首页 > 文献资料
-
钙离子对重组创伤弧菌溶细胞素诱导THP-1细胞损伤的影响机制
目的 研究重组创伤弧菌溶细胞素( rVvhA)诱导人单核细胞白血病细胞(THP-1)的凋亡机制及其Ca2+的变化.方法 采用CCK-8法、激光共聚焦显微镜结合Fluo 3/AM法、流式细胞术结合AnnexinV -PI标记等检测rVvhA对THP-1细胞的影响,并观察胞内Ca2+浓度变化.结 果rVvhA可诱导THP-1细胞发生凋亡并引起细胞内Ca2+浓度升高,细胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM处理组胞内钙离子升高幅度远高于细胞外钙离子螯合剂EGTA处理组.结论 rVvhA具有诱导THP-1细胞凋亡的生物学活性,并能引起细胞内Ca2+浓度升高,升高的Ca2+主要源于胞外钙离子内流.
关键词： 创伤弧菌 溶细胞素 钙离子 人单核细胞白血病细胞 -
重组创伤弧菌溶细胞素诱导 THP-1细胞损伤的机制研究
目的：研究重组创伤弧菌溶细胞素（rVvhA）对人单核细胞白血病细胞（THP-1）的损伤机制及其钙离子通道的研究。方法采用倒置显微镜、CCK-8法、Fluo3/AM法、caspase 活性检测等方法测定rVvhA对THP-1细胞的影响，并研究胞外Ca2＋的内流途径。结果 rVvhA作用后细胞形态学变化明显，细胞皱缩、变形甚至裂解，且呈剂量依赖性。12μg/ml rVvhA 作用THP-1细胞1 h后胞外K＋浓度升高，作用6 h后胞外LDH浓度显著升高。 Verapamil、Mibefradil和SKF-96365均不能抑制rVvhA引起的Ca2＋内流。同时rVvhA可导致THP-1细胞的caspase-3和caspase-9活性升高，并呈时间依赖性。结论 rVvhA对THP-1细胞具有明显的损伤作用，且可能通过caspase-9/3途径诱导细胞凋亡，并能引起细胞内Ca2＋浓度升高，升高的Ca2＋可能通过细胞膜上形成的孔道被动入胞。
关键词： 重组创伤弧菌溶细胞素 人单核细胞白血病细胞 细胞损伤 钙离子通道
