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CatSperl在小鼠睾丸发育过程中的动态表达及与人精子活力的关系
目的 研究CatSperl mRNA在小鼠睾丸发育过程中的动态变化,并探讨CatSperl蛋白表达与精子运动的关系.方法 采用荧光实时逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)相对定量法检测CatSperl mRNA在出生后11、15、18、21、25、28、35、42、56和120 d龄C57BL/6小鼠(每天龄3只)睾丸中的表达;分别从4例正常精液标本中用四层密度梯度Percoll(浓度分别为95%、76%、57%和47.5%)离心分离出高活力和低活力精子,用于Western Blot定量检测CatSperl蛋白的表达.结果 CatSperl mRNA在18 d龄小鼠睾丸开始表达,在25和28 d龄表达上调明显,分别为21 d龄表达水平的2.95和7.59倍.自42 d后上调缓慢,至成年小鼠时达到高水平.CatSperl蛋白在每例标本高活力精子中的表达量均显著高于低活力精子(P＜0.05).结论 CatSperl与精子活力特性有关,为进一步研究Catgper家族各成员间的关系和确切功能提供参考依据.
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钙离子通道基因突变与癫痫
引起癫痫发作的神经元阵发性同步异常放电与离子通道密切相关.因此,编码钙离子通道的基因成为癫痫病因的候选基因之一.现有的抗癫痫药物(AEDs)被证明其作用机制包括抑制钙通道活性.但目前还缺乏高选择性的钙离子通道阻断剂.了解不同发作类型的癫痫患者不同类型的钙离子通道编码基因突变,对理解癫痫的发病机制和今后的精准诊疗很有必要.现对钙离子通道及其分型、编码基因和已发现在癫痫患者中的突变作一综述.
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肌无力样综合征误诊1例报告
肌无力样综合征是累及神经-肌肉接头突触前膜的自身免疫性疾病,常与小细胞肺癌相伴,是由电压控制性钙离子通道抗体使突触前膜钙离子传递障碍,使突触前膜乙酰胆碱小减少而致肌无力.由于本病易和神经内科疾病混淆,对该病认识不足易误诊.现将接诊的1例情况总结报告如下.
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人参皂苷Rb1和Re对乌头碱所致心肌细胞损伤的保护作用
目的 观察人参皂苷Rb1和Re对乌头碱导致的心肌细胞损伤的影响.方法 选用乳鼠心肌细胞,观察人参皂苷Rb1和Re分别与乌头碱配伍使用后,乳鼠心肌细胞上清心肌酶谱的改变,采用RT-PCR的方法,观察人参皂苷Rb1和Re与乌头碱配伍对心肌细胞钙离子通道基因Cav1.2 mRNA的影响.结果 人参皂苷Rb1和Re可以有效对抗由乌头碱导致的心肌酶谱改变.同时,可以对抗乌头碱所致的钙离子通道基因Cav1.2 mRNA表达上调.结论 人参皂苷Rb1和Re与乌头碱配伍具有减毒增效的作用,这可能与人参皂苷减轻了乌头碱所致的心肌细胞损伤和改善钙离子通道异常表达有关.
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中药对心肌细胞钙离子通道作用的研究与展望
心肌细胞具有两个重要特征:一是在细胞内外环境中存在着巨大的离子浓度差;二是通过短暂的特异离子通道的开启和关闭,可以使细胞膜去极化,引起一系列效应,包括心肌细胞的收缩和舒张,其中钙离子通道扮演了十分重要的角色.
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二仙汤含药血清对过氧化氢诱导成骨细胞骨形成的影响
目的 探讨二仙汤治疗骨质疏松症的可能作用机制.方法 成骨细胞以5×103/孔接种于96孔板,分为正常组、模型组、戊酸雌二醇组和二仙汤高、中、低剂量组,每组6孔.除正常组外其余各组用含600 μmol/L过氧化氢(H2 O2)的完全培养基培养3h诱导成骨细胞骨形成模型.正常组用空白对照血清培养,戊酸雌二醇组给予8％戊酸雌二醇含药血清培养,二仙汤高、中、低剂量组分别给予8％、4％、2％二仙汤含药血清培养48h,检测成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活力、钙结节生成以及骨形成蛋白2(BMP-2)和骨保护素(OPG)蛋白表达.另外以钙离子通道阻断剂Nifdipine(10 μmol/L)进行干预,观察Nifdipine对H2O2刺激成骨细胞后细胞增殖、ALP活性及BMP-2、OPG蛋白表达以及Nifdipine干预下二仙汤含药血清对H2O2刺激成骨细胞后细胞增殖、ALP活性及BMP-2、OPG蛋白表达的影响. 结果 与正常组比较,模型组细胞增殖、ALP活性、钙结节及BMP-2表达降低(P＜0.05或P＜0.01).二仙汤各剂量组能不同程度促进成骨细胞增殖,提高ALP活力和钙结节生成,促进BMP-2、OPG蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01).Nifdipine能提高H2O2刺激下成骨细胞BMP-2、OPG蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01).与Nifdipine组比较,二仙汤含药血清和Nifdipine合用则显著提高H2 O2刺激下的成骨细胞增殖,降低BMP-2、OPG蛋白表达(P＜0.01).结论 二仙汤含药血清能明显改善氧化刺激对成骨细胞骨形成的影响,其机制可能与调节钙离子通道有关.
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重组创伤弧菌溶细胞素诱导 THP-1细胞损伤的机制研究
目的：研究重组创伤弧菌溶细胞素（rVvhA）对人单核细胞白血病细胞（THP-1）的损伤机制及其钙离子通道的研究。方法采用倒置显微镜、CCK-8法、Fluo3/AM法、caspase 活性检测等方法测定rVvhA对THP-1细胞的影响，并研究胞外Ca2＋的内流途径。结果 rVvhA作用后细胞形态学变化明显，细胞皱缩、变形甚至裂解，且呈剂量依赖性。12μg/ml rVvhA 作用THP-1细胞1 h后胞外K＋浓度升高，作用6 h后胞外LDH浓度显著升高。 Verapamil、Mibefradil和SKF-96365均不能抑制rVvhA引起的Ca2＋内流。同时rVvhA可导致THP-1细胞的caspase-3和caspase-9活性升高，并呈时间依赖性。结论 rVvhA对THP-1细胞具有明显的损伤作用，且可能通过caspase-9/3途径诱导细胞凋亡，并能引起细胞内Ca2＋浓度升高，升高的Ca2＋可能通过细胞膜上形成的孔道被动入胞。
关键词： 重组创伤弧菌溶细胞素 人单核细胞白血病细胞 细胞损伤 钙离子通道 -
经典瞬时受体电位通道与血管通透性增高的研究进展
血管通透性增加是急、慢性炎症,肿瘤,血管再生等疾病的重要病理改变,而血管内皮细胞结构和功能完整性在维持血管通透性中起重要作用.内皮细胞半透膜特性的屏障功能可维持机体内环境稳态,保持血管内外胶体渗透压平衡,避免组织水肿引起异常病理改变.凝血酶、组织胺、血管内皮生长因子等炎症介质可作用于血管内皮细胞表面受体引起细胞内信号级联反应,从而导致血管通透性增加[1].位于内皮细胞膜上非选择性电位通道经典瞬时受体电位通道(transient receptor po-tential canonical channel,TRPC)介导的钙离子内流是引起血管内皮细胞通透性增加的关键信号分子.
关键词： 经典瞬时受体电位通道 血管通透性 钙离子通道 -
地尔硫卓及贝那普利对野百合碱诱发的肺动脉高压大鼠肺动脉重构的影响
目的 探讨地尔硫卓和贝那普利对野百合碱诱发的肺动脉高压大鼠肺动脉重构的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体质量200～230 g,分为对照组（一次性腹腔注射1 mL生理盐水）、肺动脉高压组、地尔硫卓组和贝那普利组（后3组一次性腹腔注射野百合碱40 mg/kg）.4周后,地尔硫卓组和贝那普利组分别给予地尔硫卓25 mg/(kg·d)和贝那普利10mg/(kg·d)灌胃治疗,对照组和肺动脉高压组给予相同体积生理盐水,持续4周.待药物干预满4周后,分别测定大鼠的肺动脉平均压(MPAP)、右心室肥厚指数(RVHI)、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比(WT％)及管壁面积占血管总面积的百分比(WA％).留取大鼠的肺动脉干,并采用Western-Blot法测定各组大鼠肺动脉电压门控性钙离子通道a1c亚基(Cava1c)、肌浆网钙ATP酶2a亚基(SERCA-2a)及3型兰尼碱受体(RyR3)蛋白的表达.结果 与对照组比较,肺动脉高压组MPAP[（36.1±4.2）比（23.2±3.3）mm Hg]、RVHI[（45.6±3.8）％比（25.6±2.9）％]、WT％[(58.5±4.6)％比（37:6±3.6）％]、WA％ [(76.8±7.0)％比(51.4±6.4)％]和Cava1c表达均明显升高（均P＜0.05）.与对照组比较,肺动脉高压组SERCA-2a表达明显减弱,RyR3表达明显增多（均P＜0.05）.与肺动脉高压组比较,经地尔硫卓或贝那普利治疗后大鼠的MPAP、RVHI、WT％、WA％和Cava1c表达水平均明显降低(均P＜0.05).结论 地尔硫卓和贝那普利可以通过调节肺动脉高压大鼠肺动脉钙离子通道的表达来改善肺小动脉重构.
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CagA对AGS细胞Ca2+相关蛋白磷酸化的影响
目的:分析幽门螺杆菌(H pllori)细胞毒素相关蛋白A(CagA)对人胃腺癌黏膜上皮细胞(AGS)Ca2+相关蛋白磷酸化的影响,进一步揭来H pylori的致病机制.方法:采用金属离子亲和吸附富集技术富集H pylori、H pylori CagA缺失株(H pylori △CagA)与AGs细胞相互作用4 h,以及培养相同时间的AGS细胞的磷酸化蛋白.利用二维凝胶电泳技术分离磷酸化蛋白,ImageMaster 2D分析软件识别差异蛋白,MALDI-TOF/OF质谱鉴定确认蛋白.结果:Hpylozi △ CagA作用的AGS细胞.与培养相同时间的AGS细胞比较表达量不变,而Hpylori △CagA作用的AGS细胞表达量发生了明显变化,表明此蛋白的变化是单纯由CagA引起的;此类蛋白点共鉴定出19个,其中3个蛋白点与Ca2+相关.钙离子结合蛋白(nucleobindin-2 precursor,CALNUC)在AGS细胞以及H pylori △CagA与AGS相互作用的2-D胶中表达量接近,而H pylori与AGS相互作用后该蛋白表达量明显降低.结论:H pylori △CagA进AAGS细胞可能会影响内质网、线粒体及高尔基体的钙稳态,诱发内质网、线粒体、高尔基体凋亡或增殖途径.而成为胃炎、胃溃疡、胃癌发生的诱因之一.
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心房颤动时人的肺静脉前庭组织中T型钙离子通道的表达改变
目的 研究正常窦律(SR)与心房颤动(AF)两组患者肺静脉前庭(PVA)组织中T型钙离子通道(T-type calcium channel,TTCC)α1G、α1H亚基mRNA及蛋白的表达差异.方法 术中获取各组患者(SR=34,AF=38)少量肺静脉前庭组织标本,实时荧光定量RT-PCR对各组α1G及α1H亚基的mRNA丰度相对定量(2△△Ct法)；蛋白免疫印迹法比较两种α1亚基蛋白表达水平；HE染色及免疫组化染色比较两种α1亚基蛋白在细胞中的分布表达.结果 与SR组相比,AF组患者的肺静脉前庭组织中TTCC的α1H亚基的mRNA表达丰度及亚基蛋白的表达水平均明显升高,但α1G亚基在两组中的表达水平接近,H-E染色及免疫组织化学染色结果与前一结论符合,并证实α1G、α1H亚基蛋白定位于心肌细胞膜表面.结论 AF组对比SR组,其T型钙通道α1H亚基表达显著增加,而α1G亚基的表达水平两组间无明显差异.
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钙通道和细胞内钙信号对小肠葡萄糖吸收的调节作用及机制
迄今为止葡萄糖在小肠黏膜的吸收机制已被系统地阐明和接受,即经典的钠葡萄糖同向转运体(SGLT1)介导的主动转运机制.此外,当肠腔葡萄糖浓度高于SGLT1的转运饱和度时,葡萄糖转运蛋白2(GluT2)可能一过性易位于小肠黏膜上皮细胞顶膜来参与葡萄糖的异化扩散吸收,但小肠黏膜上皮细胞葡萄糖吸收的调节机制仍然不是完全清楚.近年来钙离子通道(CRAC)及细胞内钙信号对葡萄糖的吸收调节作用备受关注,二者可通过调节肠道葡萄糖转运体SGLT1和GluT2的表达及功能来调节小肠葡萄糖的吸收.本文以CRAC及细胞内钙信号对小肠黏膜上皮细胞葡萄糖的吸收调节作用及其分子机制进行论述,希望能为肥胖及其相关疾病的防治提供新的视野及潜在的新药研发靶点.
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钙池操纵性钙内流及经典瞬时受体电位蛋白和瞬时受体电位香草酸蛋白在大鼠远端肺静脉平滑肌上的表达
本研究旨在通过观察远端肺静脉上经典瞬时受体电位(TRPC)通道蛋白和瞬时受体电位香草酸(TRPV)通道蛋白的表达以及钙池操纵性钙内流(SOCE)的水平,探讨慢性低氧对肺静脉平滑肌的影响,从而研究肺静脉平滑肌在低氧性肺动脉高压发病中的作用及其机制.慢性低氧可造成肺动脉和肺静脉的收缩和血管重塑,其中慢性低氧对肺动脉的影响已得到深入的研究,但针对肺静脉的研究目前尚未获得重视.我们的前期研究结果显示,SOCE是低氧性肺动脉高压时肺动脉平滑肌细胞内钙离子失衡的主要原因,并可引起肺动脉收缩和血管重塑.钙池操纵性钙离子通道(SOCC)是一种钙离子通道,主要由瞬时受体电位通道蛋白构成.
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钙离子通道对支气管哮喘影响的研究进展
钙离子通道是气道上细胞重要的离子通道之一,它与气道慢性炎症、气道高反应性、气道重塑有关,深入了解它们的结构、功能以及调控机制,有助于揭示哮喘的发病机制,并为临床治疗哮喘提供新的理论依据.
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欧前胡素衍生物OW1对血管舒张作用及机制研究
目的 考察欧前胡素衍生物OW1对大鼠不同动脉的舒张作用,并探讨其可能的舒张作用机制.方法 采用多通道微血管张力测定方法,以高钾预收缩的大鼠主动脉、肾动脉、大脑中动脉、冠状动脉、肺动脉以及肠系膜动脉,评价OW1对这6种动脉的舒张效应;分别考察内皮、β-肾上腺素受体、3种钾离子通道考察其对OW1舒张曲线的影响;干预细胞内钙及外钙的浓度,检测其对OW1抑制收缩曲线的影响.结果 OW1可以完全舒张上述6种动脉,Emax均在90％以上,pEC50分别为(6.11±0.09),(5.76±0.01),(6.22±0.08),(5.78±0.05),(5.65±0.01)和(6.59±0.07).阻断内皮、β-肾上腺素受体、ATP敏感性钾通道和内向整流钾通道后均对OW1的舒张曲线无影响,阻断钙离子激活钾离子通道可使OW1的舒张曲线明显地非平行性右移,Emax降低,并且OW1可以抑制外钙的内流以及内钙的释放,降低细胞内的钙离子浓度,从而抑制血管收缩.结论 OW1可以舒张上述6种血管,其涉及的血管舒张机制主要包括抑制电压依赖性钙通道和受体介导的Ca2*的内流和释放.
关键词： 欧前胡素衍生物OW1 血管舒张 钙离子通道 降压药物 -
成骨细胞钾、钙离子通道的研究进展
骨质疏松的发病率呈现逐年上升的趋势,患者生活质量下降,其所带来的危害已引起全世界的广泛关注.骨质疏松的发病机制复杂,涉及因素较多,但成骨细胞功能障碍处于中心环节.研究发现成骨细胞表达多种离子通道,本文将对钾离子和钙离子通道进行综述分析.
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丙泊酚对肺动脉平滑肌细胞跨膜钙离子移动影响的实验研究
目的 探讨丙泊酚对肺动脉平滑肌细胞跨膜钙离子移动的影响.方法 SD大鼠麻醉后迅速取出心肺,分离肺动脉平滑肌细胞.进行体外培养.应用Fluo-3/AM进行荧光标记.采用激光共聚焦显微镜观察并测定有或无丙泊酚时,氯化钾(KCI)以及去氧肾上腺素(PE)对细胞内钙离子浓度的影响.结果 KCI(60mmol/L)及PE(10+6mol/L)均能诱发体外培养的肺动脉平滑肌细胞内游离钙离子浓度的升高:加入50μmol/L丙泊酚后细胞荧光值由22.0±9.2降至16.4±8.0(P＜0.01).丙泊酚可显著抑制KCI及PE诱发的细胞内钙离子浓度的升高,荧光强度倍率分别由7.11±3.56降至3.43±0.79、1.35±0.14.结论 丙泊酚对肺动脉平滑肌细胞膜上钙离子通道存在一定的抑制作用.
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不同种类双氢吡啶钙通道阻滞剂的肾脏保护作用
一、双氢吡啶钙通道阻滞剂的种类已知电压控制钙离子通道可分为L-,T-,N-,P/Q-和R-型5个亚型[1].
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新型钙离子通道TRPV5与特发性高钙尿症关系的研究进展
泌尿系结石是泌尿外科的常见病,在泌尿外科住院患者中占居首位,经过有效的治疗,仍有相当数量的病例会出现结石复发.近年来随着对泌尿系结石病因的深入研究,结石的代谢危险因素越来越为研究者们所重视,且结石复发的预防工作也成为泌尿外科工作者们关心的重点.
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脑缺血/再灌注神经元钙离子通道的研究进展
脑缺血/再灌注损伤主要与自由基过度形成、兴奋性氨基酸毒性作用、炎性反应、细胞内Ca2超载及细胞凋亡等密切相关,其中Ca2超载及其触发的一系列有害代谢反应是导致脑缺血/再灌注时神经元损伤和死亡的关键因素.该文通过总结生理情况下神经元胞内外的钙离子通道和缺血再灌注时神经元钙离子通道的变化,揭示脑缺血/再灌注时神经元钙超载的机制,为临床脑缺血类疾病的治疗提供新的靶点.
