊藿是方中君药.文中采用HPLC建立补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷含量的测定方法. 方法:采用HPLC法,色谱柱:Agilent HC-18(150mm×4.6mm,5μm),柱温:30℃,以乙腈-水(30∶ 70)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长270nm,测定了3批补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量. 结果:在HPLC色谱中,淫羊藿苷可与其他成分分离,且在0.0962～0.6734μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r2=1(P<0.001),样品平均回收率为94.4%,RSD为1.83%(n=6). 结论:该法分离效果好,分析快速、准确,灵敏度高、重现性好,可用于补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量测定.
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补肾壮骨颗粒对原发性骨质疏松症大鼠生化指标和骨密度的影响
目的:探讨补肾壮骨类中药补肾壮骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症的预防作用.方法:用切除卵巢的方法复制大鼠骨质疏松症模型,检测灌服高、中、低3种剂量的补肾壮骨颗粒后大鼠血清生化指标、尿生化指标、骨矿含量及骨密度指标的变化,并与模型组、假手术对照组和阳性对照组进行比较.结果:与模型组比较,3个剂量组的血清雌二醇(E2)和骨钙素(BGP)水平增高,尿钙/肌酐(Ca/Cr)、脱氧吡啶酚(DPD)和血清甲状旁腺素(PTH)水平降低,股骨钙(Ca)、磷(P)和骨密度亦增加.结论:补肾壮骨颗粒对去卵巢造成的大鼠骨质疏松症有明显的防治作用.
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补肾壮骨颗粒含药血清对骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响
目的：探讨补肾壮骨颗粒含药血清对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞（ MSCs）体外增殖的影响。方法：选用10只6月龄SD大鼠去卵巢制作骨质疏松模型，对骨质疏松骨髓间充质干细胞进行分离和体外培养，传代后的 MSCs分为OP组、OP+补肾壮骨颗粒含药血清组和OP+空白血清组，倒置显微镜观察各组MSCs的生长情况，进行形态学观察，并用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法测定生长曲线。结果：OP+含药血清组，MSCs呈典型的集落生长，细胞呈长梭形，突起细长且多，细胞增殖较旺盛，细胞数量不断增加，随着传代次数的增多，细胞增殖速度减慢。OP组及OP+空白血清组MSCs接种后胞体立体感下降，体积较大，细胞偏圆形，突起收缩，增殖速度较慢，细胞数量减少；随着传代次数的增多，细胞增殖速度显著减慢。OP+补肾壮骨颗粒含药血清组骨髓间充质干细胞增殖能力明显提高，生长曲线有显著性差异。结论：补肾壮骨颗粒含药血清能促进去卵巢骨质疏松大鼠MSCs的增殖。
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补肾壮骨颗粒增强骨密度作用的动物实验研究
目的 比较低钙、CaCO3及补肾壮骨颗粒对大鼠股骨生长的影响,进行补肾壮骨颗粒增加骨密度的作用研究.方法 70只清洁级SD雌性大鼠,分设3个剂量的受试组、相应的CaCO3对照组和低钙对照组,喂养90 d后,测定各组大鼠的股骨干重、密度、钙表观吸收率及骨钙含量等指标.结果 3.30,6.60 g/kg.bw剂量受试组的股骨钙含量与钙总量、中点和远心端密度均高于低钙组(P＜0.05或P＜0.01);1.65,6.60 g/kg.bw剂量受试组的股骨钙总量和远心端密度分别高于相应CaCO3组(P＜0.05或P＜0.01);受试组其它指标与CaCO3组相比,无显著差异(P＞0.05).结论 补肾壮骨颗粒的钙吸收率较高,并具有增加骨密度的功能作用.
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HPLC测定补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量
目的:建立反相HPLC测定补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷含量的质量控制方法.方法:采用水提取-聚酰胺柱纯化去杂方法制备供试品溶液,以HPODS柱作为色谱柱,甲醇-水(55:45)为流动相,检测波长为270nm.结果:淫羊藿苷进样量在0.20～1.82μg范围内线性关系良好,r=0.9998;样品平均加样回收率为98.94%,RSD值为2.03%.结论:此方法简便、准确、重现性好,可作为补肾壮骨颗粒的含量测定方法.
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正交设计法优选补肾壮骨颗粒的制备工艺
目的 优选补肾壮骨颗粒的佳制备工艺.方法 分别以干膏中淫羊藿苷和柚皮苷的含量为指标,采用正交试验法优选制备工艺.结果 淫羊藿、水蛭2味药材粉碎成粗粉,用8倍量70%的乙醇为溶媒,加热回流提取1次,提取90 min,淫羊藿苷得率高.其余药材粗粉与药渣一起加水煎煮3次,每次用8倍量水煎煮60 min,柚皮苷得率高.结论 经正交设计优化的补肾壮骨颗粒的制备工艺可行.
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补肾壮骨颗粒联合黄体酮治疗黄体功能不全疗效观察
目的:讨补肾壮骨颗粒与黄体酮胶囊合用治疗黄体功能不全的效果.方法:将68例黄体功能不全的患者随机分成2组,分别用黄体酮胶囊(A组)、补肾壮骨颗粒及黄体酮胶囊(B组)进行治疗.通过分析治疗前后临床症状、月经情况、内分泌指标、基础体温变化,对比两组在治疗黄体功能不全性月经失调的临床疗效.结果:B组治疗黄体功能不全性月经失调治愈率达70.58%,有效率97.06%;而A组治愈率为38.24%,有效率为88.24%,两组比较有显著性差异(P<0.05).结论:黄体酮胶囊与补肾壮骨颗粒合用,治疗黄体功能不全月经失调有较好疗效.
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补肾壮骨颗粒对去势雌性大鼠骨组织雌激素受体蛋白表达的影响
目的 探讨补肾壮骨颗粒对去势雌性大鼠骨组织雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)蛋白表达的影响.方法 将60只6月龄SPF级SD雌性大鼠随机均分为模型组(OVX组)、假手术组(SHAM组)、中药组(CM组)、戊酸雌二醇组(EV组)、雷洛昔芬组(RLX组).各组给药3个月后,每组随机选取半数大鼠测定其脊柱及股骨颈骨密度(BMD),腹主动脉采血处死,立即保留血清并取其左侧股骨,进行血清雌二醇(E2)含量及骨组织ERα及ERβ蛋白表达水平的检测,给药6个月后采用相同方法处理剩余大鼠.结果 与SHAM组比较,各阶段用药后,OVX组脊柱及股骨颈BMD值均下降(P<0.05,P<0.001).与OVX组相比,用药3个月后CM组脊柱及股骨颈BMD值均提高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);6个月后各用药组脊柱BMD值均升高(P<0.05),股骨颈BMD值亦提高,其中CM组提高较明显,差异有统计学意义(P<0.05).与SHAM组相比,两阶段给药后OVX组ERα、ERβ水平均显著降低(P<0.001),与OVX组比较,各用药组两种蛋白水平均显著提高(P<0.001).用药3个月后,3个用药组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);6个月后,CM组ERα蛋白水平高于RLX组(P<0.05),与EV组比较差异无统计学意义(P>0.05).给药3、6个月后,CM组E2含量较OVX组均有提高(P<0.05).结论 补肾壮骨颗粒对去卵巢雌鼠骨组织可能具有类雌激素样作用,且可在一定程度上提高ERα、ERβ蛋白表达水平,提高去卵巢大鼠BMD.
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补肾壮骨颗粒通过GH/IGF-1轴影响快速老化小鼠骨密度
目的 研究补肾壮骨颗粒是否通过提高快速老化小鼠(P6)局部骨组织GH/IGF-1轴的基因表达水平从而提高骨密度.方法 实验分4组:R1小鼠生理盐水灌胃组(R1组),P6小鼠分为生理盐水灌胃组(P6空组)、皮下rhGH组(rhGH组)和补肾壮骨颗粒灌胃组(补肾组),每组各10只,每日干预1次.分别干预3、6个月后进行骨密度测量和胫骨GH mRNA及IGF-1 mRNA表达水平检测.结果 干预3个月后,骨密度比较:R1组及补肾组高于P6空组;rhGH组与P6空组比较差异无统计学意义.GH mRNA和IGF-1 mRNA表达水平比较:R1组、rhGH组及补肾组均高于P6空组.干预6个月后,骨密度比较:rhGH组及补肾组较P6空组提高.GH mRNA和IGF-1 mRNA表达水平比较:GH组及补肾组较P6空组均有所上升.4组GH mRNA表达水平与IGF-1 mRNA表达水平呈正相关.P6各组GH mRNA、IGF-1 mRNA表达水平与全身各部位骨密度呈正相关.结论 补肾壮骨颗粒可以提高P6小鼠全身各部位的骨密度,其作用机制可能与提高局部骨组织GH mRNA与IGF-1 mRNA表达水平有关.
关键词： 补肾壮骨颗粒 快速老化小鼠 骨密度 生长激素 胰岛素样生长因子-1 -
正交试验优选补肾壮骨颗粒醇提工艺
目的:通过正交试验结合多指标综合评价法优选补肾壮骨颗粒醇提组分的提取工艺.方法:建立高效液相色谱法,以马钱苷、补骨脂素、异补骨脂素为指标考察乙醇浓度、乙醇体积、回流时间对提取结果的影响.结果:醇提佳工艺为65%乙醇提取2次,提取溶剂体积分别为10倍、8倍药材量,每次回流提取1h.结论:优选的提取工艺稳定、可行、能耗低,适于工业化生产;多指标综合评价可更合理体现提取效果,适合中药复方成分复杂的特点.
