关节镜清理术联合艾瑞昔布对膝骨性关节炎的疗效及对MMP-2、MMP-13水平的影响

目的 分析关节镜清理治疗膝骨性关节炎(KOA)术后联合艾瑞昔布的疗效及对基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)水平的影响.方法 选取2014年12月-2016年12月遵义市第一人民医院收治的65例KOA患者,根据术后用药不同将其分为对照组和观察组.两组均采用关节镜下有限清理术治疗;对照组术后服用安慰剂治疗,观察组术后服用艾瑞昔布治疗.观察两组治疗前后关节功能改善情况、生活质量评分情况、关节液中MMP-2、MMP-13、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)水平和血清中一氧化氮(NO)、白细胞介素1β(IL-1β)及白细胞介素1(IL-1)水平变化情况.结果 两组治疗后疼痛评分、日常活动评分、关节僵硬评分及综合评分均较治疗前下降,观察组治疗后疼痛评分、日常活动评分、关节僵硬评分及综合评分均低于对照组(P<0.05);两组治疗后关节液中MMP-2、MMP-13及TIMP-1水平均较治疗前下降,观察组治疗后关节液中MMP-2、MMP-13及TIMP-1水平均低于对照组(P<0.05).两组治疗后血清NO和IL-1水平均较治疗前下降,而IL-1β 水平较治疗前上升(P<0.05);观察组治疗后血清NO和IL-1水平均低于对照组,而IL-1β 水平高于对照组(P<0.05);两组治疗后生活质量评分较治疗前改善,观察组治疗后生活质量评分优于对照组(P<0.05).结论 关节镜清理术后联合艾瑞昔布治疗KOA可有效改善患者关节功能,降低患者关节液中MMP-2、MMP-13水平,提高患者生活质量.

多普勒超声联合血清可溶性间皮素相关肽及癌胚抗原检测对早期卵巢癌的预测价值

目的 探讨多普勒超声联合血清可溶性间皮素相关肽(SMRP)及癌胚抗原(CEA)检测对早期卵巢癌的预测价值.方法 选取2015年1月-2017年1月该院收治的120例卵巢肿块患者依据病理诊断结果分为卵巢癌组(55例)和良性肿瘤组(65例),另选取同期来该院体检的50例正常女性作为健康人群组.所有患者均行彩色多普勒超声检查,同时采集外周血测定血清SMRP、CEA水平.与病理诊断结果作比较,分析多普勒超声、SMRP和CEA单独应用及联合诊断卵巢癌的诊断效能.结果 卵巢癌组、良性肿瘤组、健康人群组3组间血清SMRP、CEA水平比较,差异有统计学意义(F=68.546和31.367,均P=0.000);卵巢癌组血清SMRP和CEA水平高于良性肿瘤组和健康人群组(P<0.05).良性肿瘤组与健康对照组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).卵巢癌组超声血流参数阻力指数(RI)和搏动指数(PI)低于良性肿瘤组(P<0.05).超声联合血清SMRP、CEA水平联合检测的敏感性(92.7％)高于其他4项检测的敏感性(83.6％、72.7％、75.0％ 及80.0％)(P<0.05).联合检测在提高卵巢癌检测敏感性的同时,还保持较高的特异性(80.0％),超声联合血清SMRP、CEA水平联合检测的ROC曲线下面积(0.846)大于各指标单独检测(0.810、0.665及0.730)(P<0.05).结论 超声联合血清SMRP、CEA水平检测可提高卵巢癌诊断的敏感性,并能够保持较高的特异性,对于卵巢癌的的早期筛查诊断具有一定价值.

非诺贝特联合二甲双胍治疗2型糖尿病的疗效分析

目的 探讨非诺贝特联合二甲双胍治疗2型糖尿病(T2DM)的疗效.方法 选取2014年6月-2016年6月沧州市中心医院治疗的112例T2DM患者,按随机数字表法将其分为对照组和研究组,每组56例.对照组予以二甲双胍治疗,口服二甲双胍0.5 g,2次/d;研究组基于对照组结合非诺贝特治疗,口服非诺贝特0.2 g,1次/d.两组均持续用药3个月.观察并比较两组临床疗效、治疗后血清Nesfatin-1、视黄醇结合蛋白4(RBP4)、脂联素(APN)水平及安全性.结果 研究组总有效率高于对照组(87.50％vs 69.64％)(P<0.05);研究组治疗后血清Nesfatin-1、APN水平高于对照组,而RBP4低于对照组(P<0.05);两组不良反应情况比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 非诺贝特联合二甲双胍治疗T2DM能有效改善血糖,其机制可能与有效控制血清Nesfatin-1、RBP4及APN水平有关.

3种喹诺酮类药治疗尿路感染效果的Meta分析

目的 系统评价莫西沙星与左氧氟沙星、加替沙星治疗尿路感染的临床疗效.方法 利用Cochrane Library、Pubmed、Embase、中国生物医学文献数据库、中国知网及万方数据库(自建库至2017年2月28日)检索符合要求的随机对照试验研究,按照Cochrane风险偏倚评估工具评价纳入研究的方法学质量.运用Rev Man 5.3软件计算合并效应及95％CI,并按照不同药物种类和给药方式进行分层分析.结果 共纳入8篇符合标准的文献(包括1039例研究对象),入选病例的治疗药物有莫西沙星、左氧氟沙星及加替沙星.Meta分析显示,莫西沙星治疗尿路感染的总有效率低于左氧氟沙星和加替沙星(P<0.05),但两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);分层分析显示,莫西沙星治疗尿路感染总有效率低于左氧氟沙星(P<0.05),而与加替沙星比较,差异无统计学意义(P>0.05).莫西沙星与左氧氟沙星、加替沙星通过口服给药治疗尿路感染总有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与左氧氟沙星、加替沙星相比,莫西沙星治疗尿路感染的临床疗效并无优势.

酒精中毒对交通事故重型颅脑外伤患者炎症反应和预后的影响

目的 探讨血清酒精浓度(BAC)对交通事故重型颅脑外伤患者炎症反应和预后结果的影响.方法 采用前瞻性研究选取2012年1月—2016年12月收治的92例交通事故重型颅脑外伤患者,根据酒精浓度将患者分为BAC阳性组(40例,BAC>0.5‰)和BAC阴性组[52例,BAC<0.5‰,将伤情严重程度评分(ISS)≥16和简略受伤标准(AIS)头部AIS≥3的患者纳入该研究].患者入急诊科采集血标本检测BAC、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)及白细胞计数水平,收集患者在急诊室或院前急救时的临床资料和生存情况,根据两组不同指标进行统计学分析.结果 两组ISS评分和格拉斯哥评分(GCS)比较,差异无统计学意义(P>0.05);BAC阳性组IL-6、TNF-α、CRP及白细胞计数低于BAC阴性组(P<0.05);BAC阳性组收缩压、心率及体温均低于BAC阴性组,而呼吸频率高于BAC阴性组(P<0.05);BAC阳性组输浓缩红细胞较少(P<0.05);两组住院时间比较差异无统计学意义(P>0.05).两组颅脑外伤的并发症包括单器官衰竭、多器官衰竭及全身炎症反应综合征(SIRS)、脓肿、肺炎和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 创伤性脑损伤(TBI)患者中BAC阳性与IL-6、TNF-α、CRP及白细胞计数的下降有相关性,酒精可能对TBI患者单核细胞等免疫细胞具有抑制炎症因子分泌的作用.

血清转氨酶对急性冠脉综合征患者PCI术后生存状况的影响

目的 探讨血清转氨酶对急性冠脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后生存状况的影响.方法 选取2013年4月-2017年1月胸科医院因急性冠脉综合征(ACS)行PCI治疗的符合条件的冠心病患者315例作为研究对象.分为死亡组45例,对照组270例.结果 两组年龄、心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及体重比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);与死亡者比较,两组白蛋白、血红蛋白(Hb)、尿素、肌酐(Cr)、尿酸(VA)、C反应蛋白(CRP)、肌酸激酶-MB、γ-谷氨酰转肽酶、丙氨酸转氨酶及门冬氨酸转氨酶水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);通过多因素非条件logistic回归模型分析,发现患者年龄、HR、尿素、Cr、VA、CRP、肌酸激酶-MB、γ-谷氨酰转肽酶、丙氨酸转氨酶及门冬氨酸转氨酶水平是死亡的影响因素(P<0.05),与白蛋白、血红蛋白呈负相关.结论 血清转氨酶升高是影响患者PCI术后生存状况的因素之一,预示着较高的死亡率.

丙泊酚联合骶管阻滞对下腹部麻醉患儿的影响

目的 探究丙泊酚联合骶管阻滞对下腹部麻醉患儿血流动力学及血清人 β 淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)、人 β 淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)的影响.方法 选取2016年2月-2017年4月在儿童医院行下腹部手术的患儿73例作为研究对象,根据随机数字表法分为对照组(36例)和观察组(37例).对照组患儿采用氯胺酮﹑丙泊酚复合静脉麻醉的麻醉方式,观察组患儿采用丙泊酚联合骶管阻滞的麻醉方式.比较两组患儿的麻醉效果﹑血流动力学指标﹑血清Aβ1-42和Aβ1-40水平及不良反应的发生情况.结果 观察组患儿的麻醉诱导时间、苏醒时间均短于对照组(P<0.05);观察组与对照组收缩压、舒张压及心率组内、组间及时间变化趋势有差异(P<0.05),观察组变化趋势较小;麻醉前后两组患儿Aβ1-40和Aβ1-42水平的比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);观察组患儿各种不良反应的发生率均低于对照组(P<0.05).结论 丙泊酚联合骶管阻滞对行下腹部手术的患儿进行麻醉时,麻醉效果好,对血流动力学及血清Aβ1-42、Aβ1-40的影响小,因而发挥作用更为平稳、且不良反应的发生率低,值得推广应用.

《中国现代医学杂志》投稿须知

醋酸甲地孕酮改善中晚期结直肠癌患者化疗后骨髓抑制及生活质量的应用价值

目的 探讨醋酸甲地孕酮(MA)改善中晚期结直肠癌患者化疗后骨髓抑制和改善患者生活质量的应用价值.方法 将98例中晚期结直肠癌患者随机分为实验组和对照组,每组各49例.实验组应用化疗加口服MA分散片;对照组仅进行化疗.两组均进行2周期XELOX标准方案化疗,观察并分析两组骨髓抑制、KPS评分、体重及生活质量的变化情况.结果 两组骨髓抑制、KPS评分及体重比较,差异有统计学意义(P<0.05),实验组较对照组生活质量改善(P<0.05).结论 MA能有效改善中晚期结直肠癌患者化疗后骨髓抑制,提高生活质量、且不增加毒副作用,值得进一步推广.

核糖核酸降低食管癌患者放疗期间呕吐等不良反应的疗效观察

目的 观察注射用核糖核酸Ⅱ对食管癌患者放射治疗(放疗)期间呕吐等不良反应的临床效果和安全性.方法 选取2014年5月—2017年1月江苏省肿瘤医院放疗科收治的食管癌患者76例,随机分为对照组与观察组.对照组只接受放疗;观察组在接受放疗的同时应用注射用核糖核酸Ⅱ辅助治疗.比较两组治疗前后呕吐等不良反应、药物不良反应发生情况及免疫力.结果 与对照组比较,观察组呕吐和放射性食管炎发生率降低(P<0.05);观察组放疗总有效率(81.6％)较对照组(55.3％)提高(P<0.05),红细胞、白细胞及血小板数量升高(P<0.05);血清中CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+升高(P<0.05),而头晕发生率降低(P<0.05).结论 注射用核糖核酸Ⅱ具有降低食管癌放疗患者呕吐等副反应、保护血细胞及提高免疫力的作用,还能增强放疗效果.

垂体强化MRI对垂体柄阻断综合征的诊断价值及对垂体-靶腺功能损伤的评估意义

目的 分析垂体强化磁共振成像(MRI)在垂体柄阻断综合征中的诊断价值及对垂体-靶腺功能损伤的评估意义.方法 选取该院86例垂体柄阻断综合征者为病例组,另选取50例健康儿童和青少年为对照组.根据病例组垂体MRI表现,其中完全性垂体柄阻断者为A组,部分性垂体柄阻断者为B组.比较A组、B组与对照组相关激素参数的水平,并分析MRI表现与垂体-靶腺功能损伤的关系.结果 病例组86例患者中垂体后叶正常4例(4.65％),体积变小16例(18.60％),发生异位56例(65.12％),缺失10例(11.63％).A组、B组睾酮(T)、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)等性激素水平较对照组均降低(P<0.05),而A组T水平较B组降低(P<0.05),而A、B两组其他性激素水平的比较,差异无统计学意义(P>0.05).A组皮质醇(COR)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)等激素的水平较对照组、B组均降低(P<0.05);B组COR和FT4的水平较对照组均降低(P<0.05),而其他激素水平的比较,差异无统计学意义(P>0.05).A组因垂体激素缺乏引起继发性肾上腺功能减退、甲状腺功能减退和中枢性尿崩症的发生率较B组升高(χ2=10.24、7.35及9.35,均P<0.01).结论 垂体强化MRI能够有效诊断垂体柄阻断综合征者垂体-靶腺功能损伤的状况,其在评估垂体柄阻断综合征垂体功能中具有较高的诊断价值.

PET/CT联合血清MIC-1、SCC-Ag诊断肺癌的临床效能分析

目的 探讨正电子发射断层显像/X射线计算机断层成像(PET/CT)联合血清巨噬细胞抑制因子1(MIC-1)、鳞癌相关抗原(SCC-Ag)诊断肺癌的临床价值.方法 选取2015年1月-2017年1月武汉市普爱医院收治的120例疑似肺癌的患者接受PET/CT检查,取血测定其血清MIC-1、SCC-Ag水平.依据病理结果分为肺癌和良性病变组.比较PET/CT、血清MIC-1、SCC-Ag单独和联合诊断肺癌的敏感性和特异性.结果 肺癌组和良性病变组的SUVmax分别为(9.22±1.37)、(2.28±0.93),MIC-1分别为(1.35±0.23)及(0.37±0.09)ng/ml,SCC-Ag分别为(3.89±1.02)及(0.72±0.17)ng/ml,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);PET/CT诊断肺癌的敏感性(94.1％)高于MIC-1(77.9％)、SCC-Ag(76.5％)(P<0.05),特异性(48.1％)低于MIC-1(84.6％)、SCC-Ag(82.7％)(P<0.05);PET/CT+MIC-1、PET/CT+SCC-Ag及PET/CT+MIC-1+SCC-Ag 3种联合诊断方案的敏感性、特异性分别为82.4％、92.3％,79.4％、88.5％,88.2％及100.0％(均P>0.05),PET/CT+MIC-1、PET/CT+SCC-Ag及PET/CT+MIC-1+SCC-Ag联合诊断肺癌的ROC曲线下面积分别为0.782、0.765及0.843.结论 肿瘤标志物MIC-1、SCC-Ag可作为PET/CT诊断肺癌的补充手段,三者联合能够有效改善肺癌诊断的敏感性和特异性,提高诊断效果.

脊柱不稳定性预测评分系统对OVCF患者椎体强化术后再发骨折的预测价值

目的 探究脊柱不稳定性预测评分系统对骨质疏松性椎体压缩性骨折患者(OVCF)椎体强化术后骨折再发的预测效果.方法 选取2015年6月-2017年6月该院行椎体强化术的OVCF患者,收集其一般情况和影像学资料,以及随访过程中再发骨折情况和视觉疼痛评分,利用Logistic回归分析骨折再发的危险因素,并对其赋分,构建脊柱不稳定性预测评分系统,计算似然比检测该系统的准确性.结果 共纳入342例患者,2例失访,142例患者再发骨折.再发骨折的危险因素包括脊柱后凸角度、椎体后凸角度、椎体高度、强化椎体的数量、骨密度以及骨折部位.根据预测评分系统评分将所有患者分为4组,总体评分<5分组似然比为0.10,总体评分≥15分组似然比为5.84.结论 脊柱不稳定性预测评分系统较为准确地预测椎体强化术后OVCF患者的骨折再发风险,可为骨折再发的预防提供理论依据,值得临床深入探究.

冠状动脉微循环阻力指数与传统心血管危险因素、Hcy及LP-PLA2的相关性研究

目的 探讨冠状动脉(冠脉)微循环障碍与LP-PLA2、Hcy的相关性,以及其发生、发展的相关危险因素.方法 63例冠脉造影显示临界病变(狭窄40％～70％,且测量冠脉血流储备分数(FFR)>0.8),冠脉造影术后测量前降支微循环阻力指数(IMR)值,以IMR中位数为界分为IMR正常组(<21.3 u)和IMR升高组(≥21.3 u).分别记录和测定两组一般资料、相关生化指标、心血管疾病危险因素和血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)及同型半胱氨酸(Hcy)值,分析各指标与IMR的关系.结果 63例患者完成IMR测量,IMR范围:6.5～42.3 u,中位数:21.3 u,与正常组比较,IMR升高组HDL-C和CFR更低,而Hcy和年龄较高(P<0.05);IMR值与Hcy、年龄及LDL-C(r=0.263)呈正相关(P<0.05),与CFR、HDL-C呈负相关(P<0.05),与LP-LPA2水平无相关性(P>0.05);多因素logistic回归分析显示,年龄、Hcy是IMR升高的危险因素(P<0.05),HDL-C、CFR是IMR升高的保护因素(P<0.05).结论 ①FFR>0.8的冠脉临界病变中,CFR可作为评估冠脉微循环的指标;②年龄和Hcy是冠脉微循环障碍的危险因素,CFR和HDL-C是冠脉微循环的保护因素;③年龄的增长、HDL-C水平的降低和Hcy可能参与冠脉微循环障碍的病理过程,导致IMR值升高.

高强度聚焦超声联合竹红菌素软膏对外阴上皮非瘤样病变组织中P16、CD34的影响

目的 探讨聚焦超声联合竹红菌素软膏治疗对外阴上皮非瘤样病变组织P16、CD34的影响.方法 选取2010年12月-2015年12月在衡水市人民医院进行治疗的80例外阴上皮非瘤样病变(NNED)患者为研究对象.其中,2013年12月以前入院的40例患者作为对照组,选择与其状况相似的2013年12月以后入院的40例患者作为观察组.对照组患者接受聚焦超声治疗,观察组患者接受聚焦超声联合竹红菌素治疗.比较两组患者治疗效果和治疗前后病变组织P16、CD34水平.结果 治疗后两组患者外阴瘙痒评分、皮肤弹性评分和外阴白色病变面积均变小(P<0.05),观察组患者外阴瘙痒评分、皮肤弹性评分和外阴白色病变面积小于对照组(均P<0.05).治疗后两组患者外阴组织P16蛋白水平均上升(P<0.05),但观察组患者治疗后P16水平较对照组更高(P<0.05),CD34蛋白水平下降(P<0.05),但观察组患者治疗后CD34蛋白水平更低(P<0.05).结论 聚焦超声联合竹红菌素软膏治疗NNED疗效好,能增加病变组织中P16蛋白含量,降低CD34蛋白含量,提示NNED的发生发展可能与细胞周期失调和微循环障碍有关.

尺骨鹰嘴截骨入路治疗复杂肱骨远端冠状面剪切骨折

目的 研究经尺骨鹰嘴截骨入路切开复位内固定治疗复杂肱骨远端冠状面骨折的疗效.方法 选取2006年-2017年采用肘后尺骨鹰嘴截骨入路治疗复杂肱骨远端冠状面剪切骨折患者13例.其中,男性4例,女性9例.术后随访,通过检查患者骨折愈合情况、肘关节屈伸和前臂旋转角度、肘关节功能评分以及并发症情况以评价疗效.结果 所有患者切口均一期愈合,无切口并发症发生.患者均至少获12个月随访.功能评价以末次随访结果为准.所有患者骨折均获得愈合.无内固定失败及缺血性骨坏死发生.患者肘关节伸直角度(8.08±5.60)°,屈曲角度(134.62±7.21)°,前臂旋转角度(89.23±2.77)°,Mayo肘关节功能评分(MEPS)(91.15±5.46).仅1例患者出现关节挛缩及轻度骨关节炎表现,1例患者诉肘关节极度屈曲时有视觉模拟评分(VAS)2度疼痛.其余患者皆无并发症发生.结论 肘后尺骨鹰嘴截骨入路治疗复杂肱骨远端冠状面剪切骨折具有操作简单、暴露充分、副损伤风险低、复位可靠、固定坚强的优点,功能预后良好.

杨梅素联合围脂滴蛋白对脂肪细胞脂解的影响

目的 研究杨梅素(Myric)与围脂滴蛋白(PLIN1)联合作用对3T3-L1脂肪细胞脂解的影响.方法 常规培养及诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,筛选出Myric佳干预浓度和时间.Myric联合sh-RNA干扰载体对已诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞进行联合干预,实验共分为四组:联合干预组(Myric+sh-RNA)、转染组(sh-RNA)、杨梅素组(Myric)和空白组.采用油红O进行脂滴染色,观察脂滴形态;采用酶学方法检测细胞中三酰甘油(TG)和甘油含量,了解细胞脂解情况;采用Western blot检测脂肪细胞中PLIN1A、三酰甘油脂肪酶(ATGL)和激素敏感性脂肪酶(HSL)的表达量.结果 以浓度为100μmol/L的Myric干预72 h时,细胞内TG含量低,甘油含量高,脂解效果佳,与其他浓度和干预24 h比较,差异有统计学意义(P<0.05).联合干预后,与Myric组和sh-RNA组比较,Myric+sh-RNA组细胞内TG含量下降,甘油含量升高,脂滴形态变小,数量减少,差异有统计学意义(P<0.05).同时,Myric+sh-RNA组PLIN1A蛋白表达量降低,ATGL和HSL蛋白表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Myric联合PLIN1可以更有效降低PLIN1表达量,提高ATGL与HSL的表达量,从而提高脂解效率.

膀胱癌中巨噬细胞浸润与膀胱癌化疗耐药的研究

目的 探究膀胱癌分泌趋化因子生长调节基因5(CXCL5)招募巨噬细胞对膀胱癌化疗耐药的影响.方法 应用Transwell小室招募实验检测不同处理条件下对人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1)招募能力改变;使用Western blot测定CXCL5、PARP/cleaved-PARP蛋白水平改变;通过qRT-PCR检测CXCL5的mRNA水平改变;使用MTT实验测定巨噬细胞及多柔比星处理对膀胱癌增殖能力的影响.结果 膀胱癌细胞相对正常膀胱上皮细胞招募更多的THP-1(P<0.05);膀胱癌细胞相对正常膀胱上皮细胞CXCL5在蛋白水平和mRNA水平表达上调(P<0.05);膀胱癌细胞中CXCL5敲减能抑制膀胱癌细胞对THP-1细胞的招募能力(P<0.05);巨噬细胞与膀胱癌细胞共培养后再加入多柔比星cleaved-PARP上调减弱,细胞存活率增加(P<0.05).结论 膀胱癌细胞能分泌CXCL5招募过多的巨噬细胞促进膀胱癌化疗耐药.

人睾丸特异表达基因PIAS-NY原核表达和多克隆抗体的制备

目的 构建PIAS-NY-pET30a原核表达载体,并诱导其成功表达,经纯化后获得高浓度的可溶性融合蛋白His-PIAS-NY,免疫小鼠获得鼠源性PIAS-NY多克隆抗体.方法 以人精原cDNA文库为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增PIAS-NY开放阅读框,克隆到pET30a表达载体中,酶切、PCR鉴定构建重组质粒.测序完全正确后将质粒PIAS-NY-pET30a转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行大量扩增,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.超声、离心、His-Ni柱亲和层析纯化包涵体蛋白,依次经过不同浓度尿素进行蛋白质复性,获得高浓度的可溶性His-PIAS-NY融合蛋白.分6次BalB/C小鼠腹腔注射乳化纯化蛋白.2个月后小鼠眼球取血,收集血清.结果 成功构建原核表达质粒PIAS-NY-pET30a;利用终浓度1 mmol/L IPTG 37℃诱导4 h,大肠杆菌BL21大量表达融合蛋白His-PIAS-NY,并以包涵体形式存在于菌体中;尿素变性后His-Ni柱纯化融合蛋白,复性后获得高浓度的可溶性蛋白His-PIAS-NY;6次免疫后收获存活小鼠抗血清;酶联免疫吸附测定(ELISA)抗血清滴度达到1:100000;免疫印迹和免疫共沉淀证实PIAS-NY抗血清能特异性识别293T细胞和GC2细胞中PIAS-NY蛋白.结论 成功获得PIAS-NY多克隆抗体,而且具有高反应性和高特异性,PIAS-NY在GC2细胞和293T细胞中表达,并且能够与RUVBL2蛋白发生相互作用.

miRNA-375靶向磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α 对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨miRNA-375靶向磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位 α(PIK3CA)对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响.方法 选取宫颈癌细胞系SiHa,分别转染miRNA-375模拟基因、miRNA-375抑制剂、对照模拟基因及对照抑制剂,采用RT-PCR法检测miRNA-375表达,Western blot检测PIK3CA蛋白表达,MTT法检测细胞增殖活性,划痕实验检测细胞迁移能力.双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-375与PIK3CA的靶向关系.结果 转染miRNA-375模拟基因后miRNA-375表达上调,PIK3CA蛋白表达降低(P<0.05);转染miRNA-375抑制剂后miRNA-375表达降低,PIK3CA蛋白表达增强(P<0.05).转染miRNA-375模拟基因后SiHa细胞增殖活性、迁移能力降低(P<0.05);转染miRNA-375抑制剂后SiHa细胞增殖活性、迁移能力增强(P<0.05).miRNA靶基因预测软件检测结果显示,miRNA-375能作用于PIK3CA 3'-UTR.与转染对照模拟基因比较,共转染miRNA-375模拟基因与PIK3CA-WT可使SiHa荧光素酶活性降低(P<0.05).结论 miRNA-375可抑制宫颈癌细胞增殖及迁移,其机制可能与靶向调控PIK3CA有关.

背根神经节巨噬细胞迁移抑制因子参与调控神经病理性疼痛的机制研究

目的 探讨脊髓背根神经节(DRG)巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)对神经病理性疼痛的作用及可能的调控机制.方法 成年雄性SD大鼠随机分为3组(n=8):假手术组(Sham组)、坐骨神经结扎(CCI)模型对照组(以下简称CCI组)、ISO-1组(CCI+鞘内注射ISO-1).鞘内置管5 d后予以左侧坐骨神经结扎.CCI组和ISO-1组连续14 d鞘内注射10％DMSO 10μl或含ISO-130μg的DMSO 10μl,每天1次.在术前1天,术后第1、3、5、7、10及14天(给药2 h后)测定机械痛阈值;在第7和14天取大鼠DRG,ELISA检测肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的表达变化,Western blot检测MIF表达变化,并于第14天记录受损坐骨神经传导速度(CV).结果 与Sham组比较,术后CCI组机械痛阈值均降低(P<0.05);与CCI组比较,ISO-1组术后第10和14天机械缩足反射阈值均升高(P<0.05).与Sham组比较,CCI组第7和14天背根神经节MIF、TNF-α、IL-1β 表达上调(P<0.05);与CCI组比较,ISO-1组第7和14天MIF、TNF-α、IL-1β表达下调(P<0.05).神经电生理的结果显示,与Sham组比较,CCI大鼠坐骨神经的CV降低,差异有统计学意义(P<0.05);ISO-1组与CCI组大鼠坐骨神经的CV比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 鞘内注射MIF拮抗剂ISO-1可以减轻大鼠机械痛敏,下调DRG MIF、TNF-α 和IL-1β 表达,但不能修复受损坐骨神经.MIF拮抗剂ISO-1可能通过抑制脊髓背根神经节炎症反应,减轻大鼠神经病理性疼痛.

五味子酚对心肌成纤维细胞增殖和转化生长因子β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的 研究五味子酚(Sal)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFb)增殖及转化生长因子 β1(TGF-β1)和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响,探讨Sal抗心肌纤维化的可能机制.方法 采用酶消化法结合差速贴壁法获得纯化的CFb;利用免疫荧光法鉴定CFb;采用MTT法检测Sal对CFb增殖的影响;采用Western blot检测CFb的TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平.结果 在一定浓度范围内,Sal能抑制AngⅡ诱导的CFb增殖且具有剂量依赖性(P<0.05);Sal能抑制TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,与AngⅡ组比较差异有统计学意义(P<0.05),且具有剂量依赖性.结论 Sal能抑制CFb增殖及降低Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,其机制可能与下调TGF-β1蛋白表达有关.

感染性心内膜炎合并中枢神经系统感染延诊1例

1 临床资料患者,女性,27 岁,主因持续发热 1 个月入院.患者入院 1 月前无明显诱因出现发热,体温高38.8℃,以午后为著,伴头痛、全身乏力,无发冷、寒战,无咳嗽、咳痰、盗汗,无恶心、呕吐及腹痛,无皮疹、肌肉关节痛及口腔溃疡等,多次就诊于当地县医院,诊断不清,均以上呼吸道感染给予抗感染、对症治疗,效果不佳.为求进一步诊治就诊于我科门诊,以不明原因发热收住院.患者既往诊断为"心脏瓣膜病(具体不详)";近 1 个月体重下降约 5 kg.否认糖尿病、脑血管疾病史,否认患疟疾、肝炎、结核等传染病及接触史.入院查体 :体温 38.5℃,脉搏 82 次 /min,呼吸 19 次 /min,血压 120/76 mmHg,神志清楚,查体合作,轻度贫血貌,咽部无充血,扁桃体不大,心肺及腹部未见阳性体征,双下肢无水肿.颈无抵抗,Kernig 征、Brudzinski 征均阴性.

遗传性出血性毛细血管扩张症致消化道出血2例

1 临床资料患者,女性,67 岁,间断黑便 14 年,鼻衄 6 年.血红蛋白(hemoglobin, Hb)58 g/L;胃镜和胶囊内镜:食管、胃、十二指肠及小肠内多发毛细血管丛,胃内多发,直径 3 ～ 8 mm,少量病变表面可见活动性渗血,考虑毛细血管扩张症 ;腹部 B 超 :肝实质回声增粗,肝总动脉及其分支迂曲、增粗,肝总动脉直径 8 mm,门静脉增宽、脾大.

亲环蛋白A在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨亲环蛋白A(CyPA)在肝细胞癌(HCC)及血清中的表达及临床意义.方法 收集80例术后经病理证实为HCC的肝癌组织、对应癌旁组织及血清标本,另选取同期健康体检者血清标本80例做为对照.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学法检测肝癌组织及癌旁组织中CyPA的表达水平;ELISA检测HCC和健康对照者血清中CyPA的含量;分析肝癌组织和患者血清中CyPA含量与临床病理特征的关系;受试者工作曲线(ROC)分析比较血清AFP和CyPA单独或联合对肝癌的诊断价值.结果 肝癌组织中CyPA mRNA和蛋白的相对表达水平为(5.66±1.77)和(3.20±1.08),高于癌旁组织的(1.13±0.27)和(0.74±0.22)(P<0.05);肝癌组织CyPA阳性率为77.5％(60/80),高于癌旁组织CyPA阳性率28.75％(23/80)(P<0.05);HCC患者血清中CyPA含量为(79.75±17.09)ng/ml,高于健康对照(16.0±63.46)ng/ml(P<0.05).相关性分析结果显示,不同年龄、性别、肿瘤大小和AFP含量的患者的CyPA阳性率,差异无统计学意义(P>0.05),不同血管浸润、肿瘤包膜是否完整、不同TNM分期及不同Edmondson分级的CyPA阳性率,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤大小的患者的血清中CyPA含量,差异无统计学意义(P>0.05);不同血管浸润、肿瘤包膜是否完整、不同TNM分期、不同AFP含量及不同Edmondson分级的患者的血清中CyPA含量,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线显示AFP单独诊断的敏感性为82.1％,特异性为79.3％,曲线下面积为0.813(95％CI:0.695,0.931);CyPA单独诊断的敏感性为92.6％,特异性为70.3％,曲线下面积为0.798(95％CI:0.654,0.943);而AFP和CyPA两者联合诊断的敏感性为80.9％,特异性为90.7％,曲线下面积为0.909(95％CI:0.833,0.984).结论 CyPA在HCC组织和血清中高表达,且与临床病理特征相关,可能作为HCC诊断潜在的肿瘤标志物.

miRNA-185和DNA甲基转移酶1在妊娠合并系统性红斑狼疮患者T细胞中的表达及其意义

目的 探讨miRNA-185和DNA甲基转移酶1(DNMT1)在妊娠合并系统性红斑狼疮(SLE)患者T细胞中的表达及在发病中的作用.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹检测DNMT1 mRNA和蛋白的表达,核转染后72 h检测甲基化敏感性基因的水平.并与健康人群比较,分析其表达差异及意义.结果 结果显示,miRNA-185在妊娠合并SLE患者的CD4+T细胞中上调(P<0.05),其过表达与DNMT1 mRNA水平呈负相关.在健康人CD4+T细胞中,miRNA-185的过表达会导致DNA低甲基化、CD11a和CD70基因编码的上调.抑制SLE患者的CD4+T细胞中miRNA-185的表达,会起到DNA甲基化逆转作用.结论 miRNA-185能靶向作用于DNMT1,并导致系统性红斑狼疮患者妊娠期间CD4+T细胞的DNA低甲基化.miRNA-185可能是SLE干预治疗的潜在治疗靶点.