首页 > 文献资料
-
微囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的实验研究
观察微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的疗效.选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液,分离消化胰腺组织,用淋巴细胞分离液(Histopaque-1077)纯化胰岛细胞,将微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植于糖尿病小鼠腹腔.分离的胰岛细胞对刺激反应良好,微囊化和未囊化胰岛细胞移植后均可纠正糖尿病小鼠的高血糖状态,但未囊化胰岛细胞移植组只能维持血糖正常2～3d,而微囊化胰岛细胞移植组可持续降低血糖30d以上.微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠具有良好的效果,微囊具有较好的免疫隔离作用.
-
成人胰岛细胞移植术患者的围手术期管理
目的 探讨成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病的围手术期管理方法与效果.方法 对护理人员进行合理配置,进行有效的专科技能培训.加强移植前调控与健康教育,着重围手术期监护,严格随访.把握各环节的护理重点和危险因素,进行个性化护理指导.结果 移植受者血糖控制平稳,并发症少,未发生外源性感染,且患者对护理工作满意.结论 加强围手术期护理管理对胰岛细胞移植全过程的质量保证起到了关键作用.
-
胰岛移植的临床应用概况
胰岛移植作为一种β细胞替代疗法,近年来取得了相当大的进展.因为其具有简单、安全、经济、易推广等优点,已在一些移植中心应用于临床,成为有效的Ⅰ型糖尿病治疗方法之一.在以基础研究为指导的临床应用中,相对于胰岛素替代疗法、胰腺移植,胰岛移植表现出更好的前景和独特优势,但其远期疗效不尽理想.
-
网膜囊——胰岛细胞移植的新位点
临床胰岛细胞移植已在全世界范围内广泛开展,其理想效果能使糖尿病患者达到胰岛素非依赖.
-
免疫抑制剂对糖尿病小鼠胰岛细胞移植长期存活效果的研究
目的 观察胰岛细胞移植后应用免疫抑制剂对胰岛组织长期存活的影响.方法 对Wistar大鼠胰腺进行灌注,分离和纯化胰腺的胰岛细胞;将纯化的胰岛移植入C57BL/6糖尿病小鼠肾包膜下,分组对移植后的小鼠进行不同免疫抑制剂(他克莫司、雷帕霉素、抗白介素-2R抗体)不同方案联合治疗,比较各个方案组与对照组(不同任何免疫抑制剂)的差异性.并对术后移植物存活时间、糖耐量试验以及外周血CD+4、CD8+T细胞亚群和IL-2含量进行分析和比较.对移植部位进行组织学切片,分析胰岛周围单核细胞现象.结果 单纯移植组在无任何免疫抑制剂的情况下,异种胰岛一般在术后10天左右丧失功能,外周血中CD+4 T细胞亚群明显高于使用免疫抑制剂组(P＜0.05),而CD8+T细胞亚群没有明显变化(P＞0.05),IL-2含量各组无明显差异(P＞0.05).各实验组1周后血糖浓度变化与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05).应用T+R+A组,移植受体存活时间长平均为161.4±40.4天.结论 他克莫司、雷帕霉素及抗白介素-2R抗体联合用药,能够不同程度的提高胰岛细胞移植后糖尿病小鼠的存活时间.
-
糖尿病视网膜病变患者胰岛细胞移植的术后护理
糖尿病是一种严重危害人类身体健康和降低生活质量的全球性常见病,由于胰岛素分泌障碍或不能发挥原有的生理作用,引起糖代谢紊乱导致血管病变,严重者可引起肢体坏死、失明和肾功能衰竭等一系列严重的并发症.而糖尿病视网膜病变是导致糖尿病患者失明的重要原因之一,严重影响患者的生活质量.
-
人胰岛细胞移植中胰岛细胞活性研究
目的:器官联合切取中的不同胰腺获取方法是否对于胰岛细胞的活性有影响.方法:实验于2001-08/2004-08在南方医科大学珠江医院器官移植中心和南方医科大学解剖教研室完成,12例自愿捐赠器官供者,采用高渗枸橼酸盐嘌呤溶液经过腹主动脉进行原位灌注后,进行胰腺、肾脏联合切取,肝脏、胰腺、肾脏联合切取及各器官的单独切取.取后采用胶原酶P消化胰腺,分离并纯化胰岛细胞,进行胰岛细胞活性染色,然后对比不同切除方法对于胰岛细胞活性率的影响.结果:胰腺、肾脏联合切取,肝脏、胰腺、肾脏联合切取及各器官的单独切取,如顺利、无污染、在冷却血时间5 h以内,胰岛细胞活性率都在80%,经原位灌注后各方法之间无明显差别.结论:经腹主动脉进行原位灌注后,各种方法切取都符合无污染,冷却时间5 h以内,不会影响胰岛细胞的活性.
-
大鼠胰岛细胞移植的磁共振监测
目的 探讨磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)对超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)标记的胰岛细胞在大鼠肝脏内的成像方法,用于监测胰岛细胞移植术后移植物在大鼠体内的存活及排异情况.方法 采用GE 3.0T Signa Excite磁共振扫描仪,配合3英寸小动物线圈.实验动物为20只雄性Wistar大鼠和5只雄性Lewis大鼠.将SPIO标记的胰岛细胞移植入大鼠肝脏内,未用SPIO标记的作为阴性对照,比较两组的差异.对SPIO标记后移植的大鼠分别用FSE T2WI序列和GRE T2·WI序列扫描,比较序列敏感性的差异.分别将取自Wistar大鼠和Lewis大鼠的胰岛细胞,用SPIO标记后移植入Wistar大鼠肝脏内,观察两移植组受体体内的胰岛细胞存活及排异的情况.将同基因移植组的大鼠于移植术后3月处死,异基因移植组的大鼠于移植术后3周处死,作病理切片,将所得结果与MRI的图像进行对照.结果 只有SPIO标记后的胰岛细胞可以被MRI监测到,表现为肝实质背景上的低信号点.GRE T2·WI较FSE T2WI序列对SPIO的监测更敏感.同基因移植组于移植后第1周、第2周及第3周的低信号点相对数量分别为(90.03±9.52)%、(92.87±18.21)%和(86.25±24.81)%,而异基因组的相对数量分别为(41.40±15.41)%、(33.41±14.01)%和(23.58±16.78)%.两组相对数量之间的差异具有显著的统计学意义(P<0.01).病理结果显示,标记后的胰岛细胞内确实存在铁颗粒,同基因移植组3月后在肝窦内仍能找到保存完好的移植物,而异基因组在移植后3周只有极少量的移植物残留.结论 MRI能对大鼠体内SPIO标记的胰岛细胞进行成像,用于活体实时监测胰岛细胞移植术后移植物的存活及排异情况.
-
SD大鼠胰腺导管上皮细胞培养技术的研究
目的分离纯化SD大鼠胰腺导管上皮细胞,为将其转分化为胰岛细胞提供细胞来源.方法用酶消化法培养SD大鼠胰腺导管上皮细胞,观察细胞增殖动态,用CK-19进行免疫组化鉴定.结果胰腺导管上皮细胞可在体外有效扩增,有效去除成纤维细胞是扩增的关键.结论低血清培养和反复贴壁法可获得较纯的胰腺导管上皮细胞.
-
同种胰岛细胞移植及采用改良Edmonton方案治疗1型糖尿病三例
目的 探讨供者胰岛细胞的分离技术和质量标准及同种胰岛细胞移植和采用改良Edmonton方案治疗1型糖尿病的安全性与有效性.方法 3例1型糖尿病患者接受了同种胰岛细胞移植.供者胰腺均取自成人心脏死亡器官捐献(DCD)供者,在药品生产质量管理标准(GMP)实验室内用Liberase酶消化胰腺,用COBE 2991细胞分离机分离和连续密度梯度纯化获取高纯度与高活性的胰岛细胞.胰岛细胞培养12h后,检测其达到移植标准,再经皮穿刺肝脏门静脉主干,经门静脉将胰岛细胞匀速移植到受者肝脏内.术后采用抗人T淋巴细胞兔免疫球蛋白(ATG)联合应用他克莫司+吗替麦考酚酯的改良Edmonton免疫抑制方案,随访1年定期监测受者的血糖、C肽与糖化血红蛋白水平的变化.结果 3例受者移植胰岛细胞的数量为460 000～505 200胰岛当量(IEQ),胰岛细胞纯度为38.5％～49.7％,胰岛细胞活率为95％～97％,胰岛素释放指数为2.8～5.4.3例受者术后在正常饮食下血糖均被严格控制在7.8 mmol/L以下,其中2例分别于术后3和5个月完全停用胰岛素,另1例受者在术后12个月时胰岛素用量减少了超过60％.3例受者术后C肽和糖化血红蛋白均恢复到正常范围,肾功能得以改善,未发生低血糖发作、药物不良反应及急性排斥反应和感染等移植并发症.结论 胰岛细胞的分离技术可靠、安全性好;同种胰岛细胞移植并采用改良的Edmonton方案治疗1型糖尿病的近期临床疗效良好,远期效果仍有待进一步观察.
-
体外转染可溶性IL-1RI-Ig基因延长糖尿病小鼠移植胰岛细胞存活时间
目的 探讨糖尿病小鼠移植经可溶性白细胞介素1(IL-1)受体胞外段Fc融合蛋白(sIL-1RI-Ig)基因修饰的胰岛细胞对延长移植物存活时间的作用及机制.方法 将Ad-sIL-1RI-Ig体外转染Balb/c小鼠的胰岛细胞,并将其移植给糖尿病C57BL/6小鼠,观察移植物的存活时间,并检测移植局部组织炎症细胞的浸润以及炎症细胞因子的表达.结果 糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后,血糖水平很快下降至正常范围,胰岛移植物存活时间达(39±3)d,而移植正常胰岛细胞的小鼠胰岛移植物存活时间为(9±2)d(P<0.01).糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后,胰岛素分泌量随糖负荷增加而升高,并与胰岛素分泌功能正常的小鼠呈相似变化趋势(P>0.05).糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后,移植局部组织表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)和RANTES等水平明显下调;病理学观察发现移植局部组织浸润的炎症细胞明显少于移植正常胰岛细胞的小鼠.结论 sIL-1RI-Ig基因转染胰岛细胞后,可通过表达sIL-1RI-Ig,阻断IL-1的作用,降低TNF-α、IFN-γ、RANTES等细胞因子的表达,从而减轻排斥反应,延长胰岛细胞移植物的存活时间和提高胰岛素分泌功能.
-
胰岛细胞移植治疗糖尿病
胰岛细胞移植是治疗糖尿病的一个有效方法,但供胰的极度缺乏阻碍了这个方法的应用.因此很多科学家在探索胰岛β细胞的其它来源途径.目前出现的热点途径有成体干细胞和胚胎干细胞,基因工程改造的β细胞,异种胰岛细胞等.尽管这些方法都还需进一步完善,但无疑给1型和2型糖尿病的治愈带来了希望.
-
扶芳藤含药血清对大鼠胰岛细胞的保护机制
目的 探讨扶芳藤含药血清对大鼠胰岛细胞的保护作用及其机制.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为5组,每组8只,包括对照组(正常大鼠胰岛细胞予正常大鼠血清培养)、缺血预处理组(获取胰腺前阻断腹主动脉再开放,胰岛细胞予正常大鼠血清培养)、扶芳藤治疗组(正常大鼠胰岛细胞予大鼠扶芳藤含药血清培养)、扶芳藤组和空白组(正常大鼠分别予扶芳藤提取物或蒸馏水灌胃,用于制备大鼠血清).采用双硫腙(DTZ)染色法观察并计算胰岛数量;采用吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)染色法,计算胰岛细胞存活率;采用胰岛素释放实验计算刺激指数(SI)来评价胰岛细胞功能;采用谷胱甘肽(GSH)及一氧化氮(NO)试剂盒测定胰岛细胞内GSH、NO含量;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)信使核糖核酸(mRNA)的表达水平.结果 经DTZ染色后胰岛细胞呈特异性猩红色,各组间胰岛细胞数量比较,差异无统计学意义(均为P>0.05).随培养时间延长,各组胰岛细胞活性均逐渐降低,分离培养72 h后,与对照组比较,扶芳藤治疗组细胞存活率更高,差异有统计学意义(P<0.05).胰岛素释放实验检测结果提示,与对照组相比,缺血预处理组及扶芳藤治疗组的SI均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与对照组比较,缺血预处理组及扶芳藤治疗组胰岛细胞的GSH含量均升高、NO含量均降低、iNOS mRNA表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 扶芳藤能通过提高GSH、降低iNOS表达及NO产生,提高胰岛细胞存活率,增强胰岛功能.
-
Exendin-4对糖尿病小鼠异种移植胰岛细胞的保护作用
目的:探讨Exendin-4对糖尿病小鼠异种移植胰岛细胞的作用.方法:将雄性SD大鼠胰岛细胞移植到链脲佐菌素诱导雌性C57BL/6糖尿病小鼠的左肾包膜下,后连续腹腔注射Exendin-4,观察移植胰岛细胞的生物活性及存活时间.结果:胰岛细胞移植后可降低糖尿病小鼠血糖.与对照组比,实验组胰岛细胞存活时间明显延长.结论:Exendin-4对糖尿病小鼠异种移植胰岛细胞具有保护作用.
-
可溶性小鼠CD83-Ig对同种胰岛β细胞在糖尿病模型小鼠体内存活的影响
目的 研究可溶性小鼠CD83-Ig对NIT-1细胞在同种异基因糖尿病模型小鼠体内存活时间的影响.方法 将表达小鼠CD83胞外功能区和人IgGlαFc融合基因的真核表达载体pmcD83-hIg转染COS-7细胞,取细胞培养上清液制备CD83-Ig融合蛋白.采用链尿佐菌素(STZ)诱导法制作BALB/c小鼠糖尿病模型,并移植胰岛细胞系NIT-1进行治疗,同时在NIT-1移植的-1,1和3 d输注CD83-Ig,并观察输注CD83-Ig对NIT-1在糖尿病模型小鼠体内存活时间的影响.结果 移植NIT-1后第3天各组小鼠血糖均恢复至正常水平;移植物NIT-1细胞在输注CD83-Ig组小鼠体内的存活时间为18 d,较在输注入IgG组和PBS组小鼠体内的存活时向(均为9 d)明显延长;输注CD83-Ig组小鼠平均存活时间为(44.50±6.41)d,而输注人IgG组和PBS组小鼠存活时间分别为(29.86±4.18)d和(30.71±4.49)d.结论 CD83-Ig融合蛋白可延长小鼠胰岛β细胞在同种异基因糖尿病小鼠体内的存活时间,可能是一种用于治疗移植排斥反应的较好的免疫抑制剂.
-
VCAM-1/VLA-4与胰岛细胞移植后再血管化的关系
目的 探讨胰岛细胞移植后VCAM-1/VLA-4对移植物再血管化的影响.方法 30只Wistar糖尿病模型大鼠分为糖尿病模型组、生理盐水组和免疫抑制剂组,其中糖尿病模型组常规喂食外未进行任何处理,生理盐水组和免疫抑制剂组进行了胰岛细胞移植,在术后分别采用生理盐水和免疫抑制剂进行处理.在术后每天固定时间进行外周血血糖测定,在术后10天和60天分别切取部分肝脏组织进行免疫组化分析肝脏组织中VCAM-1、VLA-4及F Ⅷ-RA表达变化以观察三者间的关系.结果 糖尿病模型组血糖变化不明显,术后NS组和免疫抑制剂组血糖均有下降,然而NS组血糖逐渐上升接近糖尿病模型组,免疫抑制剂组血糖稳定;术后VCAM-1、VLA-4在Ns组表达较糖尿病模型组及免疫抑制剂组增高,P<0.05;术后F Ⅷ-RA在免疫抑制剂组表达较糖尿病模型及NS组增高,P<0.05;F Ⅷ-RA同血糖相关性分析,A组:r=-0.09 7,P=0.684,无相关性;B组:r=-0.44 7,P=0.04 8,呈负相关性;C组:r=0.39 0,P=0.039,呈正相关性;VCAM-1/VLA-4与F Ⅷ-RA相关性分析:各组间VCAM-1与F Ⅷ-RA均无相关性,个组间VLA-4与F Ⅷ-RA均呈正相关性.结论 VCAM-1/VLA-4与胰岛细胞移植后的再血管化密切相关.
关键词： 胰岛细胞移植 再血管化 血管细胞粘附分子-1 极迟抗原-4 -
胰岛细胞移植治疗糖尿病现状与进展
糖尿病是多基因遗传与环境因素长期共同作用所导致的一组以慢性高血糖为特征的代谢疾病;由于体内胰岛素相对或绝对不足或靶细胞对胰岛素敏感性降低(受体或受体后缺陷)所引起的内分泌代谢性疾病.目前全世界约有1.5亿糖尿病患者,预计到2025年将达到3亿.
-
胰岛细胞与骨髓间充质干细胞联合移植治疗糖尿病的进展
目的 总结胰岛细胞与骨髓间充质干细胞联合移植治疗糖尿病的可行性与安全性.方法 收集国内外有关胰岛细胞与骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病的文献并作综述.结果 目前糖尿病的治疗方法主要为胰腺移植和胰岛细胞移植,其中胰腺移植的手术创伤大、死亡率高;胰岛细胞移植虽安全性较高,但排斥反应强,胰岛细胞在体内的长期存活时间不理想,严重影响其远期疗效.骨髓间充质干细胞与胰岛细胞联合移植能缓解排斥反应,延长胰岛细胞的存活时间,可以更有效地治疗糖尿病.结论 胰岛细胞与骨髓间充质干细胞联合移植具有降低排斥反应、减轻炎症反应、延长胰岛细胞的存活时间及延长降血糖时间的效果,可能是新的治疗糖尿病的手段.
-
胰岛细胞移植治疗糖尿病的历史、现状与未来
1 胰腺和胰岛细胞移植治疗糖尿病的简史根据糖尿病发病机制的不同分为1型糖尿病和2型糖尿病.1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,占糖尿病人群的5％～10％[1].尝试采用外科手段来治疗糖尿病的历史可追溯到20世纪中叶,德国斯特拉斯堡(Strasburg)大学的Oskar和Minkowski将羊的胰腺切成组织碎片后移植给糖尿病患者,结果失败[2].直到1966年,密里苏达大学的Kelly等[3 ]首次施行了全胰腺器官移植,取得了治疗糖尿病史上里程碑式的成功.
-
胰岛移植的分子影像示踪与监测
目的 总结目前胰岛移植分子影像示踪与监测的不同方法.方法 对当前国内、外有关胰岛移植分子影像示踪与监测的研究报道进行综述和分析.结果 MRI具有高敏感性,高空间分辨率,可应用于临床,可在MR实时引导下进行药物注射,无放射性损伤等优点,但缺点是无法区分肝细胞以及未存活的移植胰岛细胞,在肝铁离子过量的患者中无法进行监测.核素分子显像的优点是特异性高,只有存活的细胞产生信号,可应用于临床,但具有离子辐射,有可能会篡改基因,无解剖成像,空间分辨率低,放射性示踪半衰期较短.光学成像特异性高,只有存活的细胞产生信号,获取途径多样,无放射性损伤,但有可能会篡改基因,空间分辨率低,尚无法应用于临床.结论 磁共振、核素影像、光学成像以及基于微囊胰岛的多模态影像,都可以对胰岛移植物进行分子影像的示踪与监测,基于微囊胰岛的多模态影像可能会是未来佳的方法.
